鱟試驗(yàn)法中的干擾因素與解決方法介紹

由鱟試驗(yàn)的反應(yīng)機(jī)理我們可以知道：內(nèi)毒素在二價(jià)陽離子參與下，作用凝集酶系統(tǒng)而發(fā)生一系列生化反應(yīng)，最后形成凝膠。因此，一切阻礙反應(yīng)機(jī)制的因素，均干擾凝膠的形成，形成假陰性結(jié)果，作為干擾凝集反應(yīng)的物質(zhì)主要有：人血中的多種凝血因子、很多中藥成分、某些生化藥品、抗生素、可使蛋白質(zhì)變性的物質(zhì)、高糖溶液、絡(luò)合物等等，此外樣品的pH值，反應(yīng)溫度等也都有一定的影響（表2）。
 

另外一些金屬離子（如 Fe、Al、Ca）會(huì)對(duì)細(xì)菌內(nèi)毒素活性產(chǎn)生影響，從而出現(xiàn)假陰性結(jié)果，因此在實(shí)驗(yàn)時(shí)，避免使用一些金屬用具，而使用玻璃用具。

關(guān)于供試品中自身成分的影響，可以說是鱟試驗(yàn)中影響因素最大的，作為供試品，既有對(duì)LAL或TAL試劑的活性產(chǎn)生影響的因素，也有對(duì)細(xì)菌內(nèi)毒素的活性產(chǎn)生影響因素，因此在實(shí)際測定時(shí)要引起注意。

（1）供試品對(duì)鱟試劑的活性產(chǎn)生影響的因素為：蛋白酶、蛋白酶抑制作用，螯合劑、蛋白變性劑等。

（2）供試品對(duì)細(xì)菌內(nèi)毒素的活性產(chǎn)生影響的因素：金屬離子（鐵、鋁、鍺等），表面活性劑等。

（3）對(duì)主反應(yīng)以外的測定系統(tǒng)產(chǎn)生影響的場合：濁度、顏色、磺胺制劑（合成基質(zhì)化的偶氮化反應(yīng)時(shí)）等。
 

在這些共存物質(zhì)的影響當(dāng)中，特別要引起注意的是些外界金屬離子的影響，尤其是在舊菌內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)品的溶解及稀釋過程中一定特別注意金屬離子的混入，最好的方法是使用玻璃制備的蓋子。

對(duì)于大多數(shù)的注射劑一般在原液時(shí)均存在干擾作用，然而當(dāng)把樣品用水進(jìn)行稀釋后即可排除干擾，而對(duì)于稀釋法不能排除干擾的樣品，可考慮用其他方法給予解決。如：中和法、過濾法以及透析方法等，目前市場上見到鱟試劑主要為TAL試劑和LAL試劑。因?yàn)楣に嚥煌�，抗干擾能力的強(qiáng)弱不一，因此對(duì)同一樣品、使用不同廠家的LAL試劑所出現(xiàn)的最大無干擾濃度是不同的，這一點(diǎn)要引起注意。另外，TAL試劑和LAL試劑是否完全等活性關(guān)系還有待進(jìn)一步研究和探討。