淺析溶血對生物樣本分析的影響

 溶血指的是紅細胞破裂，血紅蛋白逸出釋放到血漿或血清中，可發(fā)生在體內和體外，影響溶血的因素也十分復雜。血漿血清發(fā)生溶血后，許多生理成分如血紅蛋白、膽紅素、磷脂等明顯增加，這些成分可能會影響溶血樣品中藥物的檢測。生物藥物分析的樣品一般為血漿或血清樣品，存在被測樣品少，樣品復雜及干擾物質多等問題，而且在實際的生物樣品分析工作中，采集的血漿或血清樣品常出現溶血的現象。
在進行生物藥物分析時，溶血的發(fā)生會影響待測物的色譜分離,溶血基質中可能會有一些特有的、與待測物質的共流出的內源性干擾;也可能影響待測物在質譜檢測中的基質效應,甚至紅細胞中釋放出的酶可能影響待測物的穩(wěn)定性。溶血導致的樣品測定數據不準確，將直接影響藥物的藥動學研究，生物樣本分析常包含在一些藥代動力學外包機構提供的服務中。
LC-MS/MS技術的應用，可獲得豐富、有效的化合物結構信息，建立快速、高效的分析研究體系，目前已成為體內生物藥物分析的重要方法。血漿樣本中原型藥物及代謝物的LC-MS測定法及其制劑的藥動學和人體生物等效性研究在藥物研發(fā)中至關重要。藥動學在不同方面的應用有利于為臨床的安全用藥提供相關依據，也能讓研究者更好的了解藥物特性。美迪西提供藥代動力學外包服務，藥代動力學實驗室已經通過CFDA的GLP認證，實驗研究遵循ICH、CFDA和FDA的指導原則，可以根據客戶需求設計并開展體內、體外藥代動力學試驗，為客戶提供一整套藥動學評價和優(yōu)化服務。
在對生物樣本進行分析時，要避免血清或者血漿樣品出現溶血現象，溶血的發(fā)生一般有以下原因：
（1）溶血的發(fā)生可能是由于疾病狀態(tài)、生理狀況等體內因素導致的。
（2）溶血的發(fā)生和樣本收集過程有直接的關系，如采血針口徑過小、抽血速度過快、采血點選擇不當、止血帶使用過久、采血管未充滿、采血后過度混搖、運輸過程中過度震蕩等，都會造成溶血。
（3）在轉運、儲存過程操作不當，如傳輸過程中劇烈震蕩;轉運時間長;轉運車溫度過高、劇烈震蕩等也會造成溶血。
其中，體外因素是造成溶血的主要原因。血漿或血清樣品一般是在不同時間點采集的，涉及周期長，影響因素多，溶血樣品的產生很難避免，因此研究人員需提前做好人員培訓，密切關注血樣采集的全過程，減少采集、離心、凍存及轉移任何一個環(huán)節(jié)可能發(fā)生的溶血。
據網上報道，溶血發(fā)生后會對生物樣品分析造成以下后果：
（1）影響藥物的穩(wěn)定性，紅細胞破裂釋放的酶可能造成藥物在溶血血漿中不穩(wěn)定，研究表明激素、維生素、嗎啡等在溶血血漿中穩(wěn)定性受到影響。
（2）影響與紅細胞有高親和力的藥物，使測定濃度比實際濃度偏高，藥物濃度可高數百倍，如輕微的溶血現象可使甲醋唑胺的濃度顯著提高。
（3）影響血漿結合率高的藥物，細胞內液造成藥物稀釋，測定濃度比實際濃度偏低。
（4）溶血使細胞生理成分增加，造成離子抑制或增強，基質效應顯著，影響目標分析物的測定。
總之，對于生化檢測來說，溶血現象的發(fā)生會引起檢測的誤差，造成檢驗質量下降等問題，為了提高生物藥物分析的準確性，需要對溶血現象的原因進行深入的分析，并找出解決問題的辦法。