zenCELL owl 活細胞成像及分析系統(tǒng)在布魯利潰瘍細胞形態(tài)監(jiān)測中的應(yīng)用

布魯利潰瘍（BU）是一種容易被忽視的熱帶病，在全球30多個國家中都有發(fā)現(xiàn)。由于病變的特征是無痛且缺乏其他明顯的感染癥狀，如發(fā)燒等，通常發(fā)現(xiàn)較晚�；颊呓�(jīng)常出現(xiàn)大面積的開放性潰瘍，難以愈合，極端情況下需要截肢，導(dǎo)致終生殘疾。為了減少疾病負擔(dān)和嚴重的后遺癥，我們需要更好的了解BU的發(fā)病機制。
這篇文章來自英國薩里大學(xué)生物科學(xué)與醫(yī)學(xué)院微生物系，2022年1月發(fā)表于國際著名的病原微生物學(xué)術(shù)期刊《PLoS Pathogens》。

BU由潰瘍分歧桿菌及其外毒素霉菌內(nèi)酯的皮下感染引起，在受影響的皮膚組織中出現(xiàn)凝固性壞死和廣泛的纖維蛋白沉積。已有研究證實，在BU病變中血管系統(tǒng)被霉菌內(nèi)酯破壞。本文作者通過觀察BU病變中血管標志物的表達，對引發(fā)這些現(xiàn)象的原因進行了進一步探索。

該文章追蹤了來自8個BU患者活檢的連續(xù)組織切片內(nèi)的908條血管，對纖維蛋白、血栓調(diào)節(jié)蛋白、CD31、平滑肌肌動蛋白(SMA)、vWF、CD61和TF進行免疫組化分析，評估血管和凝血生物標志物表型，探討與纖維蛋白沉積的潛在聯(lián)系。同時，作者還對霉菌內(nèi)酯對于原代內(nèi)皮細胞（HDMEC）的影響進行了體外研究，為推動臨床觀察的過程尋求支持性證據(jù)。

作者采用了德國InnoME公司的zenCELL owl活細胞成像及分析系統(tǒng)來監(jiān)測霉菌內(nèi)酯作用下HDMEC的形態(tài)變化，并與滲透性誘導(dǎo)的炎癥刺激脂多糖（LPS）和IL-1β進行比較。霉菌內(nèi)酯處理的HDMEC最初保持正常的鵝卵石樣外觀，一些圓形細胞正在進行細胞分裂。作用 8 小時后，細胞形成獨特的細長外觀，在 16 小時時變得更加明顯，并在 24 小時時占據(jù)優(yōu)勢。這些變化都發(fā)生在霉菌內(nèi)酯誘導(dǎo)的細胞凋亡之前。
以上視頻監(jiān)測間隔均為30min，監(jiān)測時長均為24小時。所有視頻均經(jīng)過壓縮處理。

結(jié)果表明，內(nèi)皮細胞功能障礙在壞死區(qū)域附近的皮膚組織中很常見。霉菌內(nèi)酯可以顯著減少細胞連接蛋白，增強BU病變中的血管和淋巴管的高滲透性，從而允許含有組織因子（TF）的結(jié)構(gòu)和血漿蛋白進入皮膚組織，最終導(dǎo)致局部凝血和組織缺血。 德國InnoME公司自主研發(fā)和生產(chǎn)的zenCELL owl活細胞動態(tài)成像及分析系統(tǒng)，基于非標記、非侵入方法，原位記錄細胞實時生長和定量的分析數(shù)據(jù)。zenCELL owl體積小巧，耐溫耐濕，可在細胞培養(yǎng)箱內(nèi)長時間連續(xù)工作；通過24個顯微成像鏡頭，對24個視野進行連續(xù)的動態(tài)監(jiān)測和圖像獲取。zenCELL owl為用戶提供高質(zhì)量圖像、視頻、統(tǒng)計學(xué)曲線和定量數(shù)據(jù)，實現(xiàn)細胞增殖／增殖抑制、細胞培養(yǎng)質(zhì)控／培養(yǎng)優(yōu)化、細胞形態(tài)變化、位置遷移／侵襲等諸多活細胞動態(tài)過程的監(jiān)測。

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https://doi.org/10.1016/j.jep.2021.113853

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