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基于BaPS系統(tǒng)的旱地土壤呼吸作用及其分量確定探討

瀏覽次數(shù):4497 發(fā)布日期:2009-2-11  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

      應(yīng)用氣壓過(guò)程分離(BaPS)方法研究了大豆和玉米種植下土壤呼吸速率及其分量的動(dòng)態(tài)變化,并同時(shí)用氣相色譜儀分析了實(shí)驗(yàn)期間BaPS系統(tǒng)內(nèi)的CO2氣體濃度,對(duì)2種方法測(cè)定的土壤呼吸速率進(jìn)行了比較.結(jié)果表明:(1)BaPS方法與氣相色譜測(cè)得的土壤呼吸速率具有一致性和可比性;(2)大豆田根區(qū)土壤呼吸速率隨根系生長(zhǎng)有明顯的季節(jié)變化,速率為(29 8±6 4)mg·kg-1·d-1(以C計(jì)),非根區(qū)土壤呼吸速率在整個(gè)生長(zhǎng)季數(shù)值較低并且季節(jié)變化不明顯,為(14 4±5 1)mg·kg-1·d-1(以C計(jì));玉米種植下土壤呼吸有類似的規(guī)律,差別在于玉米根系生物量比大豆大,呼吸速率也高,根區(qū)呼吸速率為(70 8±38 6)mg·kg-1·d-1(以C計(jì)),非根區(qū)為(18 1±8 7)mg·kg-1·d-1(以C計(jì));(3)根起源呼吸是土壤呼吸的重要組成部分,根區(qū)與非根區(qū)土壤呼吸速率的差值可以認(rèn)為來(lái)自于根系活動(dòng),研究發(fā)現(xiàn)大豆田根起源呼吸占土壤呼吸的50%,玉米田根起源呼吸占到69%;(4)利用根起源呼吸與根系生物量的相關(guān)關(guān)系,得到大豆根起源呼吸系數(shù)為0 048mg·mg-1·d-1,玉米的根起源呼吸系數(shù)較小為0 042mg·mg-1·d-1.

氣壓過(guò)程分離方法(BaPS)是一種測(cè)量有機(jī)土、礦質(zhì)土中微生物對(duì)碳素和大部分氮素轉(zhuǎn)化速率的儀器。該系統(tǒng)適用于土壤中硝化和反硝化反應(yīng)總轉(zhuǎn)化率的測(cè)定?傁趸俾屎涂偡聪趸俾实难芯渴悄壳癗素轉(zhuǎn)化方面的研究熱點(diǎn)。

 
BaPS土壤氮循環(huán)監(jiān)測(cè)系統(tǒng)
適用于土壤中硝化和反硝化反應(yīng)總轉(zhuǎn)化率的測(cè)定


一、序言:

氣壓過(guò)程分離方法(BaPS)是一種測(cè)量有機(jī)土、礦質(zhì)土中微生物對(duì)碳素和大部分氮素轉(zhuǎn)化速率的儀器。該系統(tǒng)適用于土壤中硝化和反硝化反應(yīng)總轉(zhuǎn)化率的測(cè)定?傁趸俾屎涂偡聪趸俾实难芯渴悄壳癗素轉(zhuǎn)化方面的研究熱點(diǎn)。
硝化反應(yīng)(SCHL 1992)是土壤中硝酸鹽逐漸產(chǎn)生的一個(gè)關(guān)鍵反應(yīng)。到目前為止,唯一可用的檢測(cè)方法就是昂貴的N15庫(kù)稀釋法。
環(huán)境中硝酸鹽的含量很高,主要是因?yàn)樗?BR>·作為肥料應(yīng)用在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上
·對(duì)地下水和飲用水帶來(lái)危害
在使用液體肥料時(shí)也會(huì)面對(duì)同樣的問(wèn)題。
硝酸鹽及其分解物進(jìn)入人體后對(duì)人體健康是有危害的。因此,必須防止嚴(yán)重的硝酸鹽污染,特別是對(duì)飲用水的污染。一般來(lái)說(shuō),每升水硝酸鹽的含量不超過(guò)50mg是可以接受,但是對(duì)嬰兒來(lái)說(shuō),這種含量水平還是非常危險(xiǎn)。
眾所周知,硝酸鹽作為肥料施加在農(nóng)田中,滲漏到地下,這是目前造成地下水和飲用水污染的主要原因。但是要快速檢測(cè)出這些物質(zhì)(主要是硝酸鹽)的含量和分布情況卻很難,盡管這些是精準(zhǔn)施肥和灌溉的關(guān)鍵。
由IFU最新研制出的方法能夠簡(jiǎn)單、可靠地通過(guò)測(cè)量硝化和反硝化反應(yīng)的總轉(zhuǎn)化率來(lái)分析和觀測(cè)土壤中N素的轉(zhuǎn)化過(guò)程。因能夠在24小時(shí)之內(nèi)得到結(jié)果,所以可將該方法應(yīng)用在推薦施肥上。
有了這種方法后,現(xiàn)在就可以通過(guò)科學(xué)合理地使用N素肥料來(lái)保護(hù)地下水。另外,獲得有關(guān)N素的轉(zhuǎn)化率的相關(guān)知識(shí)可以促進(jìn)對(duì)土壤中微生物所起的作用的進(jìn)一步了解。

二、土壤中硝化和反硝化
硝化反應(yīng)是土壤中等同與NH4+ 的NH3被氧化成NO3-的過(guò)程。反應(yīng)的第一步是在單氨氧化酶的作用,將分子氧加到氨上面形成羥胺(H2NOH),第二步就是羥胺被氧化成亞硝酸鹽(NO2-),最后是亞硝酸鹽(NO2-)被氧化成最終產(chǎn)物硝酸鹽。
反硝化反應(yīng)是在厭氧條件下硝酸鹽逐步被還原成N2的過(guò)程。
(硝酸鹽 → 亞硝酸鹽 → NO → N2O → N2)

三、現(xiàn)有的檢測(cè)方法
硝化反應(yīng)和反硝化反應(yīng)對(duì)于土壤中N素的循環(huán)有著非常重要的意義。硝化仍就是倍受關(guān)注的反應(yīng),因?yàn)樗峭寥乐邢跛猁}逐漸產(chǎn)生的最穩(wěn)定因素,而且是產(chǎn)生硝酸鹽的唯一可以量化的反應(yīng)。不過(guò),直到現(xiàn)在,測(cè)定土壤中總硝化量的唯一方法仍是N15稀釋法。 但是這個(gè)方法比較復(fù)雜,且耗財(cái)耗力。在做總轉(zhuǎn)化率測(cè)定時(shí)應(yīng)該說(shuō)明確切的轉(zhuǎn)化反應(yīng),在進(jìn)行單一反應(yīng)的凈轉(zhuǎn)化量測(cè)定時(shí)可以不用說(shuō)明反應(yīng)過(guò)程。

圖1 陸地生態(tài)系統(tǒng)中的N素循環(huán)和有關(guān)N素轉(zhuǎn)化相關(guān)的專業(yè)術(shù)語(yǔ)的定義說(shuō)明

N15稀釋技術(shù)
這項(xiàng)技術(shù)是將帶有N15標(biāo)記的硝酸鹽施入到土壤中。接下來(lái)隨著時(shí)間的推移,由于硝化作用引起轉(zhuǎn)化就將N15逐步稀釋,這一變化是可以可以被檢測(cè)的。(N15稀釋法)(MOS1993,DAV1992)。但是N15本身以及檢測(cè)用的大型分光計(jì)使得本方法費(fèi)用昂貴(設(shè)備費(fèi)用、購(gòu)買標(biāo)記物質(zhì)、必要的重復(fù)測(cè)試、樣品的重新處理),另外還得考慮下列問(wèn)題:
1、應(yīng)該盡量地選擇結(jié)構(gòu)相似的土壤,以便標(biāo)記的硝酸鹽能夠均勻地分布。但是這樣就破壞了土壤的自然結(jié)構(gòu)。
2、加入的N15能促進(jìn)微生物的降解反應(yīng),為了避免此類問(wèn)題,所以最好在兩天內(nèi)完成N15的測(cè)定。

凈轉(zhuǎn)化率測(cè)定法
因?yàn)槌杀镜脑颍蠖鄶?shù)研究N素循環(huán)的學(xué)者通常不測(cè)定有關(guān)的總硝化率,而僅僅檢測(cè)硝化反應(yīng)凈轉(zhuǎn)化率。凈轉(zhuǎn)化率能夠說(shuō)明硝酸鹽在土壤中的動(dòng)態(tài)變化。但是測(cè)定凈轉(zhuǎn)化率不是一個(gè)完善的方法,它得不到任何有關(guān)總硝化反應(yīng)轉(zhuǎn)化率的結(jié)論(如硝化反應(yīng)中NH4+到NO3-的量的轉(zhuǎn)變)。
通常檢測(cè)硝化反應(yīng)凈轉(zhuǎn)化率是從監(jiān)測(cè)點(diǎn)取沒(méi)有樹根的土樣(為了防止樹根吸收銨鹽或者硝酸鹽,但是還有反硝化和微生物固氮作用)。然后,將土壤放在袋子里進(jìn)行孵化,通常為一個(gè)月。通過(guò)測(cè)定開始培養(yǎng)和培養(yǎng)結(jié)束后NO3庫(kù)的大小就可以計(jì)算出凈量(P開始—P一個(gè)月后=硝化反應(yīng)的凈量,與土壤干重相關(guān)連)。

抑制技術(shù)
抑制技術(shù)的應(yīng)用與示蹤氣體N2O和NO的產(chǎn)生和釋放相關(guān)聯(lián),這兩種氣體和氣候都有關(guān)系,并且在硝化反應(yīng)和反硝化反應(yīng)中都產(chǎn)生。反應(yīng)中主要產(chǎn)生了示蹤氣體,就是說(shuō)明發(fā)生了硝化和反硝化反應(yīng)。
常用的抑制劑是乙炔,在低濃度時(shí),乙炔能夠抑制硝化反應(yīng)。測(cè)定抑制前后土壤釋放出來(lái)的N2O和NO釋放量的變化,就可以量化硝化反應(yīng)和反硝化反應(yīng)的作用。
此法有以下弊端:
1. 有些硝化劑可能對(duì)抑制劑不敏感
2. 土樣中存在不明的乙炔(抑制不完全)
3. 一些不明確的反映也可能產(chǎn)生N2O和NO,可能也被算做反硝化反應(yīng)了
測(cè)定土壤中的反硝化主要用抑制法和N15技術(shù)。抑制法是根據(jù)10%(體積比)的乙炔能夠抑制反硝化反應(yīng)中最后的酶這個(gè)事實(shí)建立的。然而最新研究發(fā)現(xiàn)在有氧氣和高濃度的乙炔存在的條件下,NO能夠結(jié)合O2變成NO2,然后就變成亞硝酸鹽和硝酸鹽,這一步是不可計(jì)量的。自從1997年Bollmann和Conrad以及Mckenny和Drury發(fā)表了這一發(fā)現(xiàn)后,該項(xiàng)技術(shù)就沒(méi)有再被使用了。

BaPS
IFU發(fā)明的BaPS技術(shù)是一個(gè)全新的測(cè)定土壤中硝化反應(yīng)總轉(zhuǎn)化率的技術(shù)。它有著N15技術(shù)和氣體抑制劑技術(shù)不可比擬的優(yōu)勢(shì)。

四、可測(cè)參數(shù)
在密封、充氣、有壓力的恒溫系統(tǒng)中放置著通氣良好的壤芯,通過(guò)像記錄O2和CO2的平衡一樣來(lái)記錄系統(tǒng)內(nèi)空氣壓力的改變,BaPS就可以測(cè)定下列參數(shù):
1、即時(shí)的反硝化率、硝化率和土壤呼吸率
2、觀察某一特定時(shí)間微生物所起的作用(硝化(和)或反硝化)
3、通過(guò)觀測(cè)N2O釋放,能夠得出每個(gè)反應(yīng)在其中的所占的含量

五、測(cè)試方法介紹
在充氣的壓力體系中放進(jìn)土柱,土壤呼吸、硝化和反硝化這些微生物的活動(dòng)就會(huì)影響系統(tǒng)壓力的改變。頂部空間里的氣態(tài)CO2濃度和液相CO2濃度保持動(dòng)態(tài)平衡(ΔCO2aq/Δt)。

單一過(guò)程
土壤呼吸是一個(gè)凈氣體既不產(chǎn)生也不消耗的過(guò)程,也就是說(shuō)凈氣體產(chǎn)生量Δn/Δt=0,因?yàn)橄牡难鯕獾牧亢蜕傻腃O2氣體量是相同的,所以呼吸系數(shù)等于1.0,這和在充氣良好的土壤上是一樣的。
硝化反應(yīng)使得系統(tǒng)里的壓力降低,因?yàn)槊縨ol銨需要消耗0.5mol分子氧,但是不產(chǎn)生任何氣體。
然而反硝化卻使系統(tǒng)里壓力增加,因?yàn)樵?mol硝酸根完成還原反應(yīng)后,除了產(chǎn)生N2外,還有2.5mol CO2氣體產(chǎn)生。

測(cè)量原理
在密封、充氣、有壓力的恒溫系統(tǒng)中放置著通氣良好的土樣,通過(guò)記錄系統(tǒng)中O2,CO2,氣壓、溫度等參數(shù),即時(shí)得到硝化率、反硝化率和土壤呼吸率。
    土壤呼吸是一個(gè)凈氣體既不產(chǎn)生也不消耗的過(guò)程,也就是說(shuō)凈氣體產(chǎn)生量Δn/Δt=0,因?yàn)橄牡难鯕獾牧亢蜕傻腃O2氣體量是相同的,所以呼吸系數(shù)等于1.0,這和在充氣良好的土壤上是一樣的。
    硝化反應(yīng)使得系統(tǒng)里的壓力降低,因?yàn)槊縨ol銨需要消耗0.5mol分子氧,但是不產(chǎn)生任何氣體。
    然而反硝化卻使系統(tǒng)里壓力增加,因?yàn)樵?mol硝酸根完成還原反應(yīng)后,除了產(chǎn)生N2外,還有2.5mol CO2氣體產(chǎn)生。
    如果發(fā)現(xiàn)凈壓力降低,那么系統(tǒng)中就發(fā)生了硝化反應(yīng)。同樣,如果壓力增加就說(shuō)明發(fā)生了反硝化反應(yīng)?梢杂孟旅娴姆磻(yīng)式來(lái)描述上面的三個(gè)微生物反應(yīng):
    a)土壤呼吸
CH2O+O      CO2+H2O(壓力平衡)
    b)硝化反應(yīng)
NH4++2O2        NO3-+H2O+2H+(壓力降低)
    c)反硝化反應(yīng)
    5CH2O+4NO3-+4H+          5CO2+7H2O+2N2(壓力增加)
土樣頂部的CO2濃度和O2濃度(隨意的N2O濃度)可以隨著系統(tǒng)壓力一起被檢測(cè)到。
通過(guò)測(cè)試系統(tǒng)壓力的改變來(lái)確定4個(gè)反應(yīng)過(guò)程總的平衡。
將氧氣的平衡和二氧化碳的平衡合并,可以確定反硝化過(guò)程中產(chǎn)生的氣體氮化合物的分子式。
如果通過(guò)氣壓測(cè)得系統(tǒng)總氣體平衡不能被氧氣平衡和二氧化碳平衡來(lái)說(shuō)明的話(總氣體    平衡        氧氣平衡加二氧化碳平衡),那么平衡差就必須是在反硝化過(guò)程中產(chǎn)生的氣態(tài)氮化合物。

其中:VBS 代表土柱中氣體存留量
R 表示通用氣體常數(shù)(R=8.314JK-1mol-1
T 表示溫度[k]
P(x) 表示時(shí)間X時(shí)的氣壓
索引:Den:反硝化;Nit硝化;Res呼吸;aq液相
逐步分解和替代后,得到總的公式:


逐步分解和替代后,得到總的公式:

因此,NxOy是氣體變化、二氧化碳變化和氧氣變化的差值?梢酝ㄟ^(guò)反向平衡定量測(cè)得土壤呼吸和硝化反應(yīng)。

六、 系統(tǒng)組成

 
          氣密測(cè)量室?guī)?個(gè)土樣環(huán)
          測(cè)量蓋,帶O2傳感器、CO2傳感器、壓力傳感器、溫度傳感器
          恒溫水浴
          軟件
          取樣套件

七、基本技術(shù)指標(biāo)

測(cè)量范圍: CO2 :0…3Vol%,  精度:+/- 2%
           O2 15..21Vol%, 精度:+/- 1%
           氣壓:800….1200hPa,  精度:+/-0.1%
           溫度:-30….70℃,精度: 0.1℃
DC50-K10冷卻水。核∽畲笕莘e 3L
工作溫度: -10℃~150℃
精度:+/- 0.01K
20℃冷卻能力:240W
加熱能力:230v:2kW
  DL30-V26/B 開放式冷卻水浴:水浴最大容積:19---26L
水浴尺寸:(寬x長(zhǎng)x深)30x35x20cm
工作溫度范圍:-10℃~150℃
精度:+/- 0.01K
20℃冷卻能力:240W
加熱能力:230v:2kW
氣密測(cè)量室:     100ml,40.5高,60mm直徑
或:100ml,51.0mm高,53mm直徑
或:250ml,50mm高,84mm直徑
 
取樣組件:BaPS 100-SC-3 取樣組件 (7個(gè)容積100ml,高51mm,53mmx50mm環(huán)刀)
            或:BaPS 100-SC-3 取樣組件 (7個(gè)容積100ml,高40.5mm,60mmx56mm環(huán)刀)
            或:BaPS 250 C-3 取樣組件 (3個(gè)容積250ml,高50mm,84mmx80mm環(huán)刀)
 
八、操作步驟
1、盛放土樣的容器可以放在實(shí)驗(yàn)室和取樣點(diǎn),但最好放在采樣點(diǎn)。運(yùn)送用的容器是用沒(méi)有傳感器的蓋子密封,傳感器仍然放在實(shí)驗(yàn)室。乘放土樣的容器放在在冷藏容器中儲(chǔ)存。這樣當(dāng)返回實(shí)驗(yàn)室時(shí)就可以很快進(jìn)行測(cè)試工作了。
2、在實(shí)驗(yàn)中,將容器運(yùn)輸中用的蓋子換成帶有傳感器的蓋子。
3、打開軟件
4、讀取配置參數(shù),也可以根據(jù)需要對(duì)參數(shù)進(jìn)行調(diào)整。
5、因?yàn)槭窃诰進(jìn)行測(cè)量數(shù)據(jù)的計(jì)算,所以應(yīng)該在測(cè)試之前先測(cè)量容器頂部。
6、程序會(huì)確認(rèn)是否進(jìn)行了足夠的熱平衡調(diào)節(jié)。然后程序就開始測(cè)試
7、在測(cè)試過(guò)程中,傳感器讀取和分析的數(shù)據(jù)會(huì)通過(guò)圖表表示出來(lái)?梢詫(duì)系統(tǒng)進(jìn)行長(zhǎng)期的控制。
8、測(cè)試工作會(huì)按照設(shè)置自動(dòng)結(jié)束,也可以人工停止
9、為了提高精確度,應(yīng)該在測(cè)試工作結(jié)束時(shí)用重量法測(cè)試土壤中的含水量,這樣,測(cè)量結(jié)果可以和土壤的干重相關(guān)。
10.借助幫助菜單的作用:自動(dòng)計(jì)算出硝化率率、反硝化率和土壤呼吸率
11.處理結(jié)果可以以ASCII文件輸出。另外可以打印包含所有信息、表格的檢測(cè)報(bào)告。

九、測(cè)量時(shí)間
測(cè)量時(shí)間和土壤類型以及溫度和濕度的這樣的參數(shù)有關(guān)。通常在5-10小時(shí)之間。

十、參考文獻(xiàn)
[BOL 1997]土壤生物學(xué)和生物化學(xué)1067-1077
[DAV1992]美國(guó)生態(tài)學(xué)會(huì) 球果森林土壤中硝酸鹽的內(nèi)循環(huán)。
[ING1999] 定量測(cè)定土壤中硝化反應(yīng)、反硝化反應(yīng)和N2O源的新方法
[MOS1993]

產(chǎn)地:德國(guó)

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