小鼠還原型谷胱甘肽(GSH)elisa試劑盒使用說明書

實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中小鼠還原型谷胱甘肽(GSH)水平。用純化的小鼠還原型谷胱甘肽(GSH)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入還原型谷胱甘肽(GSH)，再與HRP標記的還原型谷胱甘肽(GSH)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的還原型谷胱甘肽(GSH)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中小鼠還原型谷胱甘肽(GSH)濃度。 

【規(guī)格參數(shù)】

指標名稱：小鼠還原型谷胱甘肽(GSH)elisa試劑盒      

規(guī)格：48T 96T

品牌：臻科生物

檢測波長：450nm

所需樣本體積：保險量50ul

適用范圍：僅供科研課題研究，不得用于臨床診斷。

檢測樣本種類：血清，血漿，尿液，組織勻漿，細胞上清液，腦脊液，灌洗液，糞便等樣本.

臻科供應(yīng)屬種有：人、大鼠、小鼠、豚鼠、人子、豬犬、牛羊、雞鴨、植物、魚、昆蟲ELISA試劑盒等

獨特優(yōu)勢】

1、優(yōu)勢明顯  我司產(chǎn)品具有靈敏度高、特異性強、重復(fù)性好等特點，品種齊全，操作簡便，最大限度的節(jié)省了實驗經(jīng)費。

2、品質(zhì)保障  產(chǎn)品保證質(zhì)量，出庫質(zhì)檢把控嚴格，保障提供給客戶的100%是優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品，運輸全程跟蹤，公司承諾有任何質(zhì)量問題包退換，誠信經(jīng)營，合作共贏。我們提供實驗室試劑、耗材一站式供應(yīng)服務(wù)，超低價，高品質(zhì)，進口品牌全線代理，優(yōu)勢的渠道，我們只做行貨，不用擔心質(zhì)量問題。

3、專業(yè)定制  公司推出專業(yè)定制試劑盒服務(wù)，全程有專業(yè)的技術(shù)老師對接客戶，直到定制成功為止。

4、免費代測 公司承諾訂購ELISA試劑盒，享全程技術(shù)指導(dǎo)和免費代測服務(wù)，全程有專業(yè)技術(shù)老師【樣本處理及要求】

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20 分鐘，離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20 分鐘后，離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。

3. 尿液：用無菌管收集，離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4. 細胞：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100 萬/ml 左右。通過反復(fù)凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩�標本融化后仍然保�?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

【操作步驟】

1.標準品的加樣：設(shè)置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL

2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3.加酶：每孔加入酶標試劑100μl，空白孔除外。

4.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。

5.配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。

6.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

7.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

8.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。

9.測定：以空白孔調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。