貼壁細(xì)胞培養(yǎng)方法（平面2D培養(yǎng)、攪拌式培養(yǎng)、微載體培養(yǎng)）優(yōu)缺點(diǎn)比較

【Esco科學(xué)貼士】貼壁細(xì)胞-----真正的貼壁、線性的放大（潮汐式反應(yīng)器）

細(xì)胞反應(yīng)器是某種細(xì)胞的培養(yǎng)生長代謝過程的反應(yīng)器，這個(gè)過程需要控制的條件比較多，比較復(fù)雜。

細(xì)胞反應(yīng)器根據(jù)工作方式和功能的分類：

一、平面２Ｄ培養(yǎng)（培養(yǎng)皿、方瓶、滾瓶）：

優(yōu)點(diǎn)：成本低，利于種子細(xì)胞制備，前期條件摸索；

缺點(diǎn)：１.培養(yǎng)數(shù)量少，規(guī)模擴(kuò)大需要增加平面面積；

          ２.批次培養(yǎng)質(zhì)量不可控，產(chǎn)物回收檢測手段有限；

          ３.培養(yǎng)基使用量較大；

           4.５０個(gè)單位以上處理人力已非常吃力，人力成本較高；

           ５.配套基礎(chǔ)設(shè)備數(shù)量同步上升（如二氧化碳培養(yǎng)下等）；

二、攪拌式培養(yǎng)（攪拌器）：

優(yōu)點(diǎn)：技術(shù)成熟，專門用于細(xì)胞壁較厚的微生物培養(yǎng)或懸浮型培養(yǎng)體系；

缺點(diǎn)：

1.剪切力較大，放大后剪切力劇烈上升，貼壁細(xì)胞容易脫落死亡；

2.放大后培養(yǎng)基消耗較大；

3.占地面積較大，操作復(fù)雜；

4.容易產(chǎn)生氣泡，不利于培養(yǎng)體系穩(wěn)定；

三、微載體培養(yǎng)（固體床、搖擺式）：

優(yōu)點(diǎn)：細(xì)胞附著程度大于攪拌器式，貼壁細(xì)胞培養(yǎng)效果明顯上升；

缺點(diǎn)：

1.貼壁細(xì)胞面臨的剪切力問題沒有得到徹底改變；

2.相較于平面培養(yǎng)稍微改善，但溶氧量還是受到限制（固體床尤為明顯，溶氧量存在縱向和橫向梯度）；

3.微載體與細(xì)胞分離困難，細(xì)胞聚團(tuán)現(xiàn)象嚴(yán)重；

4.放大效果較差

四、潮汐式（呼吸式）培養(yǎng)：

1.貼壁細(xì)胞；

2.3D培養(yǎng)；

3.0.5升到5000L的線性放大；

4.極高的細(xì)胞密度；

5.成本的：細(xì)胞被固定在專用非微型載體中，細(xì)胞收獲或產(chǎn)物收獲分離更容易；

6.雙向供氧方式：達(dá)到供氧狀態(tài)；

7.零剪切力、無泡沫：緩慢的液面上下移動(dòng)；

8.3個(gè)月以上連續(xù)培養(yǎng)；