iTRAQ

iTRAQ(IsobaricTagforRelativeAbsoluteQuantitation)技術(shù)由ABSCIEX公司研發(fā)的一種體外等重同位素標(biāo)記的相對與絕對定量技術(shù)。該技術(shù)利用多種同位素試劑標(biāo)記蛋白多肽N末端或賴氨酸側(cè)鏈基團(tuán)，經(jīng)高精度質(zhì)譜儀串聯(lián)分析，可同時比較多達(dá)8種樣品之間的蛋白表達(dá)量。

技術(shù)原理

ITRAQ試劑是一種小分子同重元素化學(xué)物質(zhì)，包括三部分：報告基團(tuán)、平衡基團(tuán)和肽反應(yīng)基團(tuán)，形成4種或8種相對分子質(zhì)量均等量（145或305）的異位標(biāo)簽。

將蛋白質(zhì)裂解為肽段后用ITRAQ試劑進(jìn)行標(biāo)記。一級質(zhì)譜中，任何一種ITRAQ試劑標(biāo)記的不同樣品中的同一肽段表現(xiàn)出相同的質(zhì)荷比； 二級質(zhì)譜中，報告基團(tuán)、質(zhì)量平衡基團(tuán)和多肽反應(yīng)基團(tuán)之間的鍵斷裂，質(zhì)量平衡基團(tuán)丟失，帶不同同位素標(biāo)簽的同一肽段產(chǎn)生質(zhì)量不同的報告離子， 根據(jù)報告離子的豐度可獲得樣本間相同肽段的定量信息，再經(jīng)過軟件處理得到蛋白質(zhì)的定量信息。

技術(shù)流程