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活細胞成像應用于藥物對血管生物學影響的研究

瀏覽次數(shù)：418　發(fā)布日期：2025-1-16　來源：本站　僅供參考，謝絕轉(zhuǎn)載，否則責任自負

研究背景：
本研究介紹了一個血管表型和蛋白質(zhì)組學分析（VPT）平臺（一種用于血管生成研究的創(chuàng)新設備，可在開放的微流體環(huán)境中培養(yǎng)內(nèi)皮層）通過使用抗血管藥對細胞骨架完整性和血管生成萌芽的影響，驗證VPT平臺可以利用3D形態(tài)學檢測核蛋白質(zhì)分析結合，觀測萌芽數(shù)目以及藥物作用下蛋白質(zhì)的變化。VPT平臺為深入了解與細胞周期、細胞骨架、細胞衰老和血管生成相關的信號通路提供了依據(jù)，加深我們對藥物對血管生物學影響的理解，以及后續(xù)對血管以外的其他模型的蛋白質(zhì)組和核形態(tài)學特征的監(jiān)測。

血管生成的檢測方式：
血管生成的核心過程是血管內(nèi)皮細胞的增殖、遷移和管腔形成。使用活細胞成像技術，研究人員可以實時觀察血管內(nèi)皮細胞如何響應生長因子的刺激，如何在組織中遷移并形成新的血管管腔。本文利用Celloger Mini Plus實時監(jiān)測48h內(nèi)血管形態(tài)變化。

在C通道中放入無細胞的水凝膠，更突出血管生成芽。
實驗過程：
利用內(nèi)皮培養(yǎng)基培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細胞（HUVEC; Lonza），培養(yǎng)2天后形成內(nèi)皮細胞單層，在C通道觀察到芽的長度達到通道C的20%時，分別使用靶向抑制VEGF，VEGFR，自噬和增殖的7種藥物處理，使用Celloger Mini Plus 密切監(jiān)測藥物處理后48h內(nèi)血管的芽長和芽數(shù)目的變化。

圖1.實驗流程示意圖

圖2.不同藥物處理下血管的形態(tài)

研究人員通過Celloger Mini plus密切監(jiān)測血管的生長狀態(tài)，通過成像設備發(fā)現(xiàn)貝伐珠單抗和卡博替尼治療誘導的變化顯示出相似的趨勢，而渥曼青霉素和紫杉醇治療顯示出顯著差異。發(fā)現(xiàn)紫杉醇具有最顯著的影響。證明形態(tài)學變化和蛋白表達差異之間的明確相關性，強調(diào)了細胞骨架蛋白改變和血管生成形態(tài)之間復雜相互作用。
綜上，活細胞成像是研究血管生成的核心技術，可實時動態(tài)觀察內(nèi)皮細胞的遷移、增殖和管狀結構形成過程，直觀揭示血管生成的動態(tài)機制。它還能追蹤關鍵分子信號（如VEGF等）的時空分布，研究微環(huán)境對血管生成的影響，并為抗血管生成藥物篩選提供高效手段。

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