小吸頭上的大學(xué)問（之二）—吸附性

在移取低表面張力的液體（如含有清潔劑的試劑等）時，移液器吸頭的內(nèi)壁上通常會留下一層肉眼難以察覺的液體薄膜。這種液體殘留的存在會導(dǎo)致移液結(jié)果的不一致和不準(zhǔn)確，并造成珍貴樣品的損失。

近年來，各種品牌紛紛推出低吸附吸頭，希望能盡量減少這種殘留對實(shí)驗(yàn)造成的影響。以下用不同供應(yīng)商制造的低吸附吸頭處理含有清潔劑的液體，觀察吸頭內(nèi)的液體殘留量，對比低吸附吸頭的性能。

材料
Sartorius Optifit 標(biāo)準(zhǔn)吸頭：200μ、350μl
Sartorius Optifit 低吸附吸頭：200μl、350μl
Sartorius Saftyspace 低吸附濾芯吸頭：120μl
其他供應(yīng)商低吸附吸頭：200μl、300μl
其他供應(yīng)商低吸附濾芯吸頭：200μl
Sartorius Picus電動移液器： 10-300μl，以4檔速度吸液、1檔速度排液
Sartorius mLINE 手動移液器：20-200μl
清潔劑溶液：0.1% Triton X-100，10% Tween 20，10% SDS，染色 10X PCR 緩沖液（含有清潔劑、密度試劑和跟蹤染料）
Sartorius MC5 微量天平，Sartorius 分析天平BP211D

重量分析法
在移液后使用重量分析法對移液器吸頭中的液體殘留量進(jìn)行測量。將裝滿試劑的小玻璃容器放在天平上，將重量設(shè)置為零。然后從容器中吸取一定量的試劑再把它釋放回去，記錄顯示吸頭中液體殘留量的天平讀數(shù)。針對上面列出的每個清潔劑溶液重復(fù)此項(xiàng)操作。

液體殘留量對比
移取常用的清潔劑溶液時，對比 Sartorius 的標(biāo)準(zhǔn)吸頭和低吸附吸頭與其他 5 個供應(yīng)商的低吸附吸頭的性能。對所有液體進(jìn)行測試后發(fā)現(xiàn)，Sartorius 低吸附吸頭的液體殘留量最低（圖 1a）。某些其他廠商的低吸附吸頭的性能甚至還不如 Sartorius 的標(biāo)準(zhǔn)吸頭，這表明市場上的低吸附吸頭之間存在著顯著的性能差異。

圖 1a 液體殘留量對比。

我們通過對下列清潔劑進(jìn)行 200 μl 的移液時，將 Sartorius 標(biāo)準(zhǔn)吸頭和低吸附吸頭與其他 5 個供應(yīng)商的低吸附吸頭與進(jìn)行了對比，這些清潔劑包括：10% Tween 20、0,1% Triton X-100 和 10% SDS。我們使用的是10-300μl 的Picus電動移液器，吸頭容量為200 μl、300 μl 和 350 μl（其規(guī)格取決于各個供應(yīng)商的產(chǎn)品規(guī)格和兼容性）。用重量分析法對吸頭中的液體殘留量進(jìn)行測量。對每個供應(yīng)商的 10 個吸頭進(jìn)行重復(fù)測試。

在另一個實(shí)驗(yàn)中，將含染色清潔劑的 PCR 緩沖液用作測試試劑，以對比不同低吸附吸頭移液的精確性，并觀察移液量如何影響吸頭中的液體殘留。如圖 1b 所示，Sartorius 低吸附吸頭的殘留量最小。Sartorius 標(biāo)準(zhǔn)吸頭的液體殘留量甚至接近于某些廠商的低吸附吸頭的殘留量。使用 Sartorius低吸附吸頭可獲得最佳移液精確性，有力說明了這種吸頭在PCR 等應(yīng)用中的優(yōu)勢。該數(shù)據(jù)還顯示，標(biāo)準(zhǔn)吸頭和低吸附吸頭在液體殘留量上的差異隨著移液量的增加而變大。原因是液體會吸附在吸頭內(nèi)部更大的表面上。

圖 1b 對不同容量的染色PCR緩沖液進(jìn)行移液，比較被測低吸附吸頭的液體殘留量及移液精確性。

將 5 個其他供應(yīng)商的低吸附吸頭與 Sartorius 標(biāo)準(zhǔn)吸頭和低吸附吸頭（濾芯和非濾芯）進(jìn)行對比。使用容量為120 μl、200 μl 和 300 μl（其規(guī)格取決于每個供應(yīng)商的產(chǎn)品規(guī)格和兼容性）的移液器吸頭與 Sartorius mLINE®20-200 μl 對染色 PCR 緩沖液進(jìn)行 20 μl 和 120 μl 的移液。使用重量分析法對吸頭中的液體殘留量進(jìn)行測量。對每個供應(yīng)商的10 個吸頭進(jìn)行重復(fù)測試。誤差線代表標(biāo)準(zhǔn)偏差。

結(jié)論：

低吸附吸頭在移取含有清潔劑的液體時比普通吸頭具有明顯的優(yōu)勢，能大大減少移液后吸頭內(nèi)的液體殘留量。同時結(jié)果也表明，市場上的各種低吸附吸頭在性能方面存在顯著的差異。比較各種低吸附吸頭，Sartorius低吸附吸頭能確保最佳的樣品回收率。

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