河南省腫瘤醫(yī)院,生物醫(yī)學(xué)研究室研究員,趙承彥
作為一位科研工作者,接觸到中國生物器材網(wǎng)也有好幾年的時間了。平時遇到需要采購一些儀器也會習(xí)慣在生物器材網(wǎng)搜索查詢。近日恰巧登陸網(wǎng)站看到20周年的征文活動,就從我平時工作接觸到的細胞計數(shù)為例,說一些我的看法和建議。 目前生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用的細胞計數(shù)儀器都存在一些問題,細胞計數(shù)準確度都不高。細胞計數(shù)的目的是確定細胞懸液里的細胞密度,要求真實、準確。細胞密度是單位體積內(nèi)的細胞數(shù)。細胞密度由計數(shù)樣本體積和樣本體積里細胞數(shù)兩個測量參數(shù)構(gòu)成。兩個測量參數(shù)有一個計量不準確,細胞密度就不準確。根據(jù)這兩個測量參數(shù),看看目前常用的幾種細胞計數(shù)儀器存在的問題。 包括最常用的血球計數(shù)板,流式細胞計數(shù)儀,細胞自動計數(shù)分析儀,這三種類型的細胞計數(shù)方法,涵蓋了現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域細胞計數(shù)的基本技術(shù)和方法。三種類型細胞計數(shù)方法存在的主要問題是檢測獲得的細胞密度都不夠準確,其次還存在兩個問題:一是檢驗細胞樣品不能回收再用,二是不能準確計數(shù)總量小于1000個細胞的樣本。例如,極限稀釋細胞克隆實驗是研究細胞增殖、分化、凋亡的一種方法,需要準確計數(shù)幾百個細胞,然后回收單個種植到培養(yǎng)孔內(nèi)。上述三種細胞計數(shù)方法都做不到。 計數(shù)細胞獲得一個準確的細胞密度,看起來很復(fù)雜,難度很大,實際上真正理解了細胞計數(shù)的目的和要求也不難解決。如果能夠準確取一定量細胞樣本,放到一個容器里,準確記錄全部細胞,問題就解決了。怎樣準確記錄一個容器里的全部細胞?如果容器里有幾百個細胞,無規(guī)律分布在底面上,用顯微鏡觀察,全部準確計數(shù)出來不太可能,如果把容器底部分割成許多個方格,標出行列號,一個方格中只有幾個細胞(不超過10個),很容易準確記錄出來,既不會漏計,也不會重計,將各個方格里的細胞數(shù)匯總起來就是全部細胞數(shù)。實際上將細胞培養(yǎng)板底部標記上方格,用之替代血球計數(shù)板和Cellometer的細胞樣品室,問題就解決了。 類似這樣在科研工作中遇到的問題,很希望有一個平臺能架起我們用戶和企業(yè)溝通的橋梁,通過共同的努力來解決問題。期望中國生物器材網(wǎng)今后能夠再進一步深層次的為科研用戶解決困難。 |