SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境設(shè)施常用消毒方法及應(yīng)用

SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境設(shè)施常用消毒方法及應(yīng)用

在實(shí)際生產(chǎn)運(yùn)行中，對(duì)SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境的病原微生物的控制要求較高，尤其是對(duì)特定病原微生物。SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物屏障環(huán)境建筑設(shè)計(jì)較為特殊，整個(gè)系統(tǒng)龐大而復(fù)雜，功能分區(qū)嚴(yán)格，在屏障內(nèi)長(zhǎng)期有活體實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和儀器設(shè)備，所以在對(duì)特定病原微生物控制時(shí)的消毒方法應(yīng)綜合考慮。

為了保證屏障工作正常運(yùn)轉(zhuǎn)，不僅要長(zhǎng)期為屏障內(nèi)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物提供適宜的濕度、溫度、照度、控制噪音等，還要長(zhǎng)期做好屏障消毒工作，定期對(duì)消毒效果進(jìn)行監(jiān)測(cè)，確保SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物屏障內(nèi)無(wú)特定病原微生物感染，否則會(huì)影響到整個(gè)屏障實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物屏障消毒常見(jiàn)方法為機(jī)械性清除、物理消毒法和化學(xué)消毒法。

機(jī)械性清除是用機(jī)械的方法清掃、洗刷、通風(fēng)等清除病原體，是最普通和常用的方法。在SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物屏障環(huán)境病原微生物控制上，機(jī)械性清除是控制病原微生物最基本的要求。但機(jī)械性清除法不能徹底對(duì)SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物屏障環(huán)境病原微生物進(jìn)行清除，但可減少病原微生物在屏障內(nèi)的數(shù)量，屬于輔助性消毒。

物理消毒是指利用物理因素殺滅或消除病原微生物及其他有害微生物的方法。SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物屏障環(huán)境因自身?xiàng)l件要求限制，主要選用脈動(dòng)真空高壓蒸汽滅菌、紫外燈照射殺菌、鈷-60輻照3種滅菌物理消毒方法。

化學(xué)消毒是指用化學(xué)消毒藥物作用于微生物和病原體，使其蛋白質(zhì)變性，失去正常功能而si亡�；瘜W(xué)消毒是 SPF 級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物屏障最常用的消毒方法，化學(xué)消毒使用的化學(xué)藥品溶液為消毒劑。消毒劑的使用方式包括噴灑、浸泡、擦拭、熏蒸等。目前，SPF 級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物屏障常用的有氧化消毒劑、碘類消毒劑、醛類消毒劑、酚類消毒劑、醇類消毒劑、季胺類消毒劑、鹵素消毒劑等。

消毒效果比較研究 

01不同消毒方式的效果比較

通過(guò)對(duì)多種消毒方式進(jìn)行比較研究，選取不同測(cè)定時(shí)間點(diǎn) (消毒前及消毒后的30min、2h、6 h、24 h、48 h、72 h)，檢查消毒完成前后實(shí)驗(yàn)室的沉降菌最大平均濃度，比較各消毒方式最佳效果和持續(xù)時(shí)間;通過(guò)消毒劑在特定條件下對(duì)綠膿桿菌、金黃色葡萄球菌進(jìn)行殺滅實(shí)驗(yàn)， 比較消毒劑的殺菌率以及各種消毒方式的優(yōu)缺點(diǎn)。

結(jié)果如表1、表2所示用甲醛的消毒方式效果最好; 臭氧、過(guò)氧乙酸最佳消毒效果持續(xù)時(shí)間保持在 48 h 內(nèi); 消毒泡騰片及 84消毒液最佳消毒效果持續(xù)時(shí)間保持在 24 h內(nèi);新潔爾滅消毒后沉降菌最大平均濃度未符合相關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，且沉降菌最大平均濃度增長(zhǎng)速度較快。各消毒劑對(duì)兩種實(shí)驗(yàn)菌株的殺菌率均在99%以上，但新潔爾滅對(duì)綠膿桿菌殺菌效果差1。


02不同區(qū)域的殺菌消毒劑濃度

對(duì)SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)器具(飼養(yǎng)盒、飲水瓶)浸泡消毒，有研究結(jié)果表明：采用0.1％的碘伏作用30min以上或0.05％的碘伏作用45min以上；2％的強(qiáng)化戊二醛作用5min以上或0.5％的強(qiáng)化戊二醛作用30min以上；華威一號(hào)有效含量達(dá)200mg/L作用20min以上，100mg/L或50mg/L作用45min以上；0.4％的過(guò)氧乙酸作用10min以上，0.2％的過(guò)氧乙酸作用20min以上或0.1％的過(guò)氧乙酸作用45min以上，可以達(dá)到99.9％殺菌率。

對(duì)SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施屏障系統(tǒng)內(nèi)墻面、籠面及空氣進(jìn)行噴霧消毒處理研究發(fā)現(xiàn)：濃度為2％的強(qiáng)化戊二醛、有效含量為250mg/L的華威一號(hào)、2％的過(guò)氧乙酸效果比較好。

對(duì)SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施屏障系統(tǒng)內(nèi)墻面、籠面進(jìn)行擦拭消毒，0.5％、1％、1.5％、2％的戊二醛都能維持99.9％殺菌率2天；采用125mg/L、250mg/L、500mg/L的華威一號(hào)對(duì)SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施屏障系統(tǒng)內(nèi)墻面、籠面進(jìn)行擦拭消毒，可以維持墻面和籠具99.9％以上的殺菌率1天，50mg/L的華威一號(hào)只能維持墻面99.9％以上的殺菌率1天。

采用0.25％和0.5％的碘伏對(duì)SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施屏障系統(tǒng)內(nèi)墻面、籠面進(jìn)行擦拭消毒，均可以維持99.9％的殺菌率達(dá)5天，0.1％的碘伏可以維持99.9％的殺菌率3天，0.05％的碘伏可以維持99.9％以上的殺菌率2天。

采用過(guò)氧乙酸對(duì)SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施屏障系統(tǒng)內(nèi)墻面、籠面進(jìn)行擦拭消毒，在第2，3，5天的殺菌效果都很好，0.125％的過(guò)氧乙酸即可維持99.99％的殺菌率5天。

上述結(jié)果說(shuō)明四種消毒劑都適用于對(duì)SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)器具(飼養(yǎng)盒、飲水瓶)浸泡消毒，最適用0.1％的碘伏、2％的強(qiáng)化戊二醛、200mg/L的華威一號(hào)、0.4％的過(guò)氧乙酸。由于強(qiáng)化戊二醛對(duì)不銹鋼無(wú)腐蝕性，所以強(qiáng)化戊二醛最適用于對(duì)SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物不銹鋼籠具的浸泡消毒，對(duì)于飼養(yǎng)盒、飲水瓶等非金屬物品的浸泡消毒，則四種消毒劑都適用2。

采用空氣落下菌檢測(cè)法和表面細(xì)菌拭子檢測(cè)法，對(duì)過(guò)氧化氫和甲醛熏蒸SPF級(jí)大鼠和小鼠繁殖室的消毒效果進(jìn)行檢測(cè)觀察。過(guò)氧化氫和甲醛對(duì)大鼠繁殖室和小鼠繁殖室空氣的殺菌率分別為100%、97.5%和100%、100%;將墻壁、地面和籠架表面的菌落數(shù)進(jìn)行檢測(cè)，過(guò)氧化氫和甲醛對(duì)大鼠繁殖室墻壁、地面和籠架的殺菌率分別為100%、99%、100%和95%、100%、99%，對(duì)小鼠繁殖室墻壁、地面和籠架的殺菌率均為100%。過(guò)氧化氫蒸汽消毒是比較理想的消毒方法，很好地控制了SPF級(jí)大鼠和小鼠繁殖室環(huán)境微生物，安全性高且消毒效果明顯3。

過(guò)氧乙酸在較低濃度、較短時(shí)間內(nèi)即可達(dá)到良好消毒效果，可用于擦拭、浸泡和噴霧消毒。

03其他相關(guān)研究

有研究報(bào)道，0.3%~0.5%過(guò)氧乙酸5 min內(nèi)即 可對(duì)大多數(shù)測(cè)試菌如沙門氏菌、布魯氏菌、假單胞菌、金黃色葡萄球菌等起到良好殺滅效果，0.25%過(guò)氧乙酸1 min內(nèi)即可對(duì)白色念珠菌達(dá)到良好殺滅效果。

余思義4使用過(guò)氧乙酸消毒液對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)器具進(jìn)行浸泡消毒，結(jié)果顯示，0.4%過(guò)氧乙酸作用10 min、0.2%過(guò)氧乙酸作用20 min，均可達(dá)到99.9%的殺菌率；使用0.125%過(guò)氧乙酸對(duì)屏障設(shè)施墻面、籠架進(jìn)行擦拭消毒，可維持99.9%的殺菌率5 d，且濃度越高，殺菌效果越好。劉建高等5使用0.2%過(guò)氧乙酸按8 mL/m3的用量對(duì)現(xiàn)場(chǎng)空氣噴霧消毒作用30 min，殺菌率可達(dá)95.52%~99.36%。

尹進(jìn)等6報(bào)道了二元包裝的過(guò)氧乙酸消毒液的殺菌效果，結(jié)果顯示 0.1%的該消毒液按照 10 mL/m3的用量對(duì)現(xiàn)場(chǎng)噴霧消毒，作用30 min，其對(duì)空氣自然菌殺菌率 90%以上；懸液定量殺菌結(jié)果顯示 0.01%的該消毒液對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌作用5 min，殺菌對(duì)數(shù)值均大于5; 使用0.1%的該消毒液對(duì)枯草芽孢桿菌作用30 min，殺菌對(duì)數(shù)大于5。

鄭吟秋等7芽孢懸液浸泡試驗(yàn)結(jié)果顯示，0.2%過(guò)氧乙酸對(duì)枯草桿菌黑色變種芽孢作用10min，可完全將其殺滅。綜上，在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物屏障設(shè)施中，建議 0.1% ~0.5%過(guò)氧乙酸用于耐腐蝕的物品、設(shè)施設(shè)備表面噴霧、擦拭或浸泡消毒；0.2%~0.5%過(guò)氧乙酸按8~12 mL/m3的用量用于屏障設(shè)施的空氣噴霧消毒，每周3~5 次。

04消毒方法及存在的問(wèn)題

SPF 級(jí)別的動(dòng)物房由于其特殊的結(jié)構(gòu)和組成，對(duì)環(huán)境空間消毒的要求是相對(duì)較高的，傳統(tǒng)的臭氧，紫外線其消毒級(jí)別比較低，不能滿足高水平消毒的需求，甲醛、過(guò)氧乙酸存在毒性和腐蝕性問(wèn)題。目前， 過(guò)氧化氫消毒方式，其安全性，環(huán)保型，及消毒效果解決了其他消毒方式遺留的問(wèn)題。
過(guò)氧化氫消毒液產(chǎn)品能夠具備：
高效殺菌
沒(méi)有有害殘留
作用持久
對(duì)人體無(wú)害，無(wú)毒
對(duì)環(huán)境無(wú)害且無(wú)二次污染
無(wú)腐蝕性
無(wú)耐藥性
使用簡(jiǎn)單，且不會(huì)帶來(lái)異味，沒(méi)有刺激性
諾福過(guò)氧化氫消毒液，消毒殺菌技術(shù)具備上述的優(yōu)點(diǎn)，使得它可以 成為一種既能用于手部消毒，又能用于器械殺菌，既能完成空間環(huán)境消毒又能解決管道生物膜的多功能復(fù)合型消毒產(chǎn)品。能夠殺滅200多種有害微生物，同時(shí)擁有大量國(guó)內(nèi)外權(quán)威機(jī)構(gòu)的檢測(cè)認(rèn)證報(bào)告。能夠?qū)�黑枯草芽孢達(dá)到10的6次方的殺滅效果，可以將懸浮在空間中的10的6次方生物指示劑的嗜熱脂肪桿菌芽孢有效的殺滅；能夠殺滅包括革蘭氏菌、真菌、霉菌、支原體、病毒、超級(jí)細(xì)菌等在內(nèi)的200多種微生，包括鮑曼不動(dòng)桿菌、MRSA 、MREA、艱難梭菌等常見(jiàn)的耐藥菌種。


總結(jié)

SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物屏障實(shí)際生產(chǎn)的消毒方法應(yīng)用中，理想的消毒方法應(yīng)要求對(duì)安全、高效、穩(wěn)定、低價(jià)位等特點(diǎn)進(jìn)行綜合考慮。例如物理消毒應(yīng)該考慮被消毒物品的物理性能；在化學(xué)消毒法中選擇消毒劑時(shí)，因消毒劑品種不同，對(duì)病原微生物作用也不同，應(yīng)根據(jù)具體情況進(jìn)行綜合比較后做出適當(dāng)?shù)倪x擇；同時(shí)還要考慮到化學(xué)消毒劑的理化因素，如溫度、濕度、酸堿度、有機(jī)物、化學(xué)拮抗或中和作用，消毒劑的濃度變化等都會(huì)影響消毒效果，在消毒劑使用時(shí)也應(yīng)考慮外部因素對(duì)其消毒效果的影響。在屏障實(shí)際生產(chǎn)運(yùn)行過(guò)程中，往往采用多種消毒方法才能達(dá)到徹底消毒的效果。