Leica:您的樣本診斷流程小貼士來啦！

瀏覽次數(shù)：4734　發(fā)布日期：2019-8-1　來源：本站　僅供參考，謝絕轉(zhuǎn)載，否則責(zé)任自負(fù)

第1-11步

徠卡101

樣本的接收和轉(zhuǎn)移

從患者到病理學(xué)家，準(zhǔn)備樣本進行診斷需要細(xì)心、經(jīng)驗以及合理的流程。

徠卡特地為大家整理了取材、組織處理、包埋、切片以及染色等（常規(guī)、特殊、IHC以及FISH）101步操作流程，幫助大家更有效、更簡單地獲得實驗方案，避免錯誤的發(fā)生。

步驟一

避免機械性損傷

🙆 正確：小心移動組織，避免機械損傷。外科以及解剖過程中，在任何需要新鮮組織的情況下，都必需非常小心地采集組織樣本；

🙅 錯誤：組織在固定前由于擠壓和撕裂引起的機械損傷。

淋巴組織：典型的人為擠壓引起的損傷。在圖中表現(xiàn)為暗而變形的細(xì)胞核，以致其中一些細(xì)胞拉長而呈強的嗜堿性。

步驟二

避免樣本干燥

🙆 正確：避免樣本在固定前干燥。如果不能馬上進行固定的話，使用含生理鹽水的濕紗布覆蓋避免干燥；

🙅 錯誤：組織在固定前在吸水的材料表面放置一段時間。

這塊新鮮的組織剛從患者的體內(nèi)取出。由于它被放在托盤中而且環(huán)境溫度較高，如果不馬上進行固定的話就會迅速變干引起組織損傷。

步驟三

避免熱損傷

🙆 正確：盡可能避免樣本局部過熱引起的損傷（一些灼燒損傷可能是沒法避免的）；

🙅 錯誤：一些不必要的局部過熱引起組織損傷，新鮮組織特別容易因此受損。

乳腺組織邊緣部分區(qū)域的細(xì)胞呈強嗜酸性并已丟失細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)詳情。其原因在于采集樣本過程中，灼燒引起局部過熱而導(dǎo)致?lián)p傷，相鄰的腺體組織沒有受到影響。

步驟四

避免化學(xué)損傷

🙆 正確：外界化學(xué)物質(zhì)（如：消毒劑）對新鮮組織的污染；

🙅 錯誤：還沒有經(jīng)過固定的組織很容易被外界化學(xué)物質(zhì)浸潤和破壞。

Monsel溶液（堿式硫酸鐵溶液）是一個典型的止血劑，用于控制活檢組織粘膜的血液流動，它能夠引起粘膜表面的血液凝固與細(xì)胞壞死。如果應(yīng)用在活檢，則容易引起局部嗜堿性以及早期壞死的現(xiàn)象，從而導(dǎo)致病理改變。Monsel溶液損傷，常見于重新進行活檢取材或者手術(shù)切除后。圖A：H&E染色后的宮頸活檢圖以及圖B：用Perl染色后的組織表面表現(xiàn)出大量的鐵沉積，兩圖都能體現(xiàn)該現(xiàn)象。

步驟五

正確進行樣本標(biāo)記

🙆 正確：組織樣本必需容易辨識，所有的樣本細(xì)節(jié)必需及時記錄清楚；

🙅 錯誤：組織樣本細(xì)節(jié)記錄延遲，信息提供不完整。

這塊新鮮的組織剛從患者的體內(nèi)取出。由于它被放在托盤中而且環(huán)境溫度較高，如果不馬上進行固定的話就會迅速變干引起組織損傷。

步驟六

確保及時固定

🙆 正確：必需進行及時固定，如果樣本不能馬上進行固定的話，短時間內(nèi)可以保存在4℃的冰箱中；

🙅 錯誤：固定延遲（組織結(jié)構(gòu)在離體后就隨即開始發(fā)生變性）。

A. 此尸檢肝樣本（H&E）沒有及時固定，導(dǎo)致核界限以及細(xì)胞質(zhì)細(xì)節(jié)不清楚，中心血管內(nèi)出現(xiàn)大量細(xì)菌；
B. 此切片肌肉纖維組織的核染色質(zhì)保存不完整，就是固定不及時引起的。

步驟七

使用合適的試劑和容器進行固定

🙆 正確：合適量的固定試劑（固定液和組織比例至少為20:1）放在合適大小的容器中，這可以避免新鮮組織損傷，確保高質(zhì)量固定；

🙅 錯誤：組織樣本被擠在一個小的容器當(dāng)中，導(dǎo)致樣本因沒有被全部覆蓋到而固定不充分。

大量組織擠在一個很小的容器中，組織擠在小的容器中可導(dǎo)致組織損傷、固定不充分。

步驟八

檢查固定液的pH值

🙆 正確：高質(zhì)量固定試劑以及最優(yōu)的pH值；

🙅 錯誤：固定液質(zhì)量差，pH值不明確。酸性的福爾馬林會很快與細(xì)胞內(nèi)免疫球蛋白發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生蛋白交聯(lián)。而接近中性的福爾馬林溶液雖然也會和免疫球蛋白發(fā)生反應(yīng)，但是反應(yīng)速度會相對慢一點。進行染色前，需要進行修復(fù)，以恢復(fù)免疫球蛋白結(jié)構(gòu)。