細(xì)胞培養(yǎng)之細(xì)胞房的構(gòu)建及常用設(shè)備入門(mén)攻略
細(xì)胞培養(yǎng)是進(jìn)行細(xì)胞生物學(xué)研究時(shí)最基礎(chǔ)的實(shí)驗(yàn)，是將離體的組織細(xì)胞置于模擬在體內(nèi)生存的環(huán)境中，讓其生長(zhǎng)和發(fā)育的方法�，F(xiàn)代生物技術(shù)（基因工程技術(shù)、細(xì)胞工程技術(shù)、酶工程技術(shù)和發(fā)酵工程技術(shù)等）的發(fā)展與細(xì)胞培養(yǎng)有著緊密聯(lián)系，然而細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)無(wú)菌等條件的要求高于普通的微生物培養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)習(xí)慣和操作要求也有不同的標(biāo)準(zhǔn)，因此細(xì)胞房（細(xì)胞培養(yǎng)室）在建設(shè)時(shí)須要遵守一定的基本原則。
01細(xì)胞房的構(gòu)建
在細(xì)胞房?jī)?nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)需嚴(yán)格保持無(wú)菌操作，以避免微生物及其他有害因素的影響。工作環(huán)境需保持清潔、干燥和無(wú)煙塵。一般細(xì)胞房有五個(gè)工作區(qū)：無(wú)菌操作區(qū)、孵育區(qū)、制備區(qū)、清洗消毒滅菌區(qū)和儲(chǔ)藏區(qū)。
1、無(wú)菌操作區(qū)：無(wú)菌操作區(qū)只限于細(xì)胞培養(yǎng)及其他無(wú)菌操作，最好能與外界隔離，不能受到穿行或受其他干擾。一般由更衣間、緩沖間和操作間三部分組成。
2、孵育區(qū)：孵育區(qū)對(duì)無(wú)菌的要求雖沒(méi)有無(wú)菌區(qū)嚴(yán)格，但仍需保持清潔無(wú)塵。因此也應(yīng)設(shè)置在干擾少且非來(lái)往穿行的區(qū)域。孵育可在孵箱或可控制溫度的溫室中進(jìn)行。
3、制備區(qū)：主要進(jìn)行培養(yǎng)液及有關(guān)培養(yǎng)用的液體制備。
4、清洗和消毒滅菌區(qū)：應(yīng)與其他區(qū)域分開(kāi)，主要進(jìn)行所有細(xì)胞培養(yǎng)器皿的清洗、準(zhǔn)備、消毒及三蒸水制備等工作。
5、儲(chǔ)藏區(qū)：主要存放各類(lèi)冰箱、干燥箱、液氮罐、無(wú)菌培養(yǎng)液、培養(yǎng)瓶等設(shè)備。此環(huán)境同需要清潔無(wú)塵。
02細(xì)胞房常用設(shè)備
1、超凈工作臺(tái)：也稱(chēng)為凈化工作臺(tái)。不同的品牌的超凈工作臺(tái)工作原理大致相同，通常是將室內(nèi)空氣經(jīng)粗過(guò)濾器初濾，然后由離心風(fēng)機(jī)壓入靜壓箱，再經(jīng)高效空氣過(guò)濾器精濾。由此送出的潔凈氣流以一定均勻的斷面風(fēng)速通過(guò)無(wú)菌區(qū)，從而形成無(wú)塵無(wú)菌的高潔凈度工作環(huán)境。一般使用的凈化工作臺(tái)主要有兩種：
3、超純水機(jī)：細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)水的質(zhì)量要求較高。細(xì)胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水（0.8MΩ以上），純化時(shí)可采用離子交換裝置或蒸餾器。
4、單細(xì)胞懸液制備儀：可將組織制備成高活性單細(xì)胞懸液或組織勻漿。廣泛應(yīng)用在單細(xì)胞測(cè)序、原代細(xì)胞培養(yǎng)、流式分析、細(xì)胞分選、細(xì)胞治療等研究領(lǐng)域。
5、CO₂培養(yǎng)箱：CO₂培養(yǎng)箱是細(xì)胞培養(yǎng)中必不可少的設(shè)備，它為細(xì)胞提供了一個(gè)體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境，如適宜的溫度、CO₂濃度和濕度等。細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)容易受到各種細(xì)菌、微生物的污染，因此，CO₂培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。RWD D180-P二氧化碳培養(yǎng)箱，具備高達(dá)140℃的高溫干熱滅菌系統(tǒng)成為大家首選設(shè)備。
6、干燥箱：培養(yǎng)箱的相關(guān)器械、器皿在日常清潔中需要消毒、烘干后使用，因此細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必須配備干燥箱才行。常見(jiàn)的干燥箱是鼓風(fēng)式電熱干燥箱，其優(yōu)點(diǎn)在于溫度均勻、干燥效果較好。
7、冰箱：細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室中的冰箱分為普通冰箱/冷藏柜和低溫冰箱兩類(lèi)。其中，低溫冰箱溫度控制跨度在-40℃~-150℃左右，常用于儲(chǔ)存需要冷凍保存生物活性及較長(zhǎng)時(shí)期存放的制劑，如酶、血清以及一些動(dòng)物樣品等。
8、液氮罐：為了保存細(xì)胞，特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或是細(xì)胞株，要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃，因此，需要液氮罐對(duì)細(xì)胞進(jìn)行保藏。
9、恒溫水浴：從液氮或超低溫冰箱中取出細(xì)胞凍存管需要立即放于37℃水浴中快速?gòu)?fù)蘇之后才傳代培養(yǎng)，因此，恒溫水浴是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器。
10、自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀：細(xì)胞計(jì)數(shù)是細(xì)胞生物學(xué)研究中的一項(xiàng)基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)，通過(guò)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀可以精準(zhǔn)快速地計(jì)算細(xì)胞濃度、了解培養(yǎng)細(xì)胞狀態(tài)、繪制生長(zhǎng)曲線等。
11、消毒器：直接或間接與細(xì)胞接觸的物品均需消毒滅菌處理。常用高壓蒸汽滅菌鍋，手提式高壓蒸汽消毒器。
12、器械：主要用于解剖、取材、剪切組織及操作時(shí)持取物件。常用的有：手術(shù)刀或解剖刀、手術(shù)剪或解剖剪（彎剪及直剪），眼科虹膜小剪（彎剪或直剪），血管鉗及組織鑷、眼科鑷（彎、直）等。瑞沃德動(dòng)物手術(shù)器械，質(zhì)量好助力工作效率提升。
ps：其他設(shè)備可參考具體實(shí)驗(yàn)需求。
01細(xì)胞房的構(gòu)建
在細(xì)胞房?jī)?nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)需嚴(yán)格保持無(wú)菌操作，以避免微生物及其他有害因素的影響。工作環(huán)境需保持清潔、干燥和無(wú)煙塵。一般細(xì)胞房有五個(gè)工作區(qū)：無(wú)菌操作區(qū)、孵育區(qū)、制備區(qū)、清洗消毒滅菌區(qū)和儲(chǔ)藏區(qū)。
潔凈室（區(qū)）空氣潔凈度級(jí)別表
1、無(wú)菌操作區(qū)：無(wú)菌操作區(qū)只限于細(xì)胞培養(yǎng)及其他無(wú)菌操作，最好能與外界隔離，不能受到穿行或受其他干擾。一般由更衣間、緩沖間和操作間三部分組成。
- 更衣間：提供更換實(shí)驗(yàn)服、鞋子及穿戴帽子、口罩和手套。
- 緩沖間：位于更衣間與操作間之間。 目的是為了保證操作間的無(wú)菌環(huán)境，同時(shí)可放置細(xì)胞培養(yǎng)箱及某些必需的小型儀器。
- 無(wú)菌操作間：專(zhuān)用于無(wú)菌操作、細(xì)胞培養(yǎng)。
2、孵育區(qū)：孵育區(qū)對(duì)無(wú)菌的要求雖沒(méi)有無(wú)菌區(qū)嚴(yán)格，但仍需保持清潔無(wú)塵。因此也應(yīng)設(shè)置在干擾少且非來(lái)往穿行的區(qū)域。孵育可在孵箱或可控制溫度的溫室中進(jìn)行。
3、制備區(qū)：主要進(jìn)行培養(yǎng)液及有關(guān)培養(yǎng)用的液體制備。
4、清洗和消毒滅菌區(qū)：應(yīng)與其他區(qū)域分開(kāi)，主要進(jìn)行所有細(xì)胞培養(yǎng)器皿的清洗、準(zhǔn)備、消毒及三蒸水制備等工作。
5、儲(chǔ)藏區(qū)：主要存放各類(lèi)冰箱、干燥箱、液氮罐、無(wú)菌培養(yǎng)液、培養(yǎng)瓶等設(shè)備。此環(huán)境同需要清潔無(wú)塵。
02細(xì)胞房常用設(shè)備
1、超凈工作臺(tái)：也稱(chēng)為凈化工作臺(tái)。不同的品牌的超凈工作臺(tái)工作原理大致相同，通常是將室內(nèi)空氣經(jīng)粗過(guò)濾器初濾，然后由離心風(fēng)機(jī)壓入靜壓箱，再經(jīng)高效空氣過(guò)濾器精濾。由此送出的潔凈氣流以一定均勻的斷面風(fēng)速通過(guò)無(wú)菌區(qū)，從而形成無(wú)塵無(wú)菌的高潔凈度工作環(huán)境。一般使用的凈化工作臺(tái)主要有兩種：
- 側(cè)流式或稱(chēng)垂直式
- 外流式或稱(chēng)水平層流式。
3、超純水機(jī)：細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)水的質(zhì)量要求較高。細(xì)胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水（0.8MΩ以上），純化時(shí)可采用離子交換裝置或蒸餾器。
4、單細(xì)胞懸液制備儀：可將組織制備成高活性單細(xì)胞懸液或組織勻漿。廣泛應(yīng)用在單細(xì)胞測(cè)序、原代細(xì)胞培養(yǎng)、流式分析、細(xì)胞分選、細(xì)胞治療等研究領(lǐng)域。
6、干燥箱：培養(yǎng)箱的相關(guān)器械、器皿在日常清潔中需要消毒、烘干后使用，因此細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必須配備干燥箱才行。常見(jiàn)的干燥箱是鼓風(fēng)式電熱干燥箱，其優(yōu)點(diǎn)在于溫度均勻、干燥效果較好。
7、冰箱：細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室中的冰箱分為普通冰箱/冷藏柜和低溫冰箱兩類(lèi)。其中，低溫冰箱溫度控制跨度在-40℃~-150℃左右，常用于儲(chǔ)存需要冷凍保存生物活性及較長(zhǎng)時(shí)期存放的制劑，如酶、血清以及一些動(dòng)物樣品等。
8、液氮罐：為了保存細(xì)胞，特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或是細(xì)胞株，要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃，因此，需要液氮罐對(duì)細(xì)胞進(jìn)行保藏。
9、恒溫水浴：從液氮或超低溫冰箱中取出細(xì)胞凍存管需要立即放于37℃水浴中快速?gòu)?fù)蘇之后才傳代培養(yǎng)，因此，恒溫水浴是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器。
10、自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀：細(xì)胞計(jì)數(shù)是細(xì)胞生物學(xué)研究中的一項(xiàng)基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)，通過(guò)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀可以精準(zhǔn)快速地計(jì)算細(xì)胞濃度、了解培養(yǎng)細(xì)胞狀態(tài)、繪制生長(zhǎng)曲線等。
12、器械：主要用于解剖、取材、剪切組織及操作時(shí)持取物件。常用的有：手術(shù)刀或解剖刀、手術(shù)剪或解剖剪（彎剪及直剪），眼科虹膜小剪（彎剪或直剪），血管鉗及組織鑷、眼科鑷（彎、直）等。瑞沃德動(dòng)物手術(shù)器械，質(zhì)量好助力工作效率提升。
ps：其他設(shè)備可參考具體實(shí)驗(yàn)需求。
標(biāo)簽：
細(xì)胞培養(yǎng)
細(xì)胞房
- 人膽囊癌細(xì)胞系ZJU0430/LUC使用說(shuō)明書(shū)
- 人乳腺癌細(xì)胞（非三陰）zr751使用說(shuō)明書(shū)
- 細(xì)胞系與細(xì)胞株的建立要點(diǎn)及基本過(guò)程
- ATCC和CMCC的區(qū)別和應(yīng)用場(chǎng)景
- 人高分化脂肪肉瘤細(xì)胞93T449培養(yǎng)說(shuō)明書(shū)
- 人骨髓橫紋肌肉癌細(xì)胞SJCRH30培養(yǎng)說(shuō)明書(shū)
- 五大熒光蛋白新星的介紹及其在神經(jīng)科學(xué)與發(fā)育生物學(xué)中的應(yīng)用
- 慢病毒轉(zhuǎn)染的實(shí)驗(yàn)操作、注意事項(xiàng)以及常見(jiàn)問(wèn)題
- 細(xì)胞檢測(cè)試劑盒免費(fèi)送，反饋即享100%京東卡好禮！
- 2025動(dòng)物生物育種與繁殖技術(shù)學(xué)術(shù)交流研討會(huì)通知
- 開(kāi)年上新：尚恩生物細(xì)胞轉(zhuǎn)染服務(wù)正式上線啦!
- 尚恩生物開(kāi)年大促銷(xiāo)，福利疊滿(mǎn)解鎖新學(xué)期！
- 尚恩生物年終大促—4款細(xì)胞系套餐送500ml完全培養(yǎng)基
- 尚恩生物雙11促銷(xiāo)：任意細(xì)胞系+配套完培下單立減100
- 賽業(yè)今晚直播：點(diǎn)突變細(xì)胞株構(gòu)建策略及其研究應(yīng)用
- 賽業(yè)講座：兩步灌流法提取原代鼠肝臟Kupffer細(xì)胞
Copyright(C) 1998-2025 生物器材網(wǎng) 電話(huà)：021-64166852;13621656896 E-mail：info@bio-equip.com