新品發(fā)布:SmartFlare RNA"靈光"活細(xì)胞RNA檢測納米技術(shù)
瀏覽次數(shù):4388 發(fā)布日期:2013-7-18
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突破性的納米創(chuàng)新技術(shù),開辟RNA研究新時(shí)代!
- 無需樣本制備
- 無需 RNA 擴(kuò)增
- 無需轉(zhuǎn)染試劑
- 無需細(xì)胞裂解
- 無毒性
只要一步孵育即可直接檢測活細(xì)胞內(nèi)的RNA!檢測完成后,探針可以從細(xì)胞中排出,細(xì)胞仍可用于下游實(shí)驗(yàn)分析!
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SmartFlare™ RNA“靈光”技術(shù)原理:
每個(gè)SmartFlare™探針都是一個(gè)納米金顆粒上面連接著多拷貝的雙鏈寡核苷酸序列,其中一條鏈(“報(bào)告鏈”)帶有熒光集團(tuán),靠近納米金顆粒時(shí),熒光淬滅。當(dāng)目標(biāo)RNA與納米金顆粒上的“捕獲鏈“結(jié)合時(shí),“報(bào)告鏈”被釋放,上面的熒光基團(tuán)會(huì)發(fā)出熒光,通過熒光檢測平臺(tái)檢測到。


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活細(xì)胞RNA檢測納米技術(shù)原理視頻:
SmartFlare™ RNA“靈光”應(yīng)用舉例:
1) 利用胞內(nèi)的RNA標(biāo)志物進(jìn)行細(xì)胞分選,分選后的細(xì)胞仍可用于下游研究。
以miR-155為標(biāo)志物進(jìn)行細(xì)胞篩選:用10 ng/mL of TNF alpha 刺激miR-155高表達(dá)和低表達(dá)的細(xì)胞6小時(shí),然后用VCAM 抗體進(jìn)行標(biāo)記,并用流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析。
A. miR-155低表達(dá)的細(xì)胞經(jīng)過TNF alpha刺激后,VCAM標(biāo)記沒有明顯的增加。
B. miR-155高表達(dá)的細(xì)胞經(jīng)過TNF alpha刺激后,VCAM標(biāo)記有明顯的上調(diào)。
C. 將TNF alpha 刺激的miR-155低表達(dá)和高表達(dá)細(xì)胞結(jié)果重疊,顯示MFI值有8.7倍的升高。

以miR-155為標(biāo)志物篩選的細(xì)胞用TNF-alpha處理,然后用VCAM 抗體標(biāo)記并用流式細(xì)胞儀檢測(點(diǎn)擊放大)
2) 用流式細(xì)胞儀進(jìn)行RNA定量
利用SmartFlare™技術(shù)檢測HeLa和MCF-7細(xì)胞中EGFR的mRNA水平及HUVEC和HT1376細(xì)胞中FGF2的mRNA水平,結(jié)果顯示出與定量RT-PCR很好的相關(guān)性。

SmartFlare™檢測mRNA水平和RT-PCR結(jié)果的相關(guān)性(點(diǎn)擊放大)
3) 及時(shí)觀察活細(xì)胞中目標(biāo)RNA的表達(dá):
利用EGFR特異的SmartFlare RNA“靈光”顯示MCF7和HeLa細(xì)胞中EGFR的表達(dá)量不同(紅色)
利用無規(guī)則序列的對(duì)照探針進(jìn)行實(shí)驗(yàn),在細(xì)胞中看不到任何信號(hào)(左邊兩幅圖)。

顯微鏡顯示EGFR SmartFlare RNA“靈光”的特異性和動(dòng)力學(xué)范圍
SmartFlare™ RNA“靈光”還可以對(duì)miRNAs進(jìn)行定量檢測,同時(shí)檢測多個(gè)目標(biāo)RNA,在同一細(xì)胞樣本中對(duì) RNA 和蛋白進(jìn)行同時(shí)檢測。
更多的應(yīng)用期待您的探索!
歡迎參加2013默克密理博生物科學(xué)新品發(fā)布會(huì)(北京站,上海站),了解更多SmartFlare"靈光"特色應(yīng)用,點(diǎn)擊此處>>
SmartFlare™ 技術(shù)兼容的熒光檢測平臺(tái):
- FlowSight® 多維全景流式細(xì)胞儀
- ImageStreamx MarkII 量化成像分析流式細(xì)胞儀
- Guava® easyCyte系列微毛細(xì)管細(xì)胞分析平臺(tái)
- Muse™ 智能觸控細(xì)胞分析儀
- CellASIC™ 微流控細(xì)胞芯片實(shí)驗(yàn)室
更多應(yīng)用及技術(shù)詳情請(qǐng)參考:
www.merckmillipore.com/smartflare
技術(shù)咨詢熱線:400-889-1988
Email: asiatechserv@merckgroup.com