SRM靶向蛋白質(zhì)組學(xué)檢測技術(shù)的原理和步驟

SRM（Selected Reaction Monitoring，選擇反應(yīng)監(jiān)測）是一種質(zhì)譜技術(shù)，主要用于目標(biāo)蛋白質(zhì)或肽段的定量分析。SRM通常使用三重四極桿質(zhì)譜儀（triple quadrupole mass spectrometer）進(jìn)行操作，并且是一種高度敏感且特異性強(qiáng)的技術(shù)。

以下是SRM靶向蛋白質(zhì)組學(xué)檢測的一些基本原理和步驟：

1、目標(biāo)選擇：在實(shí)驗(yàn)開始前，首先需要選擇希望測量的目標(biāo)蛋白質(zhì)或肽段。

2、肽段選擇：為了檢測蛋白質(zhì)，通常會選擇代表性的肽段（通常被稱為“肽圖”或“簽名肽”）來進(jìn)行定量。

3、轉(zhuǎn)化為預(yù)定的離子：樣品在質(zhì)譜儀中被電離，并且在第一個四極桿中選擇預(yù)設(shè)的前體離子（precursor ion）。

4、碎裂：選定的前體離子在碰撞細(xì)胞中與惰性氣體碰撞，產(chǎn)生碎片離子。

5、檢測特定碎片離子：在第二個四極桿中，特定的碎片離子被選擇并檢測。這一步提供了SRM的高度特異性。

6、定量：通過測量特定肽段的特定離子的強(qiáng)度，可以定量目標(biāo)蛋白質(zhì)在樣品中的豐度。

圖1. 平行反應(yīng)監(jiān)測（PRM）

由于SRM的高度特異性和靈敏度，它已經(jīng)成為臨床研究和生物標(biāo)志物驗(yàn)證中的一個重要工具。與傳統(tǒng)的非靶向質(zhì)譜蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)相比，SRM提供了更高的定量準(zhǔn)確性，尤其是在低豐度蛋白質(zhì)的情況下。