CHO-S細胞系-CHO-K細胞系和 CHO-DG44細胞系的區(qū)別介紹
瀏覽次數(shù):1656 發(fā)布日期:2023-8-15
來源:蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司
CHO細胞是哺乳動物細胞中最常見的細胞系之一,CHO是Chinese Hamster Ovary(中國倉鼠卵巢)的縮寫。這種細胞系是從中國倉鼠的卵巢組織中獲得的。CHO細胞系在生物制藥和生物學研究中被廣泛應用,特別是在重組蛋白的產(chǎn)生和藥物研發(fā)方面。它具有較高的細胞生長速度、良好的穩(wěn)定性和較強的表達能力,使其成為一種理想的工具細胞系。CHO細胞系的種類繁多,其中最常見的有CHO-S、CHO-K和CHO-DG44等3種。
一、CHO-S細胞系-CHO-K細胞系和 CHO-DG44細胞系的特點:
1. CHO-S細胞系:
CHO-S(CHO Suspension)是CHO細胞系中的一種,它是一種懸浮細胞系,具有較高的生長速度和產(chǎn)量。由于其適應性廣泛,CHO-S細胞常被用于重組蛋白的大規(guī)模表達和生產(chǎn)。CHO-S細胞系的特點有:
- 生長速度快,能夠適應高密度培養(yǎng);
- 蛋白質(zhì)表達水平高,適合大規(guī)模表達;
- 適用于多種表達系統(tǒng),如哺乳動物細胞表達系統(tǒng)、真核細胞和原核細胞表達系統(tǒng);
- 可以通過基因工程進行改造,如基因敲除或過表達特定基因。
2. CHO-K細胞系:
CHO-K(CHO K1)是CHO細胞系中的另一種常見細胞系。CHO-K細胞系是攜帶有豐富乳糜酶A(Lactate Dehydrogenase)的細胞系,主要用于產(chǎn)生病毒疫苗、重組疫苗和抗體等。CHO-K細胞系的特點有:
- 乳酸代謝能力強,適合大規(guī)模培養(yǎng)和發(fā)酵;
- 乳糖酶A活性高,能夠?qū)θ樘沁M行降解;
- 在病毒疫苗和抗體藥物生產(chǎn)中的應用廣泛;
- 可以通過基因工程進行改造,如改變酶活性或增加對特定抗原的敏感性。
3. CHO-DG44細胞系:
CHO-DG44是一種雙倍體的CHO細胞系,常用于抗體的生產(chǎn)和分泌表達。CHO-DG44細胞系的特點有:
- 在有限培養(yǎng)條件下能夠?qū)崿F(xiàn)高重組抗體的產(chǎn)量;
- 可以進行高密度培養(yǎng)和持續(xù)培養(yǎng);
- 穩(wěn)定遺傳性強,能夠長期保持克隆的表達特性;
- 適合于抗體藥物生產(chǎn)和高通量篩選。
二、這三種細胞系在培養(yǎng)方法上的主要區(qū)別:
CHO-K細胞系、CHO-S細胞系和CHO-DG44細胞系是CHO細胞系的不同亞型,它們在培養(yǎng)方式上存在一些區(qū)別:
1. 細胞生長特性:
- CHO-K細胞系:CHO-K細胞系是最常用的CHO細胞系之一,生長速度較快,適應性較強。
- CHO-S細胞系:CHO-S細胞系是另一種常用的CHO細胞系,生長速度相對較慢,但穩(wěn)定性較好。
- CHO-DG44細胞系:CHO-DG44細胞系是一種具有較高表達能力的CHO細胞系,通常用于大規(guī)模蛋白質(zhì)表達。
2. 培養(yǎng)要求和介質(zhì)選擇:
- CHO-K細胞系:CHO-K細胞系可以在常規(guī)的DMEM或RPMI 1640等常見培養(yǎng)基中生長,并且對血清的需求較低。
- CHO-S細胞系:CHO-S細胞系通常在CD系列的無血清培養(yǎng)基中生長,如CD-CHO、CD OptiCHO等。
- CHO-DG44細胞系:CHO-DG44細胞系通常在CD系列的無血清培養(yǎng)基中生長,如CD-DG44。
3. 表達能力和適用范圍:
- CHO-K細胞系和CHO-S細胞系在蛋白質(zhì)表達方面具有較高的潛力,可用于表達多種重組蛋白。
- CHO-DG44細胞系在高效表達重組蛋白方面表現(xiàn)出色,常用于生產(chǎn)大規(guī)模的重組蛋白。
雖然這些細胞系在培養(yǎng)方法上存在差異,但都需要培養(yǎng)在無菌、溫度恒定、氣體調(diào)節(jié)等條件下,并使用適當?shù)呐囵B(yǎng)基、補充物和培養(yǎng)方法來維持細胞的健康生長和增殖。具體的培養(yǎng)方法應根據(jù)細胞系的特性和要求進行調(diào)整和優(yōu)化。
二、CHO-S細胞系的應用。
CHO-S細胞系作為一種常用的啟動細胞系,廣泛應用于生物制藥領域。以CHO-S細胞系為基礎,通過基因工程技術和相應的培養(yǎng)條件調(diào)控,可以實現(xiàn)特定重組蛋白的高效表達和產(chǎn)量提高。例如,CHO-S細胞系被用于生產(chǎn)一些世界知名的生物藥物,如抗體藥物 trastuzumab(赫賽珠單抗)和 rituximab(利妥昔單抗)等。
此外,CHO-S細胞系的研究和應用也涉及到基因編輯和基因調(diào)控等前沿領域。近年來,人們利用CRISPR-Cas9基因編輯技術成功實現(xiàn)了對CHO-S細胞系中特定基因的功能敲除或過表達,從而進一步優(yōu)化細胞的性狀和產(chǎn)物的表達。
總體而言,CHO細胞系在生物制藥領域發(fā)揮了重要的作用,其應用不僅限于蛋白質(zhì)表達和生產(chǎn),還涉及基因編輯和基因調(diào)控研究。CHO-K細胞系、CHO-S細胞系和CHO-DG44細胞系在細胞生長特性、培養(yǎng)要求和介質(zhì)選擇以及表達能力和適用范圍上存在一些差異。選擇合適的CHO細胞系應根據(jù)實驗或生產(chǎn)需求和目標蛋白的特性來確定。