肌酐 (Cr) 苦味酸法測定試劑盒使用說明書

肌酐 (Cr) 苦味酸法測定試劑盒說明書
分光光度法 50 管/48 樣

 
注   意：正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義：
肌酐是在肌肉中從磷酸肌酸通過自發(fā)和不可逆轉(zhuǎn)化而形成的，除非肌肉質(zhì)量有大的變化，通常情況所形成的肌酐量是相當恒定的。游離肌酐的循環(huán)量完全依賴于它的排泄速度，從而測定尿液，血清或血漿中的肌酐量，可用于腎功能檢查。肌酐含量的增高常見于:慢性腎衰竭時排泄量的減少及肢端肥大癥。
 
測定原理：
肌酐與過量苦味酸在堿性條件下反應生成橙紅色苦味酸肌酐。在波長 490 nm 處有最大吸收峰，在一定的時間內(nèi)測定該復合物，即可計算出樣本中肌酐的含量，并可避免干擾。
 
肌酐+堿性苦味酸————肌酐苦味酸復合物
 
自備儀器和用品：
可見分光光度計、普通離心機，超速離心機、可調(diào)式移液槍、1mL 玻璃比色皿和蒸餾水。
 
試劑組成和配制：
試劑一：液體×1 瓶，4℃保存，臨用前過濾。試劑二：液體×1 瓶，4℃保存。
試劑三：10x 標準液×1 瓶，4℃保存，臨用前，蒸餾時 10 倍稀釋，終濃度為 0. 1 mg/ml。
*工作液：試劑二：試劑一 = 1：10, 臨用前配置
 
樣本收集：
1. 血清，血漿，血清或血漿中的肌酐在 2-8℃下可保存 24 小時。
2. 尿液:試驗前將新鮮尿液用蒸餾水作 1/50 稀釋，測定結(jié)果乘以 50。

測定操作：
1. 分光光度計預熱 30 min，調(diào)節(jié)波長到 490 nm，蒸餾水調(diào)零。
2，按下表添加樣本試劑，充分混勻，置 37℃水浴 30 秒鐘后，選擇波長 490nm，以空白管校零點讀取起始吸光度(A1)，90 秒鐘后讀取終末吸光度(A2)
備注:可根據(jù)使用儀器的不同，恒比例改變試劑與樣本的量。注意：空白管只需要做一次。

試劑名稱（μL）	樣本管	空白管	標準管
樣本	100
試劑三 1x			100
蒸餾水		100
工作液	1000	1000	1000

計算公式：
樣本管吸光度 A2 一樣本管吸光度 Al
肌酐(umol/L)= X 標準液濃度