流動(dòng)下條件下活細(xì)胞實(shí)時(shí)成像設(shè)置詳解

活細(xì)胞成像是在流動(dòng)條件下細(xì)胞培養(yǎng)分析的一種可能的體現(xiàn)。

根據(jù)實(shí)驗(yàn)的持續(xù)時(shí)間和溫度要求，有幾種可能的設(shè)置具有不同的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)，本說(shuō)明中顯示和討論了這些設(shè)置。

1. 無(wú)需培養(yǎng)箱即可設(shè)置

設(shè)備：

• 放置在顯微鏡旁邊的 ibidi 泵系統(tǒng)

• 倒置顯微鏡

優(yōu)點(diǎn)：

• 沿灌流管的均勻介質(zhì)溫度。

• 氣泡產(chǎn)生的可能性低。

• 在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)非常穩(wěn)定。

• 成本極低且易于操作。

缺點(diǎn)：

• 細(xì)胞處于室溫。

• 沒(méi)有向細(xì)胞培養(yǎng)基供應(yīng) CO2（碳酸鹽緩沖液不起作用）。

適合：

• 可以在室溫下培養(yǎng)的細(xì)胞或生物。

• 沒(méi)有細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)。

• 如果細(xì)胞耐受溫度下降，則可能用于短期成像。

2. 設(shè)置載物臺(tái)頂部培養(yǎng)裝置

設(shè)備：

• 放置在顯微鏡旁邊的 ibidi 泵系統(tǒng)

• ibidi 載物臺(tái)頂部培養(yǎng)系統(tǒng)（氣體混合器和溫度控制器）控制舞臺(tái)頂部培養(yǎng)室的溫度、二氧化碳和濕度。

• 倒置顯微鏡

優(yōu)點(diǎn)：

• 細(xì)胞處于適宜的溫度。

• 成本低。

缺點(diǎn)：

• 沿灌流管的溫度梯度可能有產(chǎn)生氣泡。

• 低 CO2 輸入到培養(yǎng)基中。孵育室（提供 CO2）中的暴露時(shí)間非常短。

• 長(zhǎng)期不穩(wěn)定。

適合：

• 短期實(shí)驗(yàn)。

3. 設(shè)置載物臺(tái)頂部培養(yǎng)裝置和臺(tái)式培養(yǎng)箱

設(shè)備：

• ibidi 泵系統(tǒng)

• 臺(tái)式培養(yǎng)箱

• ibidi 載物臺(tái)頂部培養(yǎng)系統(tǒng)（氣體混合器和溫度控制器）控制載物臺(tái)頂部培養(yǎng)室的溫度、二氧化碳和濕度。

• 倒置顯微鏡

優(yōu)點(diǎn)：

• 細(xì)胞可以保持在 37°C，因?yàn)榕囵B(yǎng)基的冷卻只發(fā)生在從培養(yǎng)箱到載物臺(tái)頂部培養(yǎng)的管道中。

• CO2 供應(yīng)提供給儲(chǔ)存器培養(yǎng)基和通道玻片。為獲得最佳 CO2 供應(yīng)，泵回端口連接到小型培養(yǎng)箱的氣體。

• 中長(zhǎng)期穩(wěn)定。

缺點(diǎn)：

• 沿灌注管的溫度梯度可能會(huì)在長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)會(huì)產(chǎn)生氣泡。

適合：

• 細(xì)胞需要控溫的長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)。

• 更長(zhǎng)的時(shí)間段，帶有額外的氣泡捕集器。

 

 

 

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