大腸桿菌裂解液澄清，收獲胞內表達蛋白

簡介

從大腸桿菌裂解液中分離細胞內表達的蛋白質。目的蛋白具有抗腫瘤潛力。

工藝條件

裂解液體積為245升。使用一根0.2 μm 的Krosflo^® 組件進行批量分離，膜表面積為1.0m² 。流路見圖1所示，料液的循環(huán)速率保持57L/min。先開始料液循環(huán)，然后緩慢打開濾液端口。不限制下游循環(huán)。起始處理溫度為4°C，并緩慢升至12°C直到運行結束。起始進樣壓力為12psig，因為升溫，料液粘度下降，壓力下降至11 psig，而后又因為運行結束前固體顆粒濃度增加而上升至13 psig。

圖 1. 大腸桿菌裂解液過濾流路系統(tǒng)設置

圖2. 大腸桿菌裂解液過濾通量和濾液總體積 vs. 時間

結果

作為典型的細菌裂解液，流量衰減曲線開始迅速降低，并快速達到穩(wěn)定。在65min內共收集237L含目的蛋白的濾液。工藝平均通量為~200L/m²/hr，目標蛋白的通過率為99%。

討論

選擇合適的過濾組件以及工藝條件對于有效地從細胞裂解液中分離感興趣的目的成分是必需的。瑞普利金Krosflo® 過濾組件是從細胞裂解液中分離可溶性蛋白的最佳選擇。如使用一次性預滅菌過濾器進行處理，可避免過濾器清洗不足的問題。過濾器不再會造成批次之間的污染，并保證每次處理的高效率。

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