全自動(dòng)生化分析儀使用中項(xiàng)目間交叉污染的探討
瀏覽次數(shù):3627 發(fā)布日期:2008-3-23
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在運(yùn)用全自動(dòng)生化儀檢測(cè)標(biāo)本時(shí),有時(shí)會(huì)遇到一些項(xiàng)目,如磷,鎂的結(jié)果特別高,再?gòu)?fù)查結(jié)果就正,F(xiàn)象;蛘吲龅綐(biāo)本外觀正常而三酰甘油結(jié)果異常升高。就這個(gè)試劑之間污染問題,我們進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)觀察,并將如何避免這種現(xiàn)象進(jìn)行探討。
材料和方法
一、 材料
1. 儀器 HITACHI 7150 全自動(dòng)生化儀。
2. 試劑 Wako、BM、Centronic和復(fù)星長(zhǎng)征公司產(chǎn)品。
3. 標(biāo)本 混合血清,以20名健康檢查者血清混合而成。
二、方法
選擇某些項(xiàng)目的試劑列為實(shí)驗(yàn)對(duì)象。其中,含磷酸鹽緩沖液試劑的項(xiàng)目,如尿酸、膽固醇、乳酸脫氫酶等是作無機(jī)磷檢測(cè)的疑似產(chǎn)生交叉污染項(xiàng)目;含鎂離子試劑的三酰甘油、肌酸激酶等項(xiàng)目是鎂檢測(cè)的疑似交叉污染項(xiàng)目;含甘油的一些項(xiàng)目是三酰甘油檢測(cè)的疑似交叉污染項(xiàng)目。
實(shí)驗(yàn)時(shí),3個(gè)項(xiàng)目分開觀察,以4種方式實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表中的第一種結(jié)果是讓觀察的項(xiàng)目單獨(dú)先做1次混合血清檢測(cè);第二種結(jié)果是讓被觀察項(xiàng)目的疑似產(chǎn)生交叉項(xiàng)目先對(duì)血清測(cè)1次,接著立即作觀察項(xiàng)目的測(cè)定;第三種結(jié)果在第二種方式作觀察項(xiàng)目測(cè)定前,加做1次對(duì)觀察項(xiàng)目無影響的其它項(xiàng)目測(cè)定;第四種結(jié)果是在第二種方式下,作觀察項(xiàng)目測(cè)定前,加做2次對(duì)觀察項(xiàng)目無影響的其他項(xiàng)目測(cè)定。
結(jié)果
磷、鎂、三酰甘油交叉污染實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)見表1:
討論:
由于許多項(xiàng)目如尿酸,膽固醇,乳酸脫氫酶等試劑中含磷酸鹽緩沖液,衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心推薦葡萄糖氧化酶法的試劑中也含0。1mol/L磷酸鹽緩沖液;鎂離子是三酰甘油、肌酸激酶試劑中不可缺少的成份,甘油又是一種酶保護(hù)劑。使用前應(yīng)認(rèn)真閱讀說明書,避免項(xiàng)目組合時(shí),因試劑成份對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生交叉污染。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,在沒有污染的情況下,第一種方式測(cè)定結(jié)果列為觀察依據(jù),第二種方式明顯升高,三酰甘油增高達(dá)5倍,無機(jī)磷達(dá)到2倍多。說明僅靠?jī)x器內(nèi)蒸餾水一次沖洗不能解決次檢測(cè)試劑殘余對(duì)下次檢測(cè)的污染。第三種方式是中間隔一個(gè)非污染項(xiàng)目,結(jié)果表明還存在明顯影響。本實(shí)驗(yàn)說明使用全自動(dòng)生化儀隨機(jī)組合檢測(cè)項(xiàng)目時(shí),某些項(xiàng)目不能隨心所欲、必須注意位置的特別設(shè)置。
目前除了一些高檔的全自動(dòng)生化儀為防止污染,采用洗滌加脫氣裝置或加超聲洗滌裝置外,一般隨機(jī)組合式全自動(dòng)生化儀可以通過增加洗滌的次數(shù)或改變吸取試劑的方式來消除這類污染。所以由廠家提供給客戶使用的儀器參數(shù),項(xiàng)目的位置是經(jīng)過反復(fù)論證,是最佳狀態(tài),建議不要隨意改動(dòng)。否則容易造成測(cè)定結(jié)果不可靠。
在實(shí)驗(yàn)過程中還發(fā)現(xiàn),堿性條件下反應(yīng)項(xiàng)目如肌酐苦味酸速率法,果糖胺動(dòng)力法受酸性試劑的影響反應(yīng)速率減慢。同樣觀察到尿酸試劑受到強(qiáng)酸性試劑影響結(jié)果明顯偏低現(xiàn)象。說明這類污染還有多種表現(xiàn),受影響的項(xiàng)目不少。根據(jù)我們經(jīng)驗(yàn),只要合理安排項(xiàng)目位置,就可有效避免這種現(xiàn)象。原則是將具相同反應(yīng)原理放在一起,相同酸堿度反應(yīng)放在一起;試劑內(nèi)含有被測(cè)成份的和該項(xiàng)目相隔兩個(gè)項(xiàng)目位置以上;易污染項(xiàng)目測(cè)定前吸樣針設(shè)置清洗2次以上等。這些供同道參考指教。
因此要想獲得正確可靠結(jié)果,不但需要熟練掌握儀器操作,更需要了解反應(yīng)原理,試劑組成等方面知識(shí)。
摘自《上海醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志》2002年第17卷第3期