使用切向流過濾進(jìn)行胞外囊泡的濃縮和洗濾

來自瑞典KTH皇家理工學(xué)院等的研究人員在2021年1月份的《bioRxiv》雜志發(fā)表了題為“Multiparametric Profiling of Single Nanoscale Extracellular Vesicles by Combined Atomic Force and Fluorescence Microscopy: Correlation and Heterogeneity in Their Molecular and Biophysical Features”的文章。研究中，使用膜表面積370cm2、MWCO 300 kD的MidiKros® 中空纖維過濾器組件對制備的胞外囊泡（EV）進(jìn)行濃縮和洗濾。

摘要：作為細(xì)胞間通信的關(guān)鍵參與者，納米級細(xì)胞外囊泡(EV)為診斷和治療提供了獨(dú)特的機(jī)會。然而，由于其在分子和物理特性上的高度異質(zhì)性，其細(xì)胞起源和功能特性仍然難以確定。本文首次結(jié)合利用熒光和原子力顯微鏡，研究了單個小EV (sEV)的膜蛋白組成、大小和機(jī)械特性等多個EV參數(shù)。此外，還研究了它們在不同細(xì)胞源中的相關(guān)性和異質(zhì)性。本研究針對來自人胚胎腎293、臍血間充質(zhì)基質(zhì)和人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞系的sEV進(jìn)行了研究，鑒定出常見的和細(xì)胞系特異性的sEV亞群，這些亞群具有不同的常見四跨膜蛋白(CD9、CD63和CD81)分布和生物物理特性。雖然各個sEV的四跨膜蛋白豐度與其大小無關(guān)，但CD9和CD63的表達(dá)水平有很強(qiáng)的相關(guān)性。然而，在所有的細(xì)胞系中也發(fā)現(xiàn)了一個具有較高豐度共表達(dá)所有三種四跨膜蛋白的sEV群體，其平均直徑<100 nm，楊氏模量相對較低。這種多參數(shù)方法有望為EV生物學(xué)和功能提供新的見解，潛在地破解該領(lǐng)域尚未解決的問題。
 

原文：S.Cavallaro, F.Pevere, F.Stridfeldt, et al., Multiparametric Profiling of Single Nanoscale Extracellular Vesicles by Combined Atomic Force and Fluorescence Microscopy: Correlation and Heterogeneity in Their Molecular and Biophysical Features. bioRxiv, 2021, doi: https://doi.org/10.1101/2021.01.22.427773.

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