西美杰現(xiàn)貨供應Applichem支原體檢測/清除/預防產(chǎn)品

瀏覽次數(shù)：1491　發(fā)布日期：2015-5-5　來源：本站　本站原創(chuàng)，轉(zhuǎn)載請注明出處

德國Applichem提供支原體檢測/清除/預防全系列產(chǎn)品，給您的細胞更多的安全與保護

為什么要重視細胞培養(yǎng)中的支原體污染？

您的實驗結(jié)果是否能保證沒有受到支原體污染的影響？

世界性難題�。。。ature最新發(fā)布細胞研究領(lǐng)域中支原體污染問題嚴重性

Ewen Callaway. Contamination hits cell work. Nature, 29 July 2014; doi:10.1038/511518a

污染率高：在細胞研究領(lǐng)域，支原體是臭名昭著的污染源，二十世紀九十年代的支原體污染率是四分之一，而目前有仍然有超過十分之一的基因表達研究（許多曾發(fā)表在頂尖雜志上），表現(xiàn)出支原體污染的跡象。

影響日趨嚴重：雖然支原體污染并不一定意味著研究結(jié)果無效，但它會影響數(shù)百個基因的表達，并與細胞競爭營養(yǎng)阻礙細胞的生長。在目前測試的一組受污染的數(shù)據(jù)中（淋巴瘤細胞），已經(jīng)鑒定出61個被支原體改變的基因，干擾了實驗結(jié)果。這無疑是對時間，資源，經(jīng)費極大的浪費；

難察覺：支原體污染完全是不留痕跡的，污染后的細胞生長速率一般并未發(fā)生顯著的影響，無法用肉眼識別，除非采用專門的支原體檢測方法檢測；

污染源多：“草率操作”、細胞系流通的交叉污染、操作人員自身都是很重要的污染源；

難去除：支原體體積小，無細胞壁，約有1%的支原體可通過過濾器，且一般抗生素根本無法有效抑制或者去除支原體，另外，部分抗生素使用后會對細胞產(chǎn)生敏感效果，從而影響細胞的狀態(tài)；

重視程度日益增加：頂尖雜志發(fā)表實驗結(jié)果需驗證支原體污染影響，在國際上，支原體污染檢測已經(jīng)日益成為細胞培養(yǎng)污染常規(guī)檢測之一，有效規(guī)避細胞支原體污染。

支原體檢測系列

傳統(tǒng)的支原體檢測方法包括支原體分離培養(yǎng)、支原體特異酶檢測、DNA熒光染色檢測以及PCR檢測，除PCR檢測方法以外，其他檢測方法大多耗時長，要求檢測人員具有豐富的經(jīng)驗，并且無法獲得足夠的靈敏度和特異性，對于一些稀有的支原體亞種無法有效檢測。

Applichem設計的支原體檢測試劑盒系列產(chǎn)品均是基于PCR方法，根據(jù)支原體16S rRNA保守序列設計引物，經(jīng)過PCR反應擴增其16S rRNA片段，后采用瓊脂糖電泳方法檢測270bp條帶。相對傳統(tǒng)方法而言，具有強大優(yōu)勢：

高靈敏度：敏感度高達100~1000CFU/ml，僅需要0.5 - 1.0 ml細胞上清樣本即可檢測；

檢測品種廣泛：可檢測常規(guī)品種，同時對于稀有亞種也能同效檢測，如M. pneumoniae, Acholeplasma laidlawii, M. synoviae, M. pulmonis, M. bovis，幾乎覆蓋自然界80余個品種；

快速：操作時間只需30分鐘，全程5個小時內(nèi)即可得到檢測結(jié)果；

污染樣本與對照的瓊脂糖檢測結(jié)果

1、DNA marker (100bp DNA ladder)

2、 negative control

3、 positive control

4、 inhibited sample

5、 negative sample

6、 contaminated, positive sample

7、strongly contaminated positive sample

可靠：試劑盒中包括有陽性對照DNA，可保證

實驗結(jié)果的可重復性，減小因操作而帶來的誤差；

安全性：無支原體培養(yǎng)過程，有效避免污染擴大；

產(chǎn)品型號	檢測方法	適用儀器	試劑盒組分
PCR Mycoplasma Test Kit （貨號A3744）	普通PCR-電泳檢測	普通PCR儀器	Reaction Mix Buffer Solution Positive Template Control
qPCR Mycoplasma Test Kit （貨號A9019）	熒光定量PCR	LightCycler®1.2, 1.5, 2.0, 480, Rotor-Gene™ 3000, 6000, ABI Prism® 7000, iCycler iQ®, iQ™5, Opticon 2, Chromo 4, MX300P®, MX4000®.	Primer/Probe/Nucleotide Mix(RED) Rehydration Buffer(BLUE) Positive Control DNA(GREEN) Internal Control DNA(YELLOW) PCR Grade Water(WHITE)

支原體清除系列

對于普通細胞系，遭受污染以后可以通過重新復蘇，購買等途徑更換樣本，但是對于一些較難獲得的樣本，如干細胞，原代細胞，經(jīng)過特殊處理的，或訂購困難的細胞，一旦遭受支原體污染后，一定要馬上進行處理。Applichem研發(fā)的支原體清除的Myco系列產(chǎn)品，可以直接整合到質(zhì)膜上破壞支原體的完整性，從而有效的清除支原體污染，并可以針對不同程度，不同細胞樣本進行針對性處理，處理過程簡單，對細胞不會造成任何副作用。

名稱	主要成分	適用樣本	使用方法
Myco-3 （貨號A5240）	環(huán)丙沙星	貼壁細胞，可清除大多數(shù)支原體污染	100倍稀釋加入培養(yǎng)基，每2-3天換液，連續(xù)處理14天
Myco-1 （貨號A5222）	泰妙菌素	貼壁細胞，配合能解決頑固型支原體或者使用Myco-3處理停用后又出現(xiàn)支原體污染的情況	100倍稀釋加入培養(yǎng)基，與Myco-2配合使用，使用Myco-1處理4天后換Myco-2處理3天，如此重復2-3次即可
Myco-2 （貨號A5233）	二甲胺四環(huán)素	貼壁細胞，配合能解決頑固型支原體或者使用Myco-3處理停用后又出現(xiàn)支原體污染的情況
Myco-4 （貨號A8366）	專利配方	貼壁細胞，懸浮細胞，病毒培養(yǎng)物	1瓶起始液和3瓶維持液配合使用

細胞污染預防系列

有效保護細胞的最好方式是對于細胞培養(yǎng)環(huán)境的預防，如工作環(huán)境定期消毒處理，嚴格實驗操作，保證器皿無菌等各方面。在實驗室中，CO2培養(yǎng)箱，C02培養(yǎng)箱水盤，水浴鍋是非常重要的污染源。Applichem研發(fā)有系列污染預防系列產(chǎn)品專門針對這3大污染源，可有效預防真菌（及芽孢）、細菌、病毒等污染。使用方便，無腐蝕性，安全高效。

名稱	適用環(huán)境	預防微生物	使用方法
Incubator-Clean (貨號A5230）	CO2培養(yǎng)箱工作臺	支原體，真菌及芽孢、細菌、病毒（包括HIV，HBV等）	即用型，噴霧處理完全濕潤即可，無需轉(zhuǎn)移出細胞，建議每2周處理一次
Incuwater-Clean （貨號A5219）	C02培養(yǎng)箱水盤	支原體，真菌及芽孢、細菌、病毒（包括HIV，HBV等）	100倍稀釋加入水盤滅菌水中，建議每2-4周更換滅菌水
Aquabator-Clean （貨號A9390）	水浴鍋	細菌，真菌	100倍稀釋加入水浴鍋，建議每1-2周向水浴鍋加入一次，每4-6周給水浴鍋更換一次水

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