講座回顧：如何使用活細(xì)胞成像長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)測(cè)三維細(xì)胞球

相關(guān)背景：
三維細(xì)胞球（3D多細(xì)胞聚集球體），有別于常規(guī)培養(yǎng)的二維細(xì)胞，包含有充分接觸培養(yǎng)環(huán)境的球面細(xì)胞和相對(duì)封閉的球內(nèi)細(xì)胞。該特殊的細(xì)胞球體被廣泛認(rèn)為更有效地模擬活體的實(shí)質(zhì)行為，提供更多預(yù)測(cè)性的觀察結(jié)果。因此，三維細(xì)胞球的形成、生長(zhǎng)、形態(tài)，以及加藥刺激后等一系列復(fù)雜的變化過程，需要在培養(yǎng)箱內(nèi)實(shí)現(xiàn)無標(biāo)記、無干擾的長(zhǎng)時(shí)間動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)。

會(huì)議主題：
在這個(gè)講座中，德國(guó)雷根斯堡大學(xué)（Universität Regensburg）Dr. Simone Bäumler博士給大家介紹如何使用innoME的zenCELL owl活細(xì)胞動(dòng)態(tài)成像及分析系統(tǒng)進(jìn)行三維細(xì)胞球的長(zhǎng)時(shí)間動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)。

Dr.Simone Bäumler 擁有豐富的三維細(xì)胞球培養(yǎng)和相關(guān)實(shí)驗(yàn)操作的經(jīng)驗(yàn)。

講座精華部分：

• zenCELL owl對(duì) U373人膠質(zhì)瘤細(xì)胞形成腫瘤球的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)

U373細(xì)胞接種于瓊脂糖包備的非粘附24孔板內(nèi)，培養(yǎng)箱內(nèi)震蕩培養(yǎng)形成腫瘤球。
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• zenCELL owl對(duì) MCF-7人乳腺癌腫瘤球增殖過程的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)

MCF-7腫瘤球接種于瓊脂糖包備的非粘附24孔板內(nèi)，培養(yǎng)箱內(nèi)觀察；在增殖過程中，腫瘤球變得更加圓潤(rùn)，其直徑隨著監(jiān)測(cè)時(shí)間逐漸增加。
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• zenCELL owl對(duì) MCF-7人乳腺癌腫瘤球貼壁生長(zhǎng)過程的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)

MCF-7腫瘤球接種于無包備、僅組織培養(yǎng)物處理的24孔板內(nèi)，培養(yǎng)箱內(nèi)觀察；在貼壁生長(zhǎng)過程中，腫瘤球外緣部分細(xì)胞，接觸組織培養(yǎng)物特殊處理的板底，開始粘附和貼壁。

然后，在接種腫瘤球后的12小時(shí)內(nèi)，腫瘤球開始變的扁平，更多的細(xì)胞從腫瘤球球體初始區(qū)域向外移動(dòng)。而這一過程，從最初的腫瘤球體單一方向向外移動(dòng)，逐步拓展到球體的各個(gè)方向，最終以球體為中心向外圍移動(dòng)。

監(jiān)測(cè)48小時(shí)后，貼壁的腫瘤球形成一個(gè)復(fù)合體，由中心的半球形多細(xì)胞腫瘤球和外圍的單細(xì)胞層組成。
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• zenCELL owl對(duì) MCF-7人乳腺癌腫瘤球經(jīng)過透化處理后的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)

MCF-7腫瘤球接種于無包備的粘附24孔板內(nèi)2天，形成腫瘤球復(fù)合體。繼而吸出原始培養(yǎng)液，加入透化試劑-0.03%皂角苷溶液，培養(yǎng)箱內(nèi)觀察。

透化處理后的7小時(shí)內(nèi)（視頻中部分），腫瘤球復(fù)合體開始裂解和消散。

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• zenCELL owl對(duì) U373人膠質(zhì)瘤腫瘤球經(jīng)過高滲處理后的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)

U373人膠質(zhì)瘤腫瘤球接種于無包備的粘附24孔板內(nèi)2天，形成腫瘤球復(fù)合體。繼而吸出原始培養(yǎng)液，加入約500 mOsmol/kg的高滲溶液，培養(yǎng)箱內(nèi)觀察。

高滲處理后的4小時(shí)內(nèi)（視頻中部分），腫瘤球復(fù)合體開始皺縮變小。

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