中醫(yī)治療對(duì)小鼠獲得性記憶障礙模型的作用

摘 　要 　通過益心氣、通心竅、滋陰、活血四種不同治則的中藥,對(duì)小鼠獲得性記憶障礙模型的改善研究,來比較篩選較為有效的中醫(yī)治療記憶障礙的方法。獲得性記憶障礙模型采用氫溴酸東莨菪堿法,行為測(cè)試采用跳臺(tái)法和避暗法,同時(shí)設(shè)立正常、模型、西藥(尼莫地平)組進(jìn)行對(duì)照。結(jié)果短時(shí)記憶測(cè)定,模型組跳臺(tái)及避暗反應(yīng)錯(cuò)誤次數(shù)較正常組明顯增加,各用藥組5分鐘錯(cuò)誤次數(shù)較模型組顯著降低,跳臺(tái)法中通竅組與西藥對(duì)照組、滋陰、活血組比較,差異有顯著性, P值分別為P< 0. 05、P< 0. 05、P< 0. 01。結(jié)論:各用藥組均能不同程度地提高小鼠的記憶力,其中通竅組作用最為顯著。

關(guān)鍵詞 　中醫(yī)藥 　記憶障礙 　實(shí)驗(yàn)研究

老年性癡呆,是指不伴明顯意識(shí)障礙的大腦皮層高級(jí)功能的獲得性全面障礙,包括記憶力、感覺和運(yùn)動(dòng)機(jī)能、日常生活能力、發(fā)揮社會(huì)職能、語(yǔ)言交往以及情感反應(yīng)的控制障礙,通常呈進(jìn)行性發(fā)展。其中以記憶障礙為最主要的癥狀。根據(jù)老年癡呆的病機(jī),筆者采用不同治則,對(duì)氫溴酸東莨菪堿造成的小鼠獲得性記憶障礙模型進(jìn)行對(duì)比研究,旨在篩選可能有效的中醫(yī)治則和用藥來治療老年性癡呆。

1　材料方法

1 . 1　分組及實(shí)驗(yàn)方法 　昆明小鼠,雄性,體重25±2g ,由上海中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。用避暗法進(jìn)行粗篩,凡潛伏期在15秒內(nèi)者為合格,按成績(jī)隨機(jī)分為正常、模型、益心氣、通心竅、滋陰、活血、尼莫地平共7組。將小鼠置安靜、光線適宜、室溫20～25°C的環(huán)境中適應(yīng)3～5天,開始給藥。劑量按體表面積等效劑量折算法計(jì)算,給予相當(dāng)于成人的劑量灌服10天(均為0 . 3ml/ 10g·kg- 1體重) ,正常組與模型組予以等量生理鹽水。末次給藥1小時(shí)后,除正常組外,其余各組均予以氫溴酸東莨菪堿3mg/ kg ,頸背部皮下注射以造成獲得性記憶障礙模型。10分鐘后進(jìn)行避暗、跳臺(tái)訓(xùn)練。4小時(shí)后行短時(shí)記憶測(cè)定,24 小時(shí)后復(fù)測(cè)1次。每組測(cè)試為同一時(shí)間進(jìn)行。

1 . 2　行為測(cè)試方法 　跳臺(tái)法:將小鼠放入反應(yīng)箱內(nèi)適應(yīng)環(huán)境3分鐘,立即通以36V交流電,

動(dòng)物受電擊后跳回平臺(tái)躲避傷害性刺激。以動(dòng)物逃避到平臺(tái)所需時(shí)間為潛伏期。多數(shù)動(dòng)物能再次或多次跳至銅柵上,受電擊后迅速跳回平臺(tái)。訓(xùn)練5分鐘,記錄每鼠受到電擊的次數(shù)和錯(cuò)誤次數(shù),作為訓(xùn)練和測(cè)試成績(jī)。避暗法:將小鼠面部背向洞口放入明室,同時(shí)啟動(dòng)計(jì)時(shí)器。根據(jù)小鼠有避暗的習(xí)性,動(dòng)物穿過洞口進(jìn)入暗室受到40V電壓電擊后逃回明室,以小鼠逃回明室所需的時(shí)間為潛伏期。多數(shù)小鼠可再次或多次進(jìn)入暗室,受電擊后逃回明室。訓(xùn)練5分鐘記錄每鼠受到的電擊次數(shù)和錯(cuò)誤次數(shù),作為訓(xùn)練和測(cè)試成績(jī)。

1 . 3　統(tǒng)計(jì)處理 　進(jìn)行團(tuán)體均數(shù)比較,方差分析,q檢驗(yàn)。顯著性差異P< 0.05。

2　實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表明:4小時(shí)后用避暗法及跳臺(tái)法做短時(shí)記憶測(cè)定,模型組跳臺(tái)及避暗反應(yīng)錯(cuò)誤次數(shù)較正常組明顯增加,各用藥組5分鐘錯(cuò)誤次數(shù)較模型組顯著降低。跳臺(tái)法中通竅組與西藥對(duì)照組比較,差異有顯著性( P< 0. 05) ,通竅組與滋陰 、活血組比較,差異有顯著性(前者P< 0. 05, 后者P< 0. 01) 。24小時(shí)后復(fù)測(cè),各級(jí)成績(jī)無顯著差別且錯(cuò)誤率降低,可能與東莨菪堿的代謝周期有關(guān)。

3　討論

老年性癡呆是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的病名,在祖國(guó)醫(yī)學(xué)中尚無相同名稱。普遍認(rèn)為該病的癥狀描述散見于“神病”、“健忘”、“郁癥”、“癲狂”中。筆者認(rèn)為, 《醫(yī)宗金鑒·雜病心法要決》提出“神病”包括老年癡呆的各種主要臨床表現(xiàn),因此,本病宜歸入中醫(yī)“神病”范疇。綜觀歷代中醫(yī)著作,該病論臟腑主要屬心、脾、肝、腎、腦。論病因,筆者認(rèn)為,老年性癡呆為本虛標(biāo)實(shí)的病證,其本虛包括心氣虛和腎精虛,其標(biāo)實(shí)為兼夾痰濁、瘀滯。如《類證治裁》曰: “夫人之神宅于心,心之精依于腎。而腦為元神之府,精髓之海,實(shí)記性所憑也�！薄八�治健忘者,必交其心腎,使心之神明下通于腎,腎之精華上升于腦。精能生氣,氣能生神,神定氣清,自鮮遺忘之失”�！拔┮蛴猩仆�者, ……或素有痰飲,或痰迷心竅 ……若血瘀于內(nèi)而善忘如狂�！贬槍�(duì)其病因病機(jī),筆者制定益心氣、滋腎陰、化痰通竅、活血化瘀種治則的方藥,運(yùn)用氫溴酸東莨菪堿造成的小鼠獲得性記憶障礙模型,進(jìn)行行為改善的實(shí)驗(yàn)研究,以期探討、篩選較為有效的治療方案。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,以上4種方法較模型組均有行為方面的顯著改善。其中通竅組較西藥對(duì)照組及活血、滋陰組有顯著差異,說明通竅方法改善記憶的作用尤為突出。綜觀《古今圖書集成·醫(yī)部全錄·諸疾·驚悸怔忡健忘門》中的125個(gè)益智方劑,有86 %的方中含菖蒲、遠(yuǎn)志、茯苓作為通竅藥。24小時(shí)后復(fù)測(cè)錯(cuò)誤率極低,可能由于氫溴酸東莨菪堿半衰期短,僅為15～40分鐘,肌注12小時(shí)內(nèi)大部分排泄,因此,氫溴酸東莨菪堿造成的記憶障礙模型是暫時(shí)的。以上實(shí)驗(yàn)證明,祖國(guó)醫(yī)學(xué)在防治老年癡呆這一世界性醫(yī)學(xué)難題上大有潛力可挖。同時(shí),我們也應(yīng)看到此項(xiàng)實(shí)驗(yàn)僅是對(duì)記憶障礙治療方法的粗篩,但此法簡(jiǎn)單易行,可作為篩選藥物之用。對(duì)有希望的藥物可選擇更穩(wěn)定、神經(jīng)生化變化與Alzheimer氏病相似的動(dòng)物模型,進(jìn)行進(jìn)一步的機(jī)制探討和研究。