細胞培養(yǎng)：胎牛血清如何選擇

對于細胞培養(yǎng)而言，胎牛血清（Fetal Bovine Serum, FBS）的重要性不言而喻。盡管近年來無血清培養(yǎng)基和非動物來源的培養(yǎng)基越來越受到關注，但目前大部分細胞還無法適用這些培養(yǎng)基，并且存在費用較高和細胞生長較緩慢的缺點，因此，含有FBS的完全培養(yǎng)基仍然是目前主流的細胞培養(yǎng)體系。

把細胞養(yǎng)好的三個關鍵要素是：良好的細胞來源，正確的實驗操作，以及合適的培養(yǎng)體系。其中“合適的培養(yǎng)體系”就是要創(chuàng)造適合細胞生長的環(huán)境，給細胞建立一個滿意的“家”，而FBS就好比于這個家的裝修，可以提高細胞的居住環(huán)境和舒適性，讓細胞更好更快地生長！

當然，F(xiàn)BS并不是完美的，它除了可為細胞提供生長所必須的蛋白、細胞因子、激素和微量元素等多種營養(yǎng)物質(zhì)，同時也含有內(nèi)毒素、補體、抗體等對細胞生長有危害的成分，若選擇不當，不合適的FBS會嚴重影響細胞的生長狀態(tài)甚至導致細胞死亡。因此，F(xiàn)BS既是讓細胞快樂成長的必備營養(yǎng)物，又是可能導致細胞死亡的“定時炸彈”！辛苦養(yǎng)起來的細胞可能因為FBS用錯而一切歸零……

那么，應如何為你的細胞選購FBS呢？選購FBS應考慮哪些標準？

血源可追溯性

選擇來源安全、可追溯的FBS對于細胞培養(yǎng)來說至關重要。目前市面上存在較多以假亂真的FBS產(chǎn)品，科研工作者對血清的真實產(chǎn)地、來源難以鑒別。對此，國際血清行業(yè)協(xié)會（ISIA）實施了供應鏈可追溯性的行業(yè)標準，以確保FBS的質(zhì)量和安全性。例如，F(xiàn)BS供應商是否保留原產(chǎn)地的可追溯記錄？是否持有血清生產(chǎn)各階段處理、運輸和商業(yè)交易的文件？這些都是判斷FBS可追溯性需要考慮的因素。

產(chǎn)品檢測

每款FBS在生產(chǎn)上市之前，必須經(jīng)過嚴格的質(zhì)控檢測。

質(zhì)控環(huán)節(jié)必不可少，以確保上市的血清符合規(guī)定合乎規(guī)格，而血清產(chǎn)品分析證書（COA）就是FBS質(zhì)控的重要體現(xiàn)。在COA中，常規(guī)的檢測指標包括內(nèi)毒素、總蛋白、細菌、病毒等，例如我國藥典規(guī)定，F(xiàn)BS中內(nèi)毒素含量應≤10EU/mL，另外總蛋白為30-50mg/mL、血紅蛋白檢測不高于30mg/dL。

質(zhì)量驗證

我們使用FBS目的是為了讓細胞更真實、健康地生長。在確保了FBS的來源真實性、安全可靠性后，下一步就要對FBS的質(zhì)量，即培養(yǎng)細胞的效果進行鑒定了，而這也是決定細胞能否養(yǎng)好的關鍵。

在細胞培養(yǎng)過程，質(zhì)量粗糙的FBS可能會導致細胞出現(xiàn)生長速度緩慢、不貼壁、容易老化等現(xiàn)象，從而導致實驗受阻。經(jīng)過質(zhì)量驗證的FBS，則可以十分確定這款FBS對哪些細胞具有良好的培養(yǎng)效果，進而判斷其能否把自己的細胞養(yǎng)好。對于質(zhì)量優(yōu)質(zhì)的FBS，通常采用血清敏感性細胞（如干細胞）來進行培養(yǎng)驗證，若培養(yǎng)效果良好，則其他常規(guī)細胞系的培養(yǎng)就更不在話下。

穩(wěn)定性

FBS作為其他行業(yè)的副產(chǎn)品，其生產(chǎn)在本質(zhì)上會受到天氣、食物供應、經(jīng)濟條件和牛群規(guī)模及疫情等各種因素的影響，導致血清的供應可能出現(xiàn)貨源、價格及批次間的不穩(wěn)定性，從而造成實驗的不順甚至實驗失敗。在過去，國內(nèi)外已有多個實驗室出現(xiàn)過因血清批間差異大而導致實驗結(jié)果無法重復的情況，浪費了巨大的時間和金錢成本。

因此，找到穩(wěn)定提供同批次FBS的供應商，對于確保自己細胞實驗結(jié)果的真實性和可重復性具有重要意義，而且花在重復實驗或檢驗新批次上的時間將大大減少。