TMT

TMT技術(shù)是由美國(guó)Thermo Scientific公司研發(fā)的一種多肽體外標(biāo)記技術(shù)。該技術(shù)采用2種、6種或10種同位素的標(biāo)簽，特異性標(biāo)記多肽的氨基基團(tuán)，經(jīng)過串聯(lián)質(zhì)譜LC-MS/MS分析，可同時(shí)比較2組，6組或最多10組不同樣品中蛋白質(zhì)的相對(duì)含量。

技術(shù)原理

TMT™標(biāo)簽由三部分組成：分子量報(bào)告基團(tuán)、分子量標(biāo)準(zhǔn)化部分和反應(yīng)基團(tuán)，形成2種、6種或10種相對(duì)分子量相等的標(biāo)簽。

TMT™試劑通過反應(yīng)基團(tuán)能夠高效地標(biāo)記酶解后的肽段。在一級(jí)質(zhì)譜圖中，分子量標(biāo)準(zhǔn)化部分使任何一種TMT™試劑標(biāo)記的不同樣本中的同一肽段表現(xiàn)為相同的質(zhì)荷比。在串聯(lián)質(zhì)譜中，報(bào)告基團(tuán)優(yōu)先斷裂，釋放報(bào)告離子。每個(gè)報(bào)告離子都有各自獨(dú)特的分子量，并且能夠在MS/MS分析中反應(yīng)出所標(biāo)記的多肽的樣品豐度，根據(jù)報(bào)告離子的信號(hào)強(qiáng)度值可獲得樣品間相同肽段的定量信息，再經(jīng)過軟件處理得到蛋白質(zhì)的定量信息。

技術(shù)流程

技術(shù)優(yōu)勢(shì)

1.高通量：能同時(shí)對(duì)10組樣本中包含的蛋白進(jìn)行鑒定及表達(dá)差異分析，可實(shí)現(xiàn)3樣品3次重復(fù)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。
2.適用范圍廣：可用于各種類型生物樣本，樣品類型包括：胞漿蛋白、膜蛋白、核蛋白、胞外蛋白等。
3.靈敏度高：可檢測(cè)出低豐度蛋白、強(qiáng)堿性蛋白、小于10KD或大于200KD的蛋白。
4.高效：液質(zhì)連用，自動(dòng)化操作，分析速度快，分離效果好。

應(yīng)用領(lǐng)域

生物標(biāo)志物篩選
藥物作用靶點(diǎn)研究
蛋白混合物或重組蛋白混合物精確定量