UHPLC-QTOF-MS非靶標(biāo)代謝組學(xué)的技術(shù)介紹與應(yīng)用

• 較高的靈敏度、分辨率
• 較寬的動(dòng)態(tài)范圍
• 適合于生物樣本中復(fù)雜代謝產(chǎn)物的檢測(cè)和潛在標(biāo)志物的鑒定
• 適合對(duì)標(biāo)本中未知代謝物的探索研究
• 定性準(zhǔn)：6D質(zhì)控體系

技術(shù)路線

技術(shù)參數(shù)
樣本要求
血清、血漿：200 μL/sample
尿液：1 mL/sample
組織：200 mg/sample
糞便、腸道內(nèi)容物：200 mg/sample
細(xì)胞、微生物：1X 10⁷ cells/sample
培養(yǎng)液：200 μL/sample

生物學(xué)重復(fù)
樣本數(shù)量：植物和微生物n≥6，動(dòng)物樣本n≥10，臨床樣本n≥30，所有重復(fù)樣本獨(dú)立分析
其他種類的樣品在收集之前請(qǐng)聯(lián)系我司銷售工程師

檢測(cè)平臺(tái)
UHPLC-QTOF-MS(Agilent 1290 UHPLC-Agilent 6550/SCIEX 6600)

常規(guī)項(xiàng)目周期
45個(gè)自然日，含基礎(chǔ)數(shù)據(jù)分析(從收到客戶預(yù)付款并收到樣品之日起）

應(yīng)用方向
• 表型和生理功能研究
• 疾病病理研究
• 臨床診斷及治療
• 藥物研究
• 中醫(yī)理論研究
• 食品科學(xué)與營(yíng)養(yǎng)學(xué)研究
• 畜牧與農(nóng)林業(yè)研究
• 環(huán)境毒理研究

案例分析
標(biāo)題：膳食膽固醇通過(guò)調(diào)節(jié)腸道微生物群和代謝物驅(qū)動(dòng)脂肪肝相關(guān)肝癌
研究對(duì)象: 小鼠
期刊: Gut
影響因子: 19.819
時(shí)間: 2020年

研究背景
非酒精性脂肪性肝�。∟AFLD)是全世界日趨普遍的慢性肝病。隨著肥胖和代謝綜合征在全球的流 行，近20年亞洲國(guó)家NAFLD增長(zhǎng)迅速，在上海、北京、廣州和香港等地區(qū)成人NAFLD患病率約在30％ 左右。NAFLD可進(jìn)展為非酒精性脂肪性肝炎, 進(jìn)而發(fā)展為肝硬化甚至肝癌。NAFLD相關(guān)肝癌的發(fā)病率在 過(guò)去10年增加了4倍，相應(yīng)的醫(yī)療保健費(fèi)用也在逐步增加。

研究結(jié)果
發(fā)現(xiàn)了長(zhǎng)期的高膽固醇飲食，會(huì)通過(guò)調(diào)節(jié)腸道菌群來(lái)誘導(dǎo)小鼠NAFLD-HCC形成和發(fā)展。膽固醇通過(guò)腸道菌群的變化使TCA升高、IPA降低，促進(jìn)脂質(zhì)積累和肝細(xì)胞增殖，從而導(dǎo)致NAFLD-HCC的發(fā)展。而通過(guò)降膽固醇治療，可以阻止高膽固醇飲食誘導(dǎo)的NAFLD-HCC。這意味著，調(diào)控膽固醇和腸道菌群及其相關(guān)代謝產(chǎn)物可能為以后預(yù)防NAFLD-HCC提供有效策略。

研究思路
 

結(jié)果展示
膳食膽固醇含量與血清代謝物有顯著差異(圖A)。膽酸生物合成是高膽飲食的小鼠改變的關(guān)鍵途徑(圖B)。在HFHC喂養(yǎng)的小鼠中，初級(jí)膽汁酸包括�；侨┠懰�(TCA)、�；侨┟撗跄懰�(TUDCA)、糖膽酸(GCA)和牛磺醛脫氧膽酸(TCDCA)等小鼠的代謝物異常上調(diào)(圖C)。在微生物色氨酸代謝中，3-惰基丙酸(IPA)是一種HFHC喂養(yǎng)的小鼠中異常下調(diào)的代謝物(圖C)。與HFLC喂養(yǎng)的小鼠相比，HFHC喂養(yǎng)的小鼠血清脂多糖(LPS)濃度升高，結(jié)腸e-鈣粘蛋白丟失(圖D)，表明膳食膽固醇可能損害腸道屏障功能。進(jìn)行了相關(guān)性分析，確定了HFHC改變的微生物和代謝物之間的潛在關(guān)聯(lián)(圖E)。
 

LC-MS非靶代謝組學(xué)分析血清代謝譜
 

參考文獻(xiàn)
Xiang Zhang, et al. Dietary cholesterol drives fatty liver- associated liver cancer by modulating gut microbiota and metabolites[J]. Gut ,2020.

有興趣采用UHPLC-QTOF-MS非靶標(biāo)代謝組學(xué)進(jìn)行樣本檢測(cè)分析的老師，歡迎垂詢服務(wù)熱線：400-664-9912