腫瘤免疫之細(xì)胞療法淺談及Countstar Rigel細(xì)胞計數(shù)分析在其中的應(yīng)用

腫瘤免疫治療，即通過重新啟動并維持腫瘤-免疫循環(huán)，恢復(fù)機體正常的抗腫瘤免疫反應(yīng)，從而控制與清除腫瘤的一種治療方法。由于其副作用小、治療效果明顯，已然成為癌癥治療重要支柱。目前，其主要治療手段有單克隆抗體類免疫檢查點抑制劑、治療性抗體、癌癥疫苗、小分子抑制劑和細(xì)胞治療等。其中，除用藥物解除腫瘤細(xì)胞對免疫細(xì)胞的抑制之外，另一主要思路在于，直接利用人體內(nèi)的免疫細(xì)胞，將它們在體外進行改造，大量復(fù)制后再回輸?shù)交颊唧w內(nèi)，最終達到治療腫瘤之目的（如圖一）。這即是小編往下準(zhǔn)備和大家聊一聊的腫瘤免疫之細(xì)胞療法。

一、細(xì)胞療法的主要類型：

1、CAR-T細(xì)胞療法
CAR-T細(xì)胞，全稱為嵌合抗原受體T細(xì)胞，是一種通過基因工程產(chǎn)生人工T細(xì)胞受體的T細(xì)胞。從人體中提取T細(xì)胞后，對其進行基因改造使之能表達CAR，CAR使T細(xì)胞具有靶向特定蛋白的能力，這種表達CAR的T細(xì)胞輸注入患者體內(nèi)后，能直接與腫瘤表面的特異性抗原相結(jié)合而被激活，然后開始增值并產(chǎn)生細(xì)胞毒性，從而更有效地靶向和消滅癌細(xì)胞。提取的T細(xì)胞既可以來自患者自身血液中的T細(xì)胞（自體），也可以來自其他健康供體的T細(xì)胞（異體）。

目前，從全球細(xì)胞治療的開發(fā)來看，CAR-T細(xì)胞治療持續(xù)占據(jù)主要地位，其在全球范圍內(nèi)已獲批準(zhǔn)或正在研發(fā)的細(xì)胞治療中占比超過五成，超過其余細(xì)胞療法類型的總和。而基于CAR-T細(xì)胞展現(xiàn)出的強大臨床療效，CAR-T細(xì)胞療法管線仍然在逐年大幅上漲。當(dāng)然，CAR-T細(xì)胞治療也面臨著諸多挑戰(zhàn)，主要有嚴(yán)重的細(xì)胞毒性，實體瘤內(nèi)的限制運轉(zhuǎn)、浸潤和激活，相對欠缺的體內(nèi)持久性，大規(guī)模生產(chǎn)制造和商業(yè)化問題，高昂的成本和價格問題。未來，CAR-T細(xì)胞治療或?qū)⒕劢褂诮鉀Q大規(guī)模生產(chǎn)制造和商業(yè)供應(yīng)、價格與支付模式、以及更安全的療效、更多適應(yīng)癥和瘤種的突破。由此，CAR-T細(xì)胞療法才能真正造福人類。

2、TCR-T細(xì)胞療法
TCR-T，即T細(xì)胞受體工程化T細(xì)胞治療，是一種新型的過繼細(xì)胞療法，主要利用基因編輯技術(shù)，將能特異性識別腫瘤抗原的T細(xì)胞受體（TCR）基因?qū)�入患者T細(xì)胞內(nèi)，使其外源性表達TCR，從而具有特異性殺傷腫瘤細(xì)胞的活性。CAR-T和TCR-T都屬于經(jīng)基因工程技術(shù)改造的T細(xì)胞療法，其中CAR-T是通過識別腫瘤細(xì)胞表面抗原靶點而發(fā)揮作用，目前僅被批準(zhǔn)用于白血病、淋巴瘤等少數(shù)腫瘤，對治療實體瘤效果不佳。相比之下，TCR-T能夠識別腫瘤內(nèi)外多種抗原靶點，可廣泛用于治療包括實體瘤在內(nèi)的多種惡性腫瘤。

3、NK細(xì)胞療法
NK細(xì)胞，即自然殺傷細(xì)胞，其在人體的先天免疫系統(tǒng)中起著重要作用。作為人體先天免疫的一部分，能對身體內(nèi)遇到的各種病原體迅速做出反應(yīng)，是抵御危險感染或異常細(xì)胞的第一道防線，是身體對抗癌癥的正常儲備。

目前，各種提高NK細(xì)胞效應(yīng)功能的途徑已經(jīng)被開發(fā)。主要有經(jīng)基因修飾的NK細(xì)胞，例如，CAR-NK細(xì)胞等。此類經(jīng)基因修飾過的NK細(xì)胞可在免疫細(xì)胞治療實體瘤方面起到重要作用。

4、TIL細(xì)胞療法
TIL全稱腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞。該療法首先需要對患者的腫瘤組織進行基因測序，找到特定的基因突變，然后從腫瘤組織中篩選出能特異性識別基因突變癌細(xì)胞的淋巴細(xì)胞，然后在體外對這些特殊的淋巴細(xì)胞進行擴增，最終再回輸?shù)交颊唧w內(nèi)。

TIL細(xì)胞療法目前面臨的挑戰(zhàn)主要是抗腫瘤作用周期短，只能針對部分腫瘤（黑色素瘤等），TIL細(xì)胞制備過程復(fù)雜，且對活性細(xì)胞數(shù)量要求高，以百千億計（遠高于CAR-T的1億）。但是，由于TIL細(xì)胞來源于患者腫瘤組織，本身便具有更強的靶向腫瘤細(xì)胞的能力，因此，相對于CAR-T/TCR-T細(xì)胞，TIL細(xì)胞不需要經(jīng)工程化技術(shù)將CAR/TCR轉(zhuǎn)入T細(xì)胞，本身便具有特異性靶向腫瘤細(xì)胞的能力。此大大降低了治療成本，也是TIL細(xì)胞療法獨特的優(yōu)勢。

5、巨噬細(xì)胞療法
與其他CAR細(xì)胞療法中使用的細(xì)胞類型不同，巨噬細(xì)胞在免疫抑制性微環(huán)境中更容易浸潤腫瘤，是先天性免疫的關(guān)鍵效應(yīng)細(xì)胞，具有強大的吞噬作用；可以作為抗原呈遞細(xì)胞，啟動患者自身的適應(yīng)性免疫系統(tǒng)。尤其是經(jīng)過基因工程改造的嵌合抗原受體巨噬細(xì)胞（CAR-M），其在治療實體瘤的應(yīng)用中有顯著療效。

二、Countstar Rigel在細(xì)胞治療中的應(yīng)用

1、AO/PI雙熒光計數(shù)法對細(xì)胞濃度和活率的檢測

從采集樣本，到病人回輸和留樣檢測，對細(xì)胞濃度計數(shù)、大小和活率檢測，CountstarRigel AO/PI雙熒光染色法可得到更準(zhǔn)確的結(jié)果。

2、符合法規(guī)要求

Countstar Rigel符合GMP要求以及FDA21 CFR Part 11法規(guī)，同時我們可以提供GMP要求的3Q驗證，也可以對接或定制符合GMP要求的云端或?qū)嶒炇夜芾硐到y(tǒng)。

3、多種實驗功能轉(zhuǎn)染，細(xì)胞周期，細(xì)胞殺傷，CD分子檢測等，與FCS軟件結(jié)合分析可得到細(xì)胞圖像和類流式數(shù)據(jù)。

三、總結(jié)

Countstar Rigel助力于細(xì)胞治療行業(yè)的發(fā)展。從對目標(biāo)細(xì)胞的采集、分離、改造、擴增、質(zhì)控、回輸，凡是涉及細(xì)胞培養(yǎng)的過程，都需要對細(xì)胞的密度和活率進行檢測。Countstar Rigel 可全程參與細(xì)胞治療的研發(fā)和生產(chǎn)�？拱┲�路漫漫，Countstar愿全力以赴為你趕走這個世界的陰霾，守護生命的每一刻。