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乙酰化修飾蛋白組學(xué)技術(shù)介紹及案例分享

瀏覽次數(shù):1559 發(fā)布日期:2021-11-24  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

蛋白質(zhì)乙;(Acetylation)是蛋白在乙酰基轉(zhuǎn)移酶(或非酶)的催化下,將乙;鶊F(tuán)轉(zhuǎn)移并添加在蛋白賴氨酸殘基或蛋白N端上的過(guò)程,在調(diào)控蛋白質(zhì)功能、染色質(zhì)結(jié)構(gòu)和基因表達(dá)中起重要作用。

乙;揎椫饕譃閮深(lèi):蛋白N端的乙酰化修飾和蛋白賴氨酸上的乙;揎棥端乙;揎棿蟛糠职l(fā)生在真核生物的蛋白上,由N乙酰轉(zhuǎn)移酶(NATs)催化;賴氨酸上的乙;揎検且粋(gè)可逆的過(guò)程,主要由賴氨酸乙;(KATs)和賴氨酸去乙;(KDACs)催化。
 

應(yīng)用方向

  • 乙;揎椗c細(xì)胞基因表達(dá)調(diào)控、表觀調(diào)控、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞代謝、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、蛋白質(zhì)穩(wěn)定性等生理過(guò)程研究;
  • 乙酰化引起的代謝疾病、代謝紊亂,腫瘤發(fā)生等疾病機(jī)理研究。

乙;飳W(xué)意義
  • 調(diào)節(jié)DNA-蛋白、蛋白-蛋白相互作用;
  • 與其他PTMs發(fā)生crosstalk;
  • 調(diào)節(jié)酶活性;
  • 調(diào)控蛋白亞細(xì)胞定位。

實(shí)驗(yàn)流程

定量乙;揎椊M學(xué)實(shí)驗(yàn)流程

技術(shù)參數(shù)


寄樣要求

  •  動(dòng)物及臨床組織標(biāo)本:200 mg/sample

           血清、血漿:500 uL/sample

           細(xì)胞﹑微生物:1× 108cells/sample

           植物嫩葉、嫩芽:10g/sample

           植物種子、果實(shí):10g/sample

  • 液氮或-80℃保存
  • 足量干冰運(yùn)輸,避免反復(fù)凍融

案例分享

Title(標(biāo)題):Fungal-induced protein hyperacetylation in maize identified by acetylome profiling

發(fā)表期刊:PNAS

影響因子:9.504

技術(shù)方法:iTRAQ、乙;揎椂康鞍捉M


研究?jī)?nèi)容
賴氨酸乙酰化是一種關(guān)鍵的翻譯后修飾,調(diào)節(jié)一系列生物過(guò)程中涉及的多種蛋白質(zhì)。已知編碼乙酰轉(zhuǎn)移酶的病原體效應(yīng)蛋白可以直接乙;拗鞯鞍讖亩淖兠庖哌^(guò)程。胭脂蟲(chóng)毒素(HCT),一種由真菌玉米圓斑病菌種1(C. carbonum race 1)產(chǎn)生的組蛋白去乙;敢种苿,可以增強(qiáng)病原體感染玉米植物的能力。

組蛋白乙;癄顟B(tài)的改變?cè)谒拗?病原體相互作用中起著核心作用。關(guān)于HCT如何實(shí)際促進(jìn)毒性的機(jī)理仍然未知。因此作者選擇hmlA玉米突變株作為研究對(duì)象,該突變株是編碼依賴NADPH的HC-毒素還原酶(HCTR)缺陷型,不能使HCT失活,表現(xiàn)出對(duì)C. carbonum race 1的易感。應(yīng)用iTRAQ標(biāo)記蛋白組和乙;揎椀鞍捉M技術(shù)研究玉米真菌誘導(dǎo)機(jī)制。

富集抗體
Anti-acetyl-lysine antibody(lmmuneChem-lCP0388)

技術(shù)路線

研究結(jié)果

發(fā)生乙酰化修飾的玉米蛋白


參考文獻(xiàn)下載鏈接

https://pan.baidu.com/s/1hbW_MxElgSSpaWoNpZ61qw
提取碼:srng

 
來(lái)源:上海百趣生物醫(yī)學(xué)科技有限公司
聯(lián)系電話:021-61531195
E-mail:chengyichun@biotree.cn

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