多領(lǐng)域百花齊放！
隨著IsoPlexis的產(chǎn)品獲得越來(lái)越多科研工作者的認(rèn)可，使用IsoPlexis功能蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)發(fā)表的文獻(xiàn)數(shù)量也呈現(xiàn)明顯上升趨勢(shì)，包括Nature、Cell、Immunology、Gastroentrology等頂級(jí)期刊。接下來(lái)，讓小編帶大家回顧一下10月使用IsoPlexis功能蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)的文獻(xiàn)精選，涵蓋了細(xì)胞治療、器官移植多個(gè)領(lǐng)域。
01
文獻(xiàn)一
單細(xì)胞分析揭示了針對(duì)實(shí)體瘤的細(xì)胞治療產(chǎn)品多功能性的增加
發(fā)表期刊：
《Cancer Immunology Research》
影響因子12.02
隨著新的CAR-T細(xì)胞的研發(fā)，研究人員必須對(duì)這些細(xì)胞的功能進(jìn)行定性和評(píng)估，以更好地了解它們的工作原理。細(xì)胞產(chǎn)品是異質(zhì)的，在單細(xì)胞水平上評(píng)估生物功能是至關(guān)重要的，因?yàn)槿航M水品的分析是平均的群體特征，可能會(huì)錯(cuò)過(guò)單個(gè)細(xì)胞中的關(guān)鍵功能指標(biāo)。IsoPlexis的單細(xì)胞分泌組解決方案為研究人員提供了一個(gè)進(jìn)行單細(xì)胞細(xì)胞因子分析的自動(dòng)化平臺(tái)，使他們能夠輕松地對(duì)細(xì)胞進(jìn)行功能表型，并對(duì)效力和持久性的關(guān)鍵生物標(biāo)志物進(jìn)行表征。
最近發(fā)表在《Cancer immunology research》上的一篇論文描述了為克服腫瘤微環(huán)境(TME)免疫抑制而設(shè)計(jì)的CAR-T細(xì)胞的特征。研究人員試圖通過(guò)靶向Fas信號(hào)來(lái)防止TME中的T細(xì)胞功效喪失。通常情況下，作為對(duì)免疫激活的負(fù)反饋循環(huán)的一部分，F(xiàn)as信號(hào)作用于調(diào)節(jié)T細(xì)胞的擴(kuò)增和削弱免疫功能。實(shí)體瘤細(xì)胞可以通過(guò)表達(dá)Fas配體（FasL）與T細(xì)胞上的Fas受體結(jié)合并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，或細(xì)胞死亡。FasL的表達(dá)已在各種實(shí)體瘤中被檢測(cè)到，并被證明與疾病的進(jìn)展、疾病嚴(yán)重程度和糟糕的治療結(jié)果有關(guān)。
為了保護(hù)效應(yīng)T細(xì)胞免受Fas信號(hào)通路的激活，研究人員設(shè)計(jì)了CAR-T細(xì)胞，當(dāng)T細(xì)胞與特定抗原接觸時(shí)，可以分泌Fas誘餌分子，從而防止Fas與FasL的相互作用。為了針對(duì)實(shí)體瘤，CAR-T細(xì)胞被設(shè)計(jì)為靶向一種由多種實(shí)體瘤表達(dá)的抗原——前列腺干細(xì)胞抗原（PSCA）。研究人員證實(shí)，PSCA刺激導(dǎo)致CAR-T細(xì)胞分泌Fas誘餌分子，這種分泌使CAR-T細(xì)胞免受Fas信號(hào)啟動(dòng)的影響。
接下來(lái)，研究人員想了解這種修飾如何影響細(xì)胞功能。利用IsoPlexis的單細(xì)胞分泌組平臺(tái)，他們?cè)u(píng)估了細(xì)胞的多功能性，即細(xì)胞分泌兩種或多種細(xì)胞因子的能力。用表達(dá)FasL的胰腺癌細(xì)胞刺激被修飾為分泌Fas誘餌（CAR.FD）的CAR-T細(xì)胞。與對(duì)照組的CAR-T細(xì)胞相比，CAR.FD細(xì)胞有更高比例的多功能細(xì)胞，一些細(xì)胞表達(dá)多達(dá)7種不同的細(xì)胞因子，而對(duì)照組細(xì)胞最多只表達(dá)4種細(xì)胞因子。
因?yàn)榧?xì)胞的多功能性與改善細(xì)胞治療產(chǎn)品效力、療效和臨床結(jié)果有關(guān)，在CAR.FD細(xì)胞中觀察到的多功能性的增加是一個(gè)重要的效能指標(biāo)，可以指導(dǎo)進(jìn)一步的研究。隨后的體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)顯示，與對(duì)照組CAR-T細(xì)胞相比，表達(dá)Fas誘餌的CAR-T細(xì)胞能更有效地控制腫瘤生長(zhǎng)。
02
文獻(xiàn)二
單細(xì)胞功能分析外周血T細(xì)胞活性揭示器官
排斥的機(jī)制
發(fā)表期刊：
《Journal of the American Society of Nephrology》
影響因子：14.98
器官移植可以提高和延長(zhǎng)受者的壽命，移植的過(guò)程常會(huì)伴隨移植排斥；提高對(duì)移植組織和免疫系統(tǒng)之間的相互作用的認(rèn)識(shí)，可以改善結(jié)果，降低排斥率。由于高達(dá)40%的腎臟移植在移植后10年內(nèi)失敗，研究人員正在尋找方法來(lái)審視排斥反應(yīng)的機(jī)制，并改善腎臟移植者的移植后護(hù)理。鑒于免疫細(xì)胞及其功能的多樣性，免疫反應(yīng)是復(fù)雜的，細(xì)胞研究中的很多分析技術(shù)表征的是平均水平的信號(hào)，如細(xì)胞因子分泌水平或蛋白質(zhì)表達(dá)水平的群組檢測(cè)，這些結(jié)果將錯(cuò)過(guò)由于細(xì)胞異質(zhì)性造成的關(guān)鍵的功能差異。單細(xì)胞分析讓研究人員更好地了解每個(gè)細(xì)胞如何對(duì)免疫反應(yīng)做出貢獻(xiàn)，從而更深入地了解免疫功能。通過(guò)測(cè)量每個(gè)細(xì)胞的多達(dá)32種功能蛋白，IsoPlexis的單細(xì)胞分泌組平臺(tái)提供了對(duì)免疫細(xì)胞進(jìn)行功能表型的能力，并審視免疫反應(yīng)的分子機(jī)制。
在最近發(fā)表于《Journal of the American Society of Nephrology》的一篇論文中，研究人員試圖確定可能導(dǎo)致腎臟移植體液排斥的免疫因素。被稱為終末分化效應(yīng)記憶細(xì)胞或TEMRA細(xì)胞的CD8+記憶T細(xì)胞亞群，先前已被證明在其他類型的免疫相關(guān)疾病中具有致病性，包括狼瘡、硬皮病和腎臟移植失敗。研究人員使用了多種技術(shù)來(lái)研究CD8+記憶T細(xì)胞如何促進(jìn)體液排斥。
為了描述CD8+T細(xì)胞的功能，研究人員使用IsoPlexis的單細(xì)胞分泌組平臺(tái)，測(cè)量從有體液排斥和無(wú)體液排斥的腎移植受者血液中分離出來(lái)的細(xì)胞的分泌功能蛋白。與正常活檢的受者相比，有體液排斥的受者的CD8+T細(xì)胞在CD3/CD28刺激后有明顯表現(xiàn)出更強(qiáng)多功能性，即更多細(xì)胞能夠分泌2種或更多細(xì)胞因子。多功能細(xì)胞此前已被確定為免疫反應(yīng)的驅(qū)動(dòng)因素，表明了排斥的一個(gè)可能機(jī)制。
作者進(jìn)一步分析了受刺激的CD8+T細(xì)胞的細(xì)胞因子分泌物，發(fā)現(xiàn)有體液排斥反應(yīng)的受者的促炎癥（IFN-γ、TNF-α、MIP-1α和MIP-1β）和細(xì)胞毒性（顆粒酶B和穿孔素）細(xì)胞因子增加。這些細(xì)胞因子亞群的綜合增加使研究人員相信，TEMRA CD8+ T細(xì)胞對(duì)免疫反應(yīng)有貢獻(xiàn)，這可能表明TEMRA CD8+ T細(xì)胞失調(diào)可能導(dǎo)致體液排斥。
其他實(shí)驗(yàn)顯示，與其他T細(xì)胞亞群相比，來(lái)自體液排斥樣本的TEMRA CD8+ T細(xì)胞具有更強(qiáng)的細(xì)胞毒性和遷移活性，這使研究人員得出結(jié)論，TEMRA CD8+ T細(xì)胞在體液排斥中發(fā)揮著積極作用。這些發(fā)現(xiàn)具有治療意義，有助于降低腎臟移植受者的排斥率。
利用單細(xì)胞分析來(lái)確定免疫反應(yīng)的驅(qū)動(dòng)因素的意義表征移植中單個(gè)免疫細(xì)胞的功能，有助于改善臨床結(jié)果，降低排斥反應(yīng)率，并改善移植后的治療。通過(guò)使用單細(xì)胞功能分析來(lái)確定關(guān)鍵的功能指標(biāo)，包括細(xì)胞多功能性和多功能指數(shù)PSI，研究人員可以更好地了解單個(gè)免疫細(xì)胞如何協(xié)調(diào)免疫反應(yīng)的工作。這項(xiàng)研究證明了細(xì)胞多功能性如何被用作外周T細(xì)胞功能的潛在非侵入性評(píng)估，顯著分離出有和沒(méi)有排斥反應(yīng)的腎移植受者。IsoPlexis的單細(xì)胞功能表型為研究人員提供了一個(gè)強(qiáng)大的工具，以調(diào)查單個(gè)免疫細(xì)胞的功能，并揭示關(guān)鍵的功能驅(qū)動(dòng)因素，提供獨(dú)特的、可操作的見(jiàn)解，以推動(dòng)新發(fā)現(xiàn)和改進(jìn)療法的開(kāi)發(fā)。
參考文獻(xiàn)：
1. Bajgain P, et al. Secreted Fas decoys enhance the antitumor activity of engineered and bystander T cells in Fas ligand–expressing solid tumors. Cancer Immunol Res. 2022.
2. Ngoc TD, et al. Effector Memory–Expressing CD45RA (TEMRA) CD8+ T Cells from Kidney Transplant Recipients Exhibit Enhanced Purinergic P2X4 Receptor–Dependent Proinflammatory and Migratory Responses. J Am Soc Nephrol. 2022.
3. Amit M, et al. Distinct immune signature predicts progression of vestibular schwannoma and unveils a possible viral etiology. J Exp Clin Cancer Res. 2022.
