Hopx甲基化通過(guò)激活SNAIL轉(zhuǎn)錄而促進(jìn)鼻咽癌細(xì)胞的遷移

4、HOPX抑制鼻咽癌細(xì)胞的EMT過(guò)程

在N2-Tert,，NP69 和SH cells敲低HOPX后，細(xì)胞形態(tài)發(fā)生顯著變化。SUNE1細(xì)胞系中過(guò)表達(dá)HOPX后，檢測(cè)發(fā)現(xiàn)ECADHERIN顯著上調(diào)。

5、鼻咽癌細(xì)胞中HOPX抑制SNAIL轉(zhuǎn)錄

由于EMT-TFs在EMT過(guò)程中起著重要的角色，研究者檢測(cè)了HOPX表達(dá)改變后已知的EMT-TFs調(diào)節(jié)者（SNAIL,SLUG, ZEB1, ZEB2, TWIST1 和 FOXC2）的變化。HOPX表達(dá)量改變后，只有SNAIL有顯著的變化。研究發(fā)現(xiàn)，HOPX可以與SNAIL的啟動(dòng)子區(qū)結(jié)合。

6、HOPX通過(guò)募集HDAC2抑制SNAIL的轉(zhuǎn)錄

免疫共沉淀研究發(fā)現(xiàn)，在生理狀態(tài)下HDAC2與HOPX結(jié)合。HOPX與HDAC2結(jié)合后，更多的HDAC2募集在SNAIL的啟動(dòng)子區(qū)，抑制SNAIL的轉(zhuǎn)錄。

7、HOPX抑制SNAIL轉(zhuǎn)錄是SRF依賴的

通過(guò)檢測(cè)SNAIL結(jié)合HOPX的啟動(dòng)子區(qū)序列，發(fā)現(xiàn)了一個(gè)血清效應(yīng)因子應(yīng)答元件SRF。在之前的研究中，發(fā)現(xiàn)SRF可以與HOPX結(jié)合。在鼻咽癌細(xì)胞系CNE2和SUNE1細(xì)胞系中，過(guò)表達(dá)SRF顯著提高了SNAIL轉(zhuǎn)錄并降低了ECADHERIN的轉(zhuǎn)錄。CoIP實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了在生理狀態(tài)下HOPX與SRF的結(jié)合。HOPX在SRE突變的體系中，并不能影響SNAIL的轉(zhuǎn)錄。HOPX與SRF共表達(dá)的情況下，能夠顯著抑制SNAIL的轉(zhuǎn)錄。因此，HOPX通過(guò)募集HDAC2抑制SRF依賴的SNAIL轉(zhuǎn)錄。

8、恢復(fù)SNAIL的表達(dá)能夠抵消HOPX對(duì)鼻咽癌細(xì)胞遷移和侵襲的抑制

在鼻咽癌細(xì)胞中過(guò)表達(dá)SNAIL后，顯著的削弱了HOPX對(duì)鼻咽癌細(xì)胞的遷移和侵襲的抑制，而且ECADHERIN的表達(dá)降低，VIMENTIN的表達(dá)升高。

9、在活體動(dòng)物體內(nèi)HOPX抑制鼻咽癌細(xì)胞的惡性進(jìn)程

在小鼠腹股溝淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移模型內(nèi)，過(guò)表達(dá)HOPX抑制鼻咽癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。免疫組化結(jié)果也證實(shí)在動(dòng)物體內(nèi)和臨床組織內(nèi)，HOPX抑制SNAIL的表達(dá)，進(jìn)而抑制鼻咽癌的惡性進(jìn)程。

10、HOPX增加鼻咽癌細(xì)胞對(duì)順鉑的敏感性

在小鼠移植瘤模型內(nèi)，HOPX過(guò)表達(dá)顯著提高了順鉑對(duì)腫瘤的抑制作用。

11、HOPX的甲基化程度與鼻咽癌病人的生存率密切相關(guān)

為了檢測(cè)HOPX的甲基化是否與鼻咽癌病人的臨床生存率相關(guān)，研究者采用焦磷酸測(cè)序檢測(cè)了443例鼻咽癌病人的組織。在訓(xùn)練組中72.5%（185/255）HOPX高甲基化。在驗(yàn)證組中，59%的鼻咽癌病人HOPX高甲基化并伴隨著較短的生存期。

研究結(jié)論

鼻咽癌病人中HOPX啟動(dòng)子區(qū)高甲基化導(dǎo)致的其表達(dá)量降低，促進(jìn)了鼻咽癌細(xì)胞的遷移和侵襲。這一生物學(xué)進(jìn)程是由于HOPX在生物體內(nèi)與HDAC2結(jié)合，能夠抑制SRF依賴的SNAIL的轉(zhuǎn)錄。HOPX的甲基化程度與臨床鼻咽癌病人的生存率高度相關(guān)。這一研究結(jié)果為鼻咽癌病人的惡性診斷提供了重要依據(jù)，豐富了鼻咽癌的治療靶點(diǎn)。