期刊對Western Blot數(shù)據(jù)要求的四大要點

2018年，PubMed 中共有194,262 篇蛋白相關的論文，其中有16,196（8.3%）篇用到了 WB。WB 的使用比例在過去30年中穩(wěn)定在8%到9%左右，而更為現(xiàn)代和準確的蛋白質譜技術（MS），在過去十年中應用比例則穩(wěn)定在4%，僅僅是WB的一半。四十年后的今天，WB依舊是應用率最高的蛋白質分析技術。但是重現(xiàn)性和穩(wěn)定性的問題，也使Western Blot技術處在風口浪尖上。因此2014年，美國國立衛(wèi)生研究院提倡提高科研重現(xiàn)性，呼吁研究界、科學出版商、大學、工業(yè)界和其他領域推動這一變化。率先響應的期刊有Science，Cell，Nature和JBC。那讓我們來看看期刊都有哪些具體要求：

一、不建議跑平行膠，因為平行膠和剝離膜孵育體系，操作條件的不一致，影響定量的準確性，因此最好內參和目的蛋白要在同一張印跡膜上。

二、選擇寬動態(tài)范圍的方法，確認信號強度與所上樣量之間的線性關系，例如用膠片做化學發(fā)光方法的動態(tài)范圍就很窄，不建議使用。

三、強烈推薦使用總蛋白進行歸一化，因為看家蛋白容易受處理條件影響而發(fā)生變化，影響定量的結果，使用總蛋白定量更真實地反映目標蛋白表達量的變化。

四、提交原始數(shù)據(jù)，例如：JBC，PLOS和CELL等雜志都要求要提供原始數(shù)據(jù)。

Azure Sapphire多光譜激光成像系統(tǒng)如何滿足期刊要求

☑  Sapphire是多熒光檢測系統(tǒng)，可多達4個激光光源，同時進行4通道熒光檢測，獲得更快的工作流程和更可靠的定量數(shù)據(jù)。
☑   Sapphire配合AzureRed總蛋白熒光染色劑可以做總蛋白歸一化和定量三個靶標蛋白，生成可以信賴的定量Western Blotting數(shù)據(jù)。
☑   Sapphire配有獨特的三種檢測器設計，最大限度地提高儀器的檢測動態(tài)范圍，保證結果的準確性。☑   Sapphire提供原始數(shù)據(jù)16bit的tiff圖給到期刊，這里的tiff原始數(shù)據(jù)是指未經(jīng)裁剪，像素修改，對比度調整等任何操作的圖，保證結果的真實性和可靠性。