紅細胞滲透脆性檢測試劑盒(比色法)使用說明書

 
產(chǎn)品簡介：
紅細胞(Red blood cell，RBC)也稱紅血球，是血液中數(shù)量最多的一種血細胞，脊椎動物體內(nèi)通過RBC運送氧氣，RBC同時還具有免疫功能，在貧血檢查中可通過紅細胞滲透脆性試驗來檢測紅細胞膜的缺陷。
雅吉生物紅細胞孵育滲透脆性檢測試劑盒(比色法)(Erythrocyte Incubated OsmoticFragility Assay Kit)檢測原理是將患者血液置于37℃孵育24h，使紅細胞代謝繼續(xù)進行，由于葡萄糖的消耗，儲備的ATP減少，導致需要能量的紅細胞膜對陽離子的主動傳遞受阻，造成鈉離子在紅細胞內(nèi)聚集，細胞膨脹，孵育滲透脆性增加，某些有細胞膜缺陷以及某些酶缺陷的紅細胞的葡萄糖和ATP很快被耗盡時，孵育滲透脆性明顯增加，該實驗被稱為紅細胞孵育滲透脆性試驗，主要用于檢測人、動物血液的紅細胞孵育滲透脆性，并計算紅細胞中性脆性(MCF)。 該試劑盒僅用于科研領域，不適用于臨床診斷或其他用途。
 
產(chǎn)品組成：

名稱	50T	Storage
試劑(A):NaCl Phosphate Buffer	100ml	4℃
試劑(B):ddH2O	100ml	RT

 
自備材料：
1、小試管
2、分光光度計
3、比色杯
 
操作步驟(僅供參考)：
1、取肝素抗凝血2ml ,分成2份，1份立即實驗，另1份密閉37C孵育24h后再作實驗。
2、取小試管或恰當容器，依次編號,按照下表稀釋成不同濃度。每次檢查應設正常對照。
 

試管號	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11	12	13
試劑A（ml）	3.4	3.0	2.8	2.6	2.4	2.2	2.0	1.8	1.6	1.4	1.2	0.8	0.4
試劑B（ml）	0.6	1	1.2	1.4	1.6	1.8	2.0	2.2	2.4	2.6	2.8	3.2	3.6
NACL濃度(g/L)	8.5	7.5	7.0	6.5	6.0	5.5	5.0	4.5	4.0	3.5	3.0	2.0	1.0

 
3、分別吸取40μl肝素抗凝血加入上述NaCI稀釋液中輕輕混勻,室溫(20°C)靜置30min。
4、將各管再次混勻1次，離心沉淀5min，取上清液。
5、用分光光度計檢測540nm波長，以NaCI Phosphate Buffer 作為空白管調(diào)零，測定
各溶血管的吸光度。
6、計算溶血百分率∶以1g/L NaCl完全溶血管的吸光度為100%，計算相應氯化鈉濃度
的溶血百分率。溶血百分率(%)=各管吸光值/100%溶血管吸光值×100。
7、計算紅細胞中性脆性(MCF)∶以溶血百分率為縱坐標，以氯化鈉濃度為橫坐標，作溶血
曲線圖，即為紅細胞鹽水滲透脆性曲線。在曲線上，50%溶血的氯化鈉濃度為紅細胞中性脆性(MCF)。
 
參考區(qū)間︰

未孵育，50%溶血氯化鈉濃度	4.00~4.45g/L
37℃孵育24H，50%溶血氯化鈉濃度	4.46~5.9g/L

 
注意事項:
1、每次檢查應設正常對照。
2、NaCl Phosphate Buffer pH值及溫度必須恒定，pH改變0.1或溫度改變5%，均可
使結果偏差0.01%。
3、NaCl Phosphate Buffer采用高純度氯化鈉配制，普通氯化鈉不宜采用。
4、NaCl Phosphate Buffer不要被酸堿污染，同時注意密閉保存。
5、血液樣品應直接滴入液體，不宜沿管壁流入。
6、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
 
有效期∶12個月有效，4℃保存。