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淺談鍍膜技術(shù)在生物電鏡中的應(yīng)用

瀏覽次數(shù):1143 發(fā)布日期:2021-9-3  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

受徠卡顯微系統(tǒng)生命科學(xué)應(yīng)用部的邀請(qǐng),2020年12月29日北京大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院儀器中心電鏡平臺(tái)的資深技術(shù)工程師,劉軼群老師,在徠卡官方網(wǎng)絡(luò)直播平臺(tái)講解了鍍膜技術(shù)在生物電鏡中的應(yīng)用。
 

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劉軼群,北京大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院儀器中心電鏡平臺(tái)資深工程師,主要負(fù)責(zé)透射電鏡、雙束掃描電鏡及高壓冷凍等設(shè)備,在常規(guī)透射和掃描樣品制備、基于掃描電鏡三維重構(gòu)的樣品制備、高壓冷凍、金屬投影以及電鏡三維重構(gòu)數(shù)據(jù)處理等方面均積累了一定的經(jīng)驗(yàn)。

真空鍍膜是生命科學(xué)電鏡制樣中必不可少的技術(shù),比如鍍膜可以增加生物樣品的導(dǎo)電性,保證其在電鏡下更好的觀察;撈在載網(wǎng)上的超薄碳膜可以作為樣品的支撐,在負(fù)染、電子斷層成像和冷凍電鏡領(lǐng)域都有著廣泛的應(yīng)用;定向蒸鍍金屬可以獲得樣品高分辨率的“模型”,是金屬投影、電鏡復(fù)型技術(shù)的關(guān)鍵。

 

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劉軼群老師在網(wǎng)絡(luò)講堂中按照鍍膜方式的不同類別分別講訴了對(duì)應(yīng)的硬件結(jié)構(gòu)特點(diǎn),鍍膜影響因素,以及儀器的工作流程。
 

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冷凍斷裂復(fù)型和DNA小角度投影可視化鍍膜是生物樣品相對(duì)高級(jí)和復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)方法,劉軼群老師結(jié)合自己的操作經(jīng)驗(yàn)從實(shí)驗(yàn)原理和操作流程上做了詳細(xì)的講解。這兩種實(shí)驗(yàn)方法都會(huì)用到高真空鍍膜儀的電子束蒸發(fā)鍍膜部件,徠卡ACE600和ACE900高真空鍍膜儀都可以選配這種部件。
 

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DNA小角度投影可視化鍍膜實(shí)驗(yàn)方法,可以在常溫透射電鏡下清楚的觀察和區(qū)分ssDNA和dsDNA。要想成功完成這類實(shí)驗(yàn),需要注意DNA取樣和制備過程中的細(xì)節(jié)步驟,以及在鍍膜過程中設(shè)定合適的參數(shù)流程。劉老師通過實(shí)例圖片講解相關(guān)原理和實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)。
 

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劉軼群老師,對(duì)實(shí)驗(yàn)技術(shù)勤于鉆研,在透射電鏡、雙束掃描電鏡的操作應(yīng)用,還有常規(guī)和冷凍電鏡制樣技術(shù)都有廣泛涉獵,在北京大學(xué)生科院電鏡中心這樣的一流科研平臺(tái)有條件做到對(duì)各種實(shí)驗(yàn)技術(shù)的兼收并蓄。

對(duì)本次講座內(nèi)容感興趣的觀眾也可通過E-mail聯(lián)系劉軼群老師,郵箱地址是agroupofliu@pku.edu.cn,歡迎大家進(jìn)行生物電鏡制樣方面的技術(shù)交流!
課程回看請(qǐng)至:徠卡學(xué)院 - 課程回顧

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