一,什么是報告基因
報告基因:是一種編碼易被檢測的蛋白質(zhì)或酶的基因,其表達產(chǎn)物非常容易被鑒定。
傳統(tǒng)基因表達檢測方法的問題:
1.通常檢測基因表達是通過RT-qPCR或qPCR(mRNA水平)或Western Blot(蛋白水平)
2.操作方法繁瑣,難于檢測
報告基因的優(yōu)點:
1.蛋白表達水平檢測
2.檢測簡單,易于定量
二,什么是理想的報告基因
1.具有酶活性(信號放大能力
2.蛋白小
3.沒有內(nèi)源性表達,背景低
4.易于定量
5.高靈敏度、線性范圍寬
6.反應迅速
三,螢光素酶
在生物醫(yī)藥行業(yè)最主要的報告基因為熒光素酶報告基因。最常見的熒光素酶 (luciferase)基因來源于螢火蟲。螢火蟲螢光素酶在ATP、氧氣和Mg2+存在條件下,催化螢光素的氧化羧化,釋放出光信號,這是任何已知生物發(fā)光系統(tǒng)中效率較高的發(fā)光反應,因而被設計用來檢測和定量哺乳動物細胞中螢火蟲螢光素酶的表達。相對于其他報告基因,螢光素酶具有諸多優(yōu)勢:檢測靈敏度高,型號穩(wěn)定性好,操作方便。
CHASELECTION逐典螢光素酶報告基因檢測試劑盒旨在準確、靈敏、高效地測定螢火蟲螢光素酶活性,應用高通量藥物篩選、藥物活性檢測、大規(guī)模啟動子功能測定、信號通路等研究。
逐典螢光素酶報告基因
針對報告基因檢測不同的側重需求,逐典推出了3種檢測系統(tǒng)。
逐典螢光素酶報告基因優(yōu)勢:
1. 檢測靈敏度高,信號穩(wěn)定性好
HEK293-NFK B-LUC細胞加入梯度稀釋的TNF 在37C、5%CO條件下刺激6小時后,分別用增強型、超敏型、穩(wěn)定型檢測試劑進行信號檢測。
2. 操作方便
僅需將底物和螢光素酶檢測緩沖液混合后直接加入到細胞即可。
3. 穩(wěn)定性好
同時在10次反復凍融實驗中,逐典全系列報告基因檢測試劑盒顯示出較強的穩(wěn)定性。