CRISPR是繼RNA干擾技術、高通量測序技術等之后生物科學發(fā)展歷史上最具顛覆性技術之一,使用高效、迅速且簡單,在生物醫(yī)學研究領域引起一場巨變,并因此成為生物醫(yī)學實驗室常規(guī)技術。隨著CRISPR基因治療臨床實驗的初步成功,以及2018年的基因編輯嬰兒事件預熱,CRISPR技術被越來越多的研究人員用來改造人類基因以消除疾病,創(chuàng)造生命力更加頑強的植物,消滅病原體等。在過去的7年中CRISPR技術斬獲了生命科學領域各種重量級獎項,包括生命科學突破獎,蓋爾德納國際獎等,《Science》年度突破、《Nature》年度人物均授予了CRISPR單堿基基因編輯技術的突破,2019年9月,北京大學鄧宏魁組完成世界首例基因編輯治療艾滋病和白血病,使CRISPR技術再一次成為生命科學的焦點。
隨著近幾年的發(fā)展,研究者開發(fā)出越來越多基于CRISPR的新型基因編輯技術,例如CRISPR轉錄激活/抑制技術,基因定位,表觀遺傳修飾,單堿基基因編輯系統(tǒng)(BE2,BE3,ABE等),CRISPR基因突變檢測系統(tǒng)(Sherlock、DETECTR),無修復模板基因敲入技術等。CRISPR/Cas9系統(tǒng)的應用更加便捷、高效,也更廣泛,目前該技術成功應用于人類細胞、斑馬魚、小鼠以及細菌等基因組精確修飾,成為科研人員的強大工具,基于CRISPR臨床實驗已經取得初步成功。
為了讓更多的科研人員及時全面的掌握CRISPR最新技術,并應用的相應的領域研究中。特于2019年12月21日至22日在北京理工大學國際教育交流中心舉辦CRISPR/Cas9基因靶向修飾技術培訓班。在帶教教師的指導下,學員獨立完成一系列全部實驗,免費獲得三份CRISPR/Cas9敲除質粒載體(可以用于哺乳動物、植物、真菌、細菌、斑馬魚、線蟲等,共60種)。免費贈送sgRNA離線設計軟件(有基因組DNA序列即可設計。
課程安排:
日期 | 時間 | 培訓內容 | 授課老師 |
12月20日 | 10:00-18:00 | 培訓報到 | 劉剛博士 2008年博士畢業(yè)于中國科學院上海生命科學研究院,從事腫瘤干細胞,細胞衰老,腫瘤轉移等細胞作用網絡和通路的研究,并作為骨干研究人員參加了973計劃項目、國家自然科學基金重點項目、在香港中文大學做為作為Postdoc和Research fellow,從事研究工作。先后Nature Genetics,cell research、PLOS one等期刊發(fā)表論文十余篇。 |
12月21日 | 9:00-11:30 | 理論講解: 一、基因編輯技術簡介(三代基因編輯工具) 1. ZFN 2.TALEN 3.CRISPR 二、CRISPR/Cas9基因編輯技術原理 1. CRISPR/Cas9發(fā)現(xiàn)歷史 2. CRISPR/Cas9作用機制解析 3. CRISPR/Cas9系統(tǒng)改造策略 | |
13:00-17:00 | 理論講解: 一、sgRNA在線設計構建實戰(zhàn)演練(1.靶基因序列查找2.sgRNA在線設計合成) 二、CRISPR/Cas9轉染策略: 1.生物轉染(慢病毒、腺相關病毒等) 2.物理轉染 (電轉核酸/RNP、顯微注射、基因槍) 3.化學轉染 (脂質體、陽離子聚合物) 三、CRISPR/Cas9 sgRNA效率檢測,脫靶檢測及解決策略 1、高保真Cas9(espCas9、Hifi-Cas9、Cluster1-Cas9) | ||
12月22日 | 9:00-11:30 | 理論講解: 一、CRISPR技術應用解析 1.基因敲除(單基因敲除、多基因敲除、大片段刪除、多靶點sgRNA載體構建策略) 2.基因敲入實戰(zhàn)演練(gRNA選擇、同源臂設計、導入,長片段導入策略/提高基因敲入效率策略,PITCh、HITI、CRISPR-轉座酶高效基因敲入系統(tǒng)) 3.CRISPR在轉錄調控中的應用(轉錄激活、轉錄抑制系統(tǒng)) 4.CRISPR靶基因標記定位 二、CRISPR案例解析 1.基因敲除在小鼠模型構建、植物、細胞、細菌、真菌等中的應用案例解析 2.基于CRISPR的全基因組基因敲除高通量篩選策略(文庫構建,選擇,流程優(yōu)化等) 3.基于CRISPR的全基因組轉錄激活/抑制高通量篩選策略(文庫構建,選擇,流程優(yōu)化等) 三、CRISPR/Cas9與基因沉默技術(siRNA、shRNA)系統(tǒng)比較。 | |
13:00-17:00 | 理論講解: 一、單堿基基因編輯技術簡介及在基因治療中的應用 1.HF2-BE2 2.BE3系統(tǒng) 3.ABE系統(tǒng)4.單堿基基因編輯脫靶克服。 二、基因CRISPR的基因檢測系統(tǒng) 1、CRISPR-Cas12a系統(tǒng)介紹(DETECTR) 2、CRISPR-Cas13a系統(tǒng)介紹(SHERLOCK-多重病原菌檢測) 三、CRISPR/Cas9系統(tǒng)在腫瘤和遺傳病治療中應用解析 1、CRISPR結合免疫檢查點抑制劑治療腫瘤 2、單基因遺傳病治療(DMD、先天性黑朦、地中海貧血等) 3、CRISPR治療HIV-基因編輯嬰兒解析 4、CRISPR治療HIV炎性白血病病例解析 四、新一代無模板基因敲入系統(tǒng)解析
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日期 | 時間 | 培訓內容 |
12月22日 | 18:00 | 實驗操作:CRISPR/Cas9敲除質粒轉染靶細胞 |
12月23日 | 9:00-11:30 | 實驗操作:一、CRISPR/Cas9基因表達載體克隆構建1.sgRNA設計合成 2.敲除載體選擇及線性化 3.sgRNA連接,轉化等 |
13:00-17:00 | 實驗操作: 1.CRISPR/Cas9轉染后靶DNA檢測 2.靶基因修飾位點擴增及鑒定 3. CRISPR基因敲除效果檢測 |
舉辦地點:
北京理工大學國際教育交流中心(海淀區(qū)北三環(huán)西路66號)
參加對象
從事醫(yī)學、生命科學、農學等領域科研工作者和高校教師及研究生。
授課方式
1.理論講授。
2.每位學員在輔導教師的指導下,獨立完成實驗操作。(可選)
收費標準
注冊費:3200元/人,2019年12月13號之前匯款報名可以優(yōu)惠至:3000元/人。實驗操作課程需加500元/人。同一個單位三個人以上報名可以免費構建價值1500元的質粒一個;包括學費、資料費、試劑耗材費、其他材料費;免費提供工作午餐,可協(xié)助安排住宿,住宿費用自理。
推薦酒店地點:
北京理工大學國際教育交流中心360元/標間。
銀行匯款
北京微旋基因技術有限公司
開戶行: 中國建設銀行北京宣武支行
賬 號:11001019500053058529
備 注:銀行轉賬的學員,請于匯款單備注欄內注明參會人姓名
聯(lián)系人
鄭老師 010- 53516075 sales@micro-helix.com
請?zhí)顚懸韵聢竺貓?zhí)并發(fā)送至上方郵箱。
承辦單位:
北京微旋基因技術有限公司
舉辦時間:
2019年12月21日至22日