前言
小球藻(Chlorella pyrenoidosa)為綠藻門小球藻屬普生性單細胞綠藻(圖1),是一種球形單細胞淡水藻類的高效光合植物,以光合自養(yǎng)生長繁殖,廣泛分布在淡水水域,適應能力極強,擁有較好的生存能力, 繁殖快速。小球藻中的蛋白核小球藻含有豐富的蛋白質、維生素、礦物質、食物纖維、核酸及葉綠素等,具有降脂、降壓、降血糖、預防和改善動脈粥狀硬化等功能,有很高的營養(yǎng)價值與醫(yī)用價值。
圖1 蛋白核小球藻
開放式和封閉式培養(yǎng)模式是目前用于微藻培養(yǎng)的主要培養(yǎng)模式。開放式培養(yǎng)模式結構簡單、操作成本低,但是操作條件不易控制,溫度和光照強度隨地域環(huán)境和季節(jié)更替變化較大,且易受雜菌污染。封閉式反應器操作條件便于控制,如培養(yǎng)液酸堿度、營養(yǎng)鹽濃度、 光照條件、溫度等,且不易染菌,產量較高,可用于菌株的擴大培養(yǎng)。一般封閉式光生物反應器有:管道式、平板式、柱狀氣升式、攪拌式、浮式薄膜袋等。
本文提出了一種內置光源攪拌式生物反應器在小球藻上的應用培養(yǎng),選用迪必爾生物工程(上海)有限公司自研的T&J-Lux A 5L攪拌式光照生物反應器(圖2),為具有光照需求的菌株便捷式高密度培養(yǎng)提供了有效的解決方案。
圖2 T&J-Lux A 5L 光照生物反應器
方法與結果
實驗菌株
小球藻(FACHB-5):購自中國科學院水生生物研究所
實驗設備
T&J-Lux A 5L :迪必爾生物工程(上海)有限公司
工藝參數(shù)條件
見表1
表1 工藝參數(shù)設置
結果分析
本次實驗培養(yǎng)周期為13d,其中在第7d、9d、11d分別一次性補加BG11三倍濃縮液50ml,培養(yǎng)到第12d得到了最優(yōu)的結果,結果數(shù)據(jù)見生長趨勢曲線圖(圖3),其中OD670值為1.676,藻密度為64.5×106個/ml,細胞干重為2.4g/L。本次實驗比同期搖瓶的實驗產量OD670值提高了67.6%(搖瓶OD670值0.946),藻密度值提高了168%(搖瓶藻密度值為24×106個/ml),細胞干重提高了152%(搖瓶細胞干重為0.95 g/L)。
圖3 蛋白核小球藻培養(yǎng)各指標生長趨勢曲線
結論
迪必爾生物工程(上海)有限公司自研的產品T&J-Lux A攪拌式光照生物反應器產品摒棄了傳統(tǒng)的外置光源具有的結構復雜、光強利用率低等結構設計缺點,而是采用內置光源模式,光源為內插式LED燈帶結構(圖4),設備結構更加緊湊、光強利用率更高。
圖4 內置光源結構設計
T&J-Lux A硬件系統(tǒng)光源選用RGB三色可調光源(圖5),每種光源的亮度分為256個等級(0-255),可根據(jù)不同的菌株培養(yǎng)需求自動調整設計光照強度(平均最大光強可以達到50000Lux 以上),因此可以滿足不同項目菌株對不同光照強度需求的培養(yǎng)。
圖5 RGB三色可調光源
T&J-Lux A軟件系統(tǒng)整合了光亮等級分步設計,可進行光亮參數(shù)梯度調節(jié),同時可進行光暗比的循環(huán)控制(圖6),滿足不同項目菌株的工藝生長需求。
圖6 光照梯度及循環(huán)控制調節(jié)