西美杰獨(dú)家代理Applichem品牌RNaseA（a2760）

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英文名稱：Ribonuclease A 

核糖核酸酶A（RNase A） 來源：牛胰腺。

分子量：13.7kD
CAS：9001-99-4
外觀：類白色結(jié)晶或凍干粉
特性：類型：Type I-A          活性：70u/mg protein
鑒定：約70% as RNase A (SDS-PAGE
制備不含DNase的RNase：將RNase A溶解在0.01M的醋酸鈉(pH5.2)中，使終濃度為10mg/ml，加熱到100℃，15min，在室溫下緩慢冷卻。用0.1體積的1M的 Tris-cl調(diào)整PH  pH至7.4后，分裝小管保存在-20℃?zhèn)溆�，�?dāng)濃縮的溶液在中性pH條件下加熱到100度時(shí)，核糖核酸酶產(chǎn)生沉淀。

活性：在25°C和pH值5.0條件下，活性被定義為一個(gè)單位的酶量導(dǎo)致RNA產(chǎn)生的水解速度常數(shù),k = 1
儲(chǔ)存：-20℃

 

RNase A是一種被詳細(xì)研究和具有廣泛應(yīng)用的核酸內(nèi)切酶.RNase A 對(duì)RNA有水解作用，但對(duì)DNA則不起作用。RNase A在C端和U端殘基處專一地催化RNA的核糖部分3'-與5' -磷酸二酯鍵的裂開，形成具有 2',3'-環(huán)磷酸衍生物寡聚核苷酸。如 pG-pG-pC-pA-pG 被切割產(chǎn)生pG-pG-pCp 和 A-pG�？梢杂脕砣コ鼶NA制品中的污染RNA。

 

主要用于生化研究，測(cè)定核酸的結(jié)構(gòu)
 · RNase 保護(hù)檢測(cè)
 · 去除非特異結(jié)合的RNA
 · 分析RNA 序列
 · 水解蛋白樣品中的RNA
 · 純化DNA
 

此外，它具有顯著的細(xì)胞毒性，可以殺滅許多腫瘤細(xì)胞系，可以抑制導(dǎo)致艾滋病的HIV-1病毒在細(xì)胞中的復(fù)制，可以治療乙肝。

(1)從DNA-RNA或RNA—RNA雜合體中去除未雜合的RNA區(qū)。
(2)確定DNA或RNA中單堿基突變的位置(Myers et al．1985，Winter et al．1985)。 在此方法中，RNA-DNA或RNA-RNA雜合體上的單堿基錯(cuò)配可被RNA酶A識(shí)別并切割。利用含SP5或T7噬菌體啟動(dòng)子的質(zhì)粒，在體外合成與野生型DNA或RNA互補(bǔ)的32p標(biāo)記RNA探針，然后與待檢含單堿基置換的DNA或RNA退火， 所產(chǎn)生的單堿基錯(cuò)配可用RNA酶A切割，通過凝膠電泳分析切割產(chǎn)物的大小即可確定錯(cuò)配的位置。

 

文獻(xiàn)：

(1)  Ausubel, F.A., Brent, R., Kingston, R.E., Moore, D.D., Seidman, J.G., Smith, J.A. & Struhl, K. (eds.) (1995) Current Protocols in Molecular Biology. Page 3.13.1 Suppl. 8; Greene Publishing & Wiley-Interscience, New York
  (2)  Sambrook, J. & Russel, D.W. (2001) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3rd Edition Page A4.39. Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York.
  (3)  Melton, D.A. et al. (1984) Nucleic Acids Res. 12, 7035-7056
Efficient in vitro synthesis of biologically active RNA and RNA hybridization probes from plasmids containing the SP6 promoter.
  (4)  Winter, E. et al. (1985) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 82, 7575-7579
A method to detect and characterize point mutations in transcribed genes.