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明膠酶譜MMP活性檢測(cè)
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明膠酶譜MMP活性檢測(cè)
酶譜法(Zymography)是基于SDS-PAGE電泳和反相凝膠染色的蛋白酶檢測(cè)方法檢測(cè)MMP-2、MMP-9活性,其靈敏度可達(dá)10pg,高于ELISA方法。其基本原理和程序是:以加有膠原酶底物的SDS-PAGE凝膠分離含蛋白酶的樣品,電泳結(jié)束后取出凝膠與酶反應(yīng)Buffer孵育,凝膠染色與脫色。凝膠中由于含底物蛋白而被深染,形成深色背景,但在有蛋白酶條帶的位置,蛋白酶將降解凝膠中的底物蛋白,因而不被染色而形成透亮區(qū)域,能同時(shí)指示MMP-2、MMP-9的位置(酶譜),可檢測(cè)樣本有血液、滲出液、細(xì)胞提取物等。 |
明膠酶譜MMP活性檢測(cè)
酶譜法(Zymography)是基于SDS-PAGE電泳和反相凝膠染色的蛋白酶檢測(cè)方法檢測(cè)MMP-2、MMP-9活性,其靈敏度可達(dá)10pg,高于ELISA方法。其基本原理和程序是:以加有膠原酶底物的SDS-PAGE凝膠分離含蛋白酶的樣品,電泳結(jié)束后取出凝膠與酶反應(yīng)Buffer孵育,凝膠染色與脫色。凝膠中由于含底物蛋白而被深染,形成深色背景,但在有蛋白酶條帶的位置,蛋白酶將降解凝膠中的底物蛋白,因而不被染色而形成透亮區(qū)域,能同時(shí)指示MMP-2、MMP-9的位置(酶譜),可檢測(cè)樣本有血液、滲出液、細(xì)胞提取物等。