石蠟制片與冷凍制片的實驗步驟及高效得到高質量冰凍切片的方法介紹
組織學設備是免疫組化實驗的必備設備，而免疫組化的常用切片主要包括石蠟切片和冰凍切片兩種。
石蠟制片的步驟：
取材→脫水（固定、脫水、透明、浸蠟）→石蠟包埋→切片→染色、封片→鏡下觀察。
這里涉及到的常用基礎組織學設備有：脫水機、包埋劑、石蠟切片機、染色機、封片機、顯微鏡等。
冷凍制片的步驟：
取材→冷凍包埋→切片→染色（手動也行）→鏡下觀察。
必須用到的基礎組織學設備有：速凍儀、冷凍切片機、顯微鏡。
免疫組化有哪些痛點？免疫組化實驗根據(jù)樣本類型、抗體類型、切片要求等條件的不同，對應免疫組化要求也不同。同時石蠟切片在免疫組化實驗中制片步驟繁瑣，組織前處理要求高，可能破壞抗原，需要做抗原修復；而冰凍切片能夠較好地保存組織的抗原免疫活性，做免疫組化時不需抗原修復這一步。想要避開抗原修復這一步驟，免疫組化切片時可以選擇冰凍切片。冰凍切片雖然無需抗原修復，但在免疫組化時常常會遇到：
- 細胞內易形成冰晶而破壞細胞結構；
- 切片厚度也較石蠟的厚，會直接影響切片質量；
- 如果冷凍切片機箱體制冷不足，就需要使用速凍儀輔助冷凍包埋組織。
如何高效得到高質量冰凍切片？
瑞沃德冷凍切片機用于免疫組化實驗冷凍切片時，可解決以上所有難題 ：
1、緩解片子偏厚問題
▲圖：瑞沃德冰凍切片機切片實拍圖
- 壓縮機冷量輸出大可做二次溫控補償；PID控溫，使得箱體溫度在一定范圍內波動且可以自動恢復；
- 頂/級十字交叉導軌搭配五相高分辨率步進電機、精密絲桿和水平進樣滑塊，組成高精準進樣系統(tǒng)；
- 以上兩點保證切片無需設置過厚就能切出滿足需求的片子。
2、緩解冰晶產生的壓力
▲瑞沃德冰凍切片機可開啟快冷功能
冰晶主要產生于樣本冷凍包埋階段，因為冷凍過程緩慢從而產生冰晶，這就要求設備的冷凍效果要滿足樣本速凍需求。瑞沃德冷凍切片機速凍臺最低溫度可達-42℃，快速制冷點溫度最低可達-60℃，滿足速凍需求，同時箱體和樣本頭均可單獨制冷，從而減少冰晶產生，保證切片質量。
3、運維成本低
瑞沃德冷凍切片機具備2個半導體快速制冷點和15個常規(guī)制冷點，滿足任務量大的應用場景，同時速凍臺制冷效果達到行業(yè)國際標準，達到速凍包埋效果，無需使用速凍儀包埋。冷凍包埋成本更低。同時具備操作日志記錄，可及時有效開展切片工作復盤，優(yōu)化切片條件，提高切片質量。
4、自動切片考慮到一些新技術老師開展免疫組化實驗，對冷凍切片機不熟悉，無法掌握切片條件導致出現(xiàn)切片質量問題。瑞沃德冷凍切片機具備自動切片功能，設置好切片條件，開啟自動切片，保證切片質量高且穩(wěn)定同時，更加貼合新人的實驗場景，保證實驗高效開展
