Lipidnano Super RNAi轉(zhuǎn)染試劑使用說(shuō)明及應(yīng)用匯總

轉(zhuǎn)染技術(shù)作為核酸藥物的核心關(guān)鍵技術(shù)，目的是能夠高效率的進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)染和控制轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞毒性，選擇同立海源LipidnanoTM Super RNAi 轉(zhuǎn)染試劑，你關(guān)注的產(chǎn)品疑問(wèn)，公司首席品牌官‘小海’負(fù)責(zé)給大家做相關(guān)解答~

LipidnanoTM Super RNAi 轉(zhuǎn)染試劑的應(yīng)用范圍？
適合將siRNA和miRNA等小RNA高效地輸送到廣泛的細(xì)胞類型中。

LipidnanoTM Super RNAi 轉(zhuǎn)染試劑與傳統(tǒng)轉(zhuǎn)染試劑明顯不同的方面？
傳統(tǒng)轉(zhuǎn)染試劑可通過(guò)表面正電荷幫助 siRNA 大量攝取入胞，但入胞后 siRNA 內(nèi)含體逃逸水平低，造成攝取的 siRNA 無(wú)法發(fā)揮作用，同時(shí)造成細(xì)胞毒性。本品為非強(qiáng)正電型脂質(zhì)轉(zhuǎn)染試劑，避免細(xì)胞大量攝取造成的毒性，但本品可提升細(xì)胞內(nèi)吞后的 siRNA 內(nèi)含體逃逸效率，通過(guò)促進(jìn)內(nèi)含體逃逸使更多 siRNA 釋放入細(xì)胞質(zhì)中實(shí)現(xiàn)高效基因沉默作用。故在細(xì)胞水平上通過(guò)熒光標(biāo)記 siRNA 進(jìn)行條件優(yōu)化的方法不適用于本轉(zhuǎn)染試劑。推薦使用 Western Blot 或 QPCR 方式對(duì)最佳轉(zhuǎn)染濃度進(jìn)行優(yōu)化。

LipidnanoTM Super RNAi 轉(zhuǎn)染試劑對(duì)細(xì)胞類型有限制嗎？
對(duì)大多數(shù)貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)染，部分原代細(xì)胞和轉(zhuǎn)化細(xì)胞株均可使用。

對(duì)待轉(zhuǎn)染細(xì)胞有什么要求？
通常健康的細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率較高，較低的傳代數(shù)能確保每次實(shí)驗(yàn)所用細(xì)胞的穩(wěn)定性。推薦用 50 代以下的細(xì)胞轉(zhuǎn)染。

如何對(duì)轉(zhuǎn)染效果進(jìn)行評(píng)價(jià)？
細(xì)胞轉(zhuǎn)染后，不同細(xì)胞和 siRNA 效率存在差異。在 mRNA 水平觀察 siRNA 效果的最佳時(shí)間是轉(zhuǎn)染后24-48小時(shí)，在蛋白水平觀察siRNA效果的最佳時(shí)間是轉(zhuǎn)染后48-72小時(shí)。siRNA干擾是非線性的，不同基因半衰期存在較大差異，首次進(jìn)行 siRNA 干擾效果測(cè)定時(shí)，建議多點(diǎn)測(cè)定，確定最佳測(cè)定時(shí)間點(diǎn)。

同立海源 LipidnanoTM Super RNAi 轉(zhuǎn)染試劑（貨號(hào)：TL-1001）是一款高效能、非強(qiáng)正電型脂質(zhì)轉(zhuǎn)染試劑，用于siRNA介導(dǎo)的基因敲低實(shí)驗(yàn)，適合將siRNA和miRNA等小RNA高效地輸送到廣泛的細(xì)胞類型中。特有的超高細(xì)胞利用率，在低攝取量下即可達(dá)到高效的靶基因敲低水平，轉(zhuǎn)染效果優(yōu)于行業(yè)同類型競(jìng)品。

01 應(yīng)用范圍
① 貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)染
② 部分原代細(xì)胞和轉(zhuǎn)化細(xì)胞株的基因轉(zhuǎn)染
③ siRNA高通量轉(zhuǎn)染試驗(yàn)。

02 操作流程