濁度法利用鱟試劑進(jìn)行內(nèi)毒素檢測(cè)的方法步驟

首先我們要知道，濁度法又叫比濁法，是一種用鱟試劑與內(nèi)毒素反應(yīng)過程中的濁度變化而測(cè)定內(nèi)毒素含量的方法。那濁度法到底是怎么利用鱟試劑進(jìn)行內(nèi)毒素檢測(cè)的呢？
 

首先需要將鱟試劑與反應(yīng)混合物進(jìn)行配比，通過與細(xì)菌內(nèi)毒素的作用反應(yīng)后，試管內(nèi)部會(huì)產(chǎn)生堅(jiān)硬的凝膠，而凝膠則會(huì)將液體變得渾濁起來(lái)，這時(shí)候根據(jù)鱟試劑和細(xì)菌內(nèi)毒素的反應(yīng)可以知道，在內(nèi)毒素濃度在20~100pg的條件下，試管的濁度程度是和細(xì)菌內(nèi)毒素呈線性關(guān)系的。根據(jù)這個(gè)試驗(yàn)可以知道，濁度法在試驗(yàn)中可以大大減少鱟試劑的使用量，而且整個(gè)操作過程是非�？焖佟⒏咝У�，整個(gè)試驗(yàn)操作過程也非常便捷，因?yàn)閮x器的半自動(dòng)化，試驗(yàn)人員可以非常容易上手。

在這個(gè)試驗(yàn)過程中，整個(gè)過程必須把握精準(zhǔn)度，對(duì)鱟試劑的稀釋比例一定要了解清楚，樣品也要小心翼翼處理，避免進(jìn)一步污染，然后各取0.1ml加入微孔板中，放入震顫儀中振動(dòng)60秒鐘，這個(gè)過程能充分將鱟試劑和樣品充分均勻混合。接著在37攝氏度放入環(huán)境下靜置一小時(shí)，然后使用使用光度計(jì)在360～380nm處讀取試驗(yàn)樣品的光密度值。這里還需將稀釋過的細(xì)菌內(nèi)毒素的一系列批次進(jìn)行陽(yáng)性對(duì)照，然后將光密度值和細(xì)菌內(nèi)毒素的含量繪制呈標(biāo)準(zhǔn)曲線，這樣就能準(zhǔn)確知道試驗(yàn)樣品的細(xì)菌內(nèi)毒素含量。

整個(gè)操作過程，時(shí)間的把控是非常重要的，時(shí)間越長(zhǎng)，濁度變化越明顯，正常情況下，靜置一小時(shí)即可。假如是在室溫的情況下，如果靜置長(zhǎng)時(shí)間的話，試驗(yàn)樣品的濁度程度也會(huì)有所增強(qiáng)，所以靜置結(jié)束后，一定要馬上讀取該試驗(yàn)樣品的光密度值，而且還應(yīng)該每分鐘讀取一次，重復(fù)四次進(jìn)行，再選取它們的平均值，這樣細(xì)菌內(nèi)毒素的含量才能準(zhǔn)備，但是要知道這里的變異系數(shù)是不能超過1%的。

以上就是濁度法利用鱟試劑進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)的方法，大家在檢測(cè)時(shí)一定要把握好細(xì)節(jié)，試驗(yàn)結(jié)果才能更準(zhǔn)確。