百奧賽圖IL33人源化哮喘模型小鼠介紹

白細胞介素33（IL33）屬于IL1細胞因子超家族的成員，在結構上IL33在其氨基端部分具有螺旋-角-螺旋結構，其中存在涉及染色質結合基序和核定位信號, 在羧基端部分是β-三葉結構域，可以與孤兒受體ST2結合^[1]。IL33可由多種類型細胞表達，包括成纖維細胞，肥大細胞，樹突細胞，巨噬細胞，成骨細胞，內皮細胞和上皮細胞。

研究表明，IL33對肺和腸道的固有粘膜免疫，氣道炎癥和外周抗原特異性反應具有重要意義。IL33通過刺激Th2型細胞以及各種免疫細胞包括嗜堿性粒細胞、肥大細胞、嗜酸性粒細胞和天然輔助細胞 (natural helper,NH) 等表達ST2并產(chǎn)生Th2細胞因子（如IL4、IL5、IL13和趨化因子等），在各種過敏性炎癥中發(fā)揮關鍵作用^[2]。當IL33、ST2和IL1RAcP組成受體復合物可以作為細胞因子的“警報素”，將信息轉移至胞內（ST2L和IL1RAcP是IL33作用所必需的）。IL33/ST2信號通路如下圖所示, ST2和IL1RAcP組成的受體復合物在細胞損傷或機械損傷期間釋放到細胞外，接收細胞外IL33信號導致Myd88、IRAK1/4和TRAF6募集，進一步促進轉錄因子NF-kB、JNK1/2和ERK1/2活化，引起炎癥反應。

 

研究表明胸腺基質淋巴細胞生成素 (TSLP) 主要對過敏原特異性IgE的產(chǎn)生/Th2分化有重要影響，與之不同的是IL33在哮喘發(fā)病機制對蛋白酶介導的與細胞損傷相關的先天性氣道炎癥至關重要^[3]。

 

綜上，越來越多的研究證實IL33在哮喘的發(fā)病中發(fā)揮重要作用，在全基因組相關性研究中發(fā)現(xiàn)，IL33及其受體基因是哮喘最敏感的基因，它可能是啟動和維持哮喘氣道炎癥的重要細胞因子，阻斷IL33與ST2的結合可能為哮喘治療提供新的途徑。百奧賽圖成功構建了人源化IL33哮喘模型小鼠，可為相關研究提供有力工具。

 

品系信息

 

 

IL33基因的RT-PCR分析

 

 

 

在純合子B-hIL33小鼠的脾細胞中可檢測到hIL33 mRNA，但未檢測到mIl-33 mRNA。通過ELISA分析野生型(WT)C57BL/6和純合子B-hIL33小鼠的肺研磨液，當用LPS處理時，小鼠IL33可在野生型小鼠中檢測到，而人IL33可在純合子B-hIL33小鼠中檢測到。ND，未檢出。n=3。

 

B-hIL33小鼠脾臟細胞亞群分析

 

 

從C57BL/6和B-hIL33小鼠(n=3)中分離脾細胞。采用流式細胞術測定白細胞亞群的比例。如上圖所示，純合子B-hIL33小鼠白細胞亞群的比例與C57BL/6小鼠相似，表明B細胞、T細胞、NK細胞、CD4⁺T細胞、CD8⁺T細胞、粒細胞、樹突狀細胞、巨噬細胞和單核細胞的分化不受hIL33人源化的影響。

 

B-hIL33小鼠脾臟T細胞亞群分析

 

從C57BL/6和B-hIL33小鼠(n=3)的脾臟中分離淋巴細胞。流式細胞儀檢測其中T細胞亞群的比例。如上圖所示，純合子B-hIL33小鼠淋巴細胞亞群的比例與 C57BL/6小鼠相似，表明T細胞分化不受hIL33人源化的影響。 

 

哮喘模型示構建及抗體評價方案

 

 

 

哮喘模型BALF中免疫細胞數(shù)的變化

 

 

利用B-hIL33小鼠(n=5)構建哮喘模型并進行給藥處理，流式檢測BALF中免疫細胞比例。結果顯示與對照組相比Etokimab Anolog給藥組嗜酸性粒細胞明顯減少。B-hIL33小鼠是評價人源IL33抗體的有力工具。

 

哮喘模型中IgE的產(chǎn)生

 

 

在研究終點時采集血清，進行IgE水平檢測。結果顯示，接受Etokimab Anolog治療的小鼠體內IgE水平遠低于未接受治療的小鼠。

 

參考資料

 

[1] Yang F , Zhu P , Duan L , et al. IL33 and kidney disease (Review)[J]. Molecular Medicine Reports, 2016, 13(1):3-8

[2] Yasuda K , Muto T , Kawagoe T , et al. Contribution of IL-33-activated type II innate lymphoid cells to pulmonary eosinophilia in intestinal nematode-infected mice[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2012, 109(9):3451-3456.

[3] Oboki K, Nakae S, Matsumoto K, Saito H. IL-33 and Airway Inflammation. Allergy Asthma Immunol Res. 2011;3(2):81–88. doi:10.4168/aair.2011.3.2.81.

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