凝膠法細菌內(nèi)毒素檢查干擾消除的物理方法

一、加熱滅活

對由于蛋白質(zhì)或酶的修飾而表現(xiàn)的抑制作用或?qū)е瞒c試劑變化的藥物本身是蛋白酶類，可通過加熱滅活處理來消除干擾，或使用超過濾薄膜法去除。如將血漿1：10稀釋，70 ~80℃加熱5 min可破壞血漿蛋白酶抑制物，而且內(nèi)毒素沒有明顯的損失，另外還可將血清樣品在沸水中加熱2~3 min再稀釋至少10倍。
 

二、樣品稀釋
王欣放等^[1]采用不同廠家的鱟試劑對不同廠家的3批注射用對氨基水楊酸鈉分別進行干擾試驗。結果，將樣品稀釋至7.5 mg/ml以下時可消除干擾作用，使用靈敏度為0.125 EU/ml的鱟試劑進行細菌內(nèi)毒素檢查時結果均符合規(guī)定。

王超華等^[2]對大蒜注射液細菌內(nèi)毒素檢查法的結果表明，將供試品10倍稀釋后可消除干擾。

吳文飛^[3]對3種無菌沖洗劑細菌內(nèi)毒素的檢查方法進行了探討，其中硫酸新霉素滅菌溶液在pH 3.2~3.8時，4倍稀釋后無干擾。

應注意，有些樣品如碳酸氫鈉注射液因堿性較強且主要成分碳酸氫鈉含量較高，因此單純稀釋是不能排除干擾的，必須經(jīng)過調(diào)節(jié)藥品的pH處理后再稀釋，才能排除干擾^[4]。
 

三、容器材質(zhì)選用
內(nèi)毒素稀釋管應該是高質(zhì)量硼硅酸鹽玻璃材質(zhì)，以避免內(nèi)毒素吸附于試管壁。不可使用塑料用具，因其伴隨很多未知的干擾因素。同時避免使用聚丙烯試管，因為由聚丙烯材料制成的窗口對內(nèi)毒素的吸附也被公認為是干擾內(nèi)毒素檢查方法的因素之一。因此，任何聚丙烯材料的試驗器材不可用于試驗中，但有實驗證明由聚丙烯材料制成的加樣頭，與實驗溶液的短暫接觸對內(nèi)毒素的回收沒有影響。

參考文獻：
[1] 王欣放.注射用對氨基水楊酸鈉的細菌內(nèi)毒素檢查方法[J]．中國藥業(yè),2008,17(6):38-39
[2] 王超華.大蒜注射液細菌內(nèi)毒素檢查法的探討[J]．西北藥學雜志，2007,22 (2):75
[3] 吳文飛.3種無菌沖洗劑細菌內(nèi)毒索檢查方法初探[J].中國藥房,2007,18 (16)；1262-1264
[4] 徐富墻,李萬玉,趙語.碳酸氫鈉注射液進行細菌內(nèi)毒索檢查的研究[J].中國藥房,2000,ll(2)：65-67

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本文節(jié)選自：《凝膠法細菌內(nèi)毒素檢查的干擾因素及消除》，文章作者：何進。如有侵權，請聯(lián)系刪除，謝謝！