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CRISPR/Cas9的優(yōu)勢：更易于操作，更容易得到純合子突變體，而且可以在不同的位點(diǎn)同時(shí)引入多個(gè)突變。
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Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats（CRISPR）是細(xì)菌和古細(xì)菌為應(yīng)對病毒和質(zhì)粒不斷攻擊而演化來的獲得性免疫防御機(jī)制，其中II型CRISPR/Cas免疫系統(tǒng)依賴Cas9內(nèi)切酶家族靶向和剪切外源DNA。在這一系統(tǒng)中，crRNA（CRISPR-derived RNA）通過堿基配對與tracrRNA（trans-activating RNA）結(jié)合形成雙鏈RNA，此tracrRNA/crRNA二元復(fù)合體指導(dǎo)Cas9蛋白在crRNA引導(dǎo)序列靶定位點(diǎn)剪切雙鏈DNA，其中Cas9的HNH核酸酶結(jié)構(gòu)域剪切互補(bǔ)鏈，其RuvC-like結(jié)構(gòu)域剪切
非互補(bǔ)鏈。具體如下圖所示：
研究表明，CRISPR/Cas9系統(tǒng)能夠?qū)π∈蠛腿祟惢蚪M特定基因位點(diǎn)進(jìn)行精確編輯，這其中包括誘導(dǎo)多能干細(xì)胞 iPS等，不僅如此，CRISPR/Cas系統(tǒng)還可以同時(shí)針對同一細(xì)胞（ES）中的多個(gè)位點(diǎn)能實(shí)現(xiàn)多靶點(diǎn)同時(shí)酶切，人們運(yùn)用該技術(shù)成功獲得斑馬魚等模式動物基因敲除模型，使得多個(gè)基因敲除、敲入成為可能。 作為一種新的基因編輯技術(shù)，CRISPR/Cas9有以下特點(diǎn)和優(yōu)勢： 1、靶向精確性更高。RNA靶向序列和基因組序列必須完全匹配，Cas9才會對DNA進(jìn)行剪切。 2、可實(shí)現(xiàn)對靶基因多個(gè)位點(diǎn)同時(shí)敲除。 3、實(shí)驗(yàn)周期短，最快僅需2個(gè)月，節(jié)省大量時(shí)間和成本。 4、無物種限制。 我們有豐富的經(jīng)驗(yàn)從事小鼠、大鼠基因敲除，已成功為中科院、南京醫(yī)科大學(xué)、昆明動物所、四川大學(xué)、山東大學(xué)等單位提供過基因敲除大小鼠。 期待以我們的專業(yè)技術(shù)為您的科研助力！歡迎您來電咨詢、交流合作：010-82463076 18612692948 郵箱：market@bjpolymath.com.cn
