采用活細胞分析系統(tǒng)最大限度地洞察細胞生長

Overview
白皮書《采用活細胞分析系統(tǒng)最大限度地洞察細胞生長》展示如何利用Incucyte系統(tǒng)的活細胞分析能力更快、更深入、更高通量地提供對生物學事件的新見解，從細胞凋亡、免疫細胞殺傷、神經(jīng)突生長和吞噬作用，到3D 腫瘤球生長和活性等各種應(yīng)用場景。

這為研究人員提供了實驗設(shè)計新方法，用來解決之前無法解決的問題�；罴毎�分析監(jiān)測細胞行為隨著時間的變化，增加了動力學測量數(shù)據(jù)的潛力，而不再受單一時間點終點分析的影響，簡化了各種應(yīng)用的實驗操作流程，包括細胞健康和活性、免疫學和免疫腫瘤學、細胞療法和神經(jīng)科學。

Incucyte® 活細胞分析系統(tǒng)

可以預(yù)見，隨著人工智能和機器學習能力的不斷增強，未來將有可能在細胞層面實現(xiàn)更深入的理解。使用活細胞分析系統(tǒng)，任何用戶都可以動態(tài)地了解其細胞模型的健康、形態(tài)、運動和功能，并能夠實時、全天候地對細胞類型特異性和時間依賴性的生物活動進行分析。至關(guān)重要的是，Incucyte獨特的技術(shù)結(jié)合細胞非干擾試劑，可確保細胞培養(yǎng)不受外界影響，并獲取高質(zhì)量的結(jié)果。

無標記分析
- 相差成像

該方法最適合在2D模型中對細胞生長和形態(tài)進行測量；Incucyte采用專有技術(shù)獲取高清的相差圖像，確保得到細胞增殖定量的可靠結(jié)果。   

- 明場成像

采用活細胞分析成像可直觀地監(jiān)測球體大小隨著時間的變化，而不會破壞組織培養(yǎng)物，并有助于了解有絲分裂過程中細胞生物量的積累。與2D 單層模型相比，這些3D 細胞模型更能代表和預(yù)測體內(nèi)條件，可提供更多體內(nèi)相關(guān)性和轉(zhuǎn)化性的觀察結(jié)果。

細胞熒光標記
- 單獨細胞的標記
熒光標記可有力地驗證之前所述的無標記技術(shù)，反之亦然，無標記技術(shù)對于確認潛在的熒光探針是否對細胞無干擾，并優(yōu)化細胞培養(yǎng)的實驗至關(guān)重要。

- 混合培養(yǎng)物中的細胞標記
活細胞ICC可用于識別混合培養(yǎng)中的特定細胞群，使人們對細胞過程（如細胞生長）有更深入的了解。

- 復(fù)雜共培養(yǎng)
活細胞分析系統(tǒng)可以獲得比以往更多的細節(jié)，產(chǎn)生有價值的縱向數(shù)據(jù)，以了解細胞之間的相互作用和過程，例如免疫細胞激活和免疫細胞殺傷腫瘤。

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數(shù)據(jù)結(jié)果搶先看

無標記細胞增殖的動力學分析——將MDA-MB-231（A&B）或A549（C&D）細胞以不同密度接種在96孔板中，采集圖像，并用Incucyte®活細胞分析系統(tǒng)對其進行分析，通過basic模塊分析計算匯合度（A&B）或cell-by-cell模塊分析計數(shù)細胞（C&D）。圖像顯示了匯合度mask（A）或cell-by-cell mask（C），曲線（B&D）顯示了細胞隨著時間變化的增殖情況。數(shù)據(jù)顯示為4個孔的均值± SEM。

3D 結(jié)構(gòu)的明場成像。示例顯示了MDA-MB-231 細胞形成的單球體明場圖像，A549 細胞作為多球體培養(yǎng)物接種在Matrigel™ 上，以及嵌入在Matrigel 膠滴中的小鼠胰腺類器官。mask 以黃色顯示，以用來定量細胞增殖隨時間的變化。定量結(jié)果如曲線圖所示。

在共培養(yǎng)前熒光標記細胞。將相同數(shù)量的AU565-Nuclight green 細胞和MDA-MB-231-Nuclight Near IR 細胞接種到96 孔板中，并用谷氨酰胺酶抑制劑CB-839（1 μM）處理。之前已經(jīng)證明三陰性細胞（例如MDA-MB-231）對這種化合物敏感。使用Incucyte 活細胞分析系統(tǒng)中，持續(xù)四天采集相差和熒光圖像。綠色和Near IR 熒光（A）的圖像顯示，在正常情況下，兩種細胞類型均會增殖，而在CB-839 情況下，Near IR 細胞明顯減少。隨著時間進展，AU565 細胞生長受到極輕微的影響（B），而MDA-MB-231 細胞增殖明顯受到抑制（C）。此外還發(fā)現(xiàn)，與MDA-MB-231 細胞相比，AU565細胞生長速率較慢。