洛美沙星檢測卡使用說明書（膠體金法）

 
1、 原理及用途
本產品應用競爭抑制膠體金免疫層析的原理制成，用于快速檢測畜牧、水產等養(yǎng)殖業(yè)中的洛美沙星（Lomefloxacin，LOM）殘留。
樣本溶液滴入金標微孔后，樣本溶液中的洛美沙星與金標抗體相結合，從而阻止金標抗體與纖維素膜上洛美沙星偶聯(lián)物結合。

2、 技術指標
2.1組織樣本檢測下限：5ppb（ng/ml）

3、 試劑盒組成

名稱	10T/盒	20T/盒
檢測卡（含金標微孔）	10個	20個
提取劑B	30ml×2	30ml×3
溶解劑	30ml×1	30ml×2
Nacl	25ml×1	25ml×2
LOM復溶液	4ml×1	8ml×1
說明書	1份	1份

4、 需要的器材和試劑
4.1 儀器：均質器 、氮氣吹干裝置、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平（感量0.01g）
4.2 微量移液器：單道20µl-200µl，100µl-1000µl

5、 樣本前處理
5.1 樣本處理前須知：
實驗器具必須潔凈并使用一次性吸頭，以避免污染干擾實驗結果。
5.2 配液：無
5.3 樣本前處理步驟：
5.3.1魚蝦組織
（建議蝦要去掉頭和殼后徹底清洗干凈，魚要去鱗后取魚背部油脂較少的部位進行實驗，樣本應當避光冷藏保存）
1．魚、蝦、畜禽肉、雞肉等去皮，用均質器均質樣本，取3g去脂肪組織樣本，加入到配套的15ml離心管中。
2．向離心管中準確加入提取劑B 4ml，加入Nacl溶液2ml,將瓶塞蓋緊密封，劇烈振蕩3分鐘，4000rpm離心3分鐘。
3．用吸管取分層后的上層清液(切勿吸取下層)2ml±0.2ml加入到配套5ml離心管中，用氮吹儀或吹風機吹干（離心管管底有部分顆粒狀未吹干黃色油脂屬正常現(xiàn)象）.
4. 向吹干的離心管中加入1mL溶解劑，劇烈振蕩復溶離心管底及內壁固體殘留物，然后加入0.3mL配套稀釋液，充分混勻30s后靜置1分鐘至明顯分層；
5. 吸取120ul分層后的下層溶液，此溶液即為待檢液；

6、 實驗步驟
6.1 撕開檢測卡鋁箔包裝袋，取出檢測卡，放于平整、潔凈的臺面上。
6.2 取已準備好的待測樣本溶液120ul（5-6滴）加入到金標微孔中，等待反應2分鐘后，用滴管吹打至完全溶解孔內紫紅色物質，再等待2分鐘，吸取孔內90ul（4-5滴）溶液滴加到加樣孔中，加樣后開始計時；
6.3 按室溫下放置5-8分鐘判斷結果，其他時間結果判讀無效。

7、 結果判斷
陰性              陽性                無效
陰性：在檢測窗內，對照線（C）出現(xiàn)紫紅色線，檢測線（T）顯色與對照線一致或更深，表示樣品中濃度低于檢測限，或不含有。
陽性：在檢測窗內，對照線（C）出現(xiàn)紫紅色線，檢測線（T）不顯色或比對照線淺（備注：5分鐘后，T線明顯顯綠色的可判定為陽性），表示樣品中濃度高于檢測限。
無效：在檢測窗內，對照線（C）不出現(xiàn)紫紅色線。

8、 注意事項
8.1 過期或鋁箔袋破損的產品，均不可使用。
8.2 檢測卡從冰箱中取出時應恢復到室溫后打開，打開的檢測卡應盡快使用以免受潮后失效。
8.3 不要觸摸檢測卡中央的白色膜面。
8.4 取液滴管不可混用，以免交叉污染。
8.5 待檢樣品溶液需清亮、無混濁顆粒、無細菌污染，否則容易導致阻塞、顯色不明顯等異�，F(xiàn)象，影響實驗結果的判定。

9、 貯藏及保存期
儲藏條件：試劑盒于2-30℃干燥環(huán)境下保存。
保 質 期：該產品有效期為1年，生產日期見包裝盒。