用藥說明書，你看懂了幾成？（二）——非臨床藥代動力學實驗（PK）

實驗設計

總體要求

1、受試物：采用工藝相對穩(wěn)定、純度和雜質含量能反映臨床試驗擬用樣品和/或上市樣品質量和安全性的樣品。名稱、來源、批號、含量（或規(guī)格）、保存條件、有效期及配制方法等，并提供質量檢驗報告。 

2、試驗動物：成年和健康。常用動物有小鼠、大鼠、兔、豚鼠、犬、小型豬和猴等。

動物選擇原則：

（1）首選動物：在考慮與人體藥代動力學性質相關性的前提下，盡可能選擇與毒理學和藥效學研究相同的動物。

（2）盡量在動物清醒狀態(tài)下進行試驗，最好從同一動物多次采樣獲取藥代動力學參數。

（3）創(chuàng)新性藥物應選用兩種或兩種以上的動物（嚙齒類+非嚙齒類）。其他藥物，可選用一種動物，建議首選非嚙齒類動物。

（4）經口給藥不宜選用兔等食草類動物。

百奧賽圖自產優(yōu)質模式小鼠

3、劑量選擇：動物體內藥代動力學研究應設置至少三個劑量組，高劑量最好接近最大耐受劑量，中小劑量根據動物有效劑量的上下限范圍選取。

4、給藥途徑：盡可能與臨床用藥一致，也要兼顧藥效學研究和毒理研究的給藥途徑。

實驗內容

1、血藥濃度-時間曲線 

1.1、 受試動物數：最好從同一受試動物個體取樣，如由多只動物的數據共同構成一條血藥濃度-時間曲線，需增加動物數，以反映個體差異對結果的影響。

1.2、采樣點：

（1）給藥前需采血作為空白樣品。

（2）采樣時間點的設計應兼顧藥物的吸收相、平衡相（峰濃度Cmax附近）和消除相。

（3）整個采樣時間應持續(xù)到3~5個半衰期，或持續(xù)到血藥濃度為Cmax的1/10~1/20。

（4）注意采血途徑和整個試驗周期的采血總量不影響動物的正常生理功能和血液動力學，一般不超過動物總血量的15％~20%。

1.3、口服給藥：給藥前應禁食12小時以上，以排除食物對藥物吸收的影響。

1.4、多次（重復）給藥：對于臨床需長期給藥或有蓄積傾向的藥物，應考慮進行多次（重復）給藥的藥代動力學研究。多次給藥試驗時, 一般可選用一個劑量(有效劑量)。

圖片來源于網絡^[1]

2. 吸收

經口給藥的新藥，進行整體動物試驗時應盡可能同時進行血管內給藥的試驗，提供絕對生物利用度。

對于其他血管外給藥的藥物及某些改變劑型的藥物，應根據立題目的，提供絕對生物利用度或相對生物利用度。

3. 分布

大鼠或小鼠，選擇一個劑量（有效劑量），給藥后，至少測定藥物及主要代謝產物在心、肝、脾、肺、腎、胃腸道、生殖腺、腦、體脂、骨骼肌等組織的濃度。參考藥-時曲線的變化趨勢，選擇至少3個時間點分別代表吸收相、平衡相和消除相的藥物分布。每個時間點，一般應有6個動物（雌雄各半）的數據�？煽紤]進行多次給藥后特定組織的藥物濃度研究，進行組織分布試驗，必須注意取樣的代表性和一致性。

4. 排泄

同時提供嚙齒類和非嚙齒類動物的排泄數據，嚙齒類每個性別3只動物，非嚙齒類每個性別2~3只動物。數據包括：尿和糞的藥物排泄、膽汁排泄。記錄藥物及主要代謝產物自糞、尿、膽汁排出的速度及總排出量（占總給藥量的百分比），提供物質平衡的數據。

圖片來源網絡^[2]

5. 與血漿蛋白的結合

建議根據藥理毒理研究所采用的動物種屬，進行動物與人血漿蛋白結合率比較試驗。 

采用方法：平衡透析法、超過濾法、分配平衡法、凝膠過濾法、色譜法等。可選擇使用一種方法進行至少3個濃度（包括有效濃度）的血漿蛋白結合試驗，每個濃度至少重復試驗3次，以了解藥物與血漿蛋白結合率以及可能存在的濃度依賴性和血漿蛋白結合率的種屬差異。 

除上述實驗內容外，創(chuàng)新型藥物還需要進行以下實驗

6. 生物轉化

臨床前可先采用色譜方法或放射性同位素標記方法分析和分離可能存在的代謝產物，并用色譜-質譜聯用等方法初步推測其結構。

體內藥物生物轉化可考慮與藥-時曲線和排泄試驗同時進行，應用這些試驗采集的樣品進行代謝產物的鑒定及濃度測定。 

7.藥物代謝酶及轉運體研究

體外試驗體系是評價藥物代謝酶和轉運體作用機制，結合體內試驗，綜合評價藥物的處置過程。非臨床ADME研究應主要采用人源化材料（如：人肝微粒體、肝S9、原代肝細胞及P450重組酶等），鑒定藥物是否是代謝酶的底物或抑制劑。

藥物轉運體在藥物吸收、分布、代謝、排泄中的作用^[3]

8. 物質平衡

臨床前和臨床早期，毒性劑量和有效治療劑量范圍確定時，運用放射性標記化合物，收集動物和人體糞、尿以及膽汁以研究藥物的物質平衡。這些研究能夠獲得化合物的排泄途徑和排泄速率等信息，而且有助于代謝產物的性質鑒定，并通過有限的數據比較它們的體內吸收和分布特點。

非臨床藥代實驗中，實驗動物很重要哦，百奧賽圖自產的模式小鼠非常優(yōu)秀呢，大家感興趣要記得聯系我們啊~~

篇幅有限，今天的內容就到這里啦，后續(xù)會持續(xù)更新毒理藥理相關內容，敬請期待呀~本文參考國家藥品監(jiān)督管理局藥品評審中心2014年5月頒布的《藥物非臨床藥代動力學研究技術指導原則》^[4]。

參考圖文

[1]http://pic.sogou.com/d?query=%B3%E9%D1 %AA%CD%BC%C6%AC%B4%F3%C8%AB%BF%A8%CD%A8%CD%BC%C6%AC&mode=1&did=8#did7

[2]http://pic.sogou.com/d?query=%F4%CE%F 4%CE%B1%ED%C7%E9%B0%FC&mode=1&did=10#did9

[3]http://pic.sogou.com/d?query=%D2%A9%C E%EF%CC%E5%C4%DA%B4%FA%D0%BB&mode=1&did=18#did17

[4]http://www.cde.org.cn/zdyz.do?method= largePage&id=191