嘌呤受體影響巨噬細胞內毒素生物學活性的表達過程與結果
巨噬細胞表達多種P2受體亞型，細胞外核苷酸能夠通過嘌呤能受體影響巨噬細胞的許多生物學活性，如影響誘導NO合成酶Ⅱ（NO synthase，NOS）表達。使用氧化ATP（oxidized ATP，oATP）可以使內毒素血癥的小鼠免于死亡，另外也可調節(jié)NO和氧自由基的表達從而影響LPS信號轉導效應等。巨噬細胞通過P2Z/P2X7，調節(jié)自由基介導的殺菌機制。
體外應用γ干擾素或LPS活化小鼠巨噬細胞，能夠殺死結核分枝桿菌和卡介苗，這主要通過NO依賴性的機制實現。Sikora等用oATP抑制INF-γ或LPS活化的J774細胞后，再觀察對細胞內BCG的殺死效應，結果表明oATP作為P2受體抑制劑，用它一起培育細胞24h后，活化巨噬細胞生產NO和殺死細胞內BCG的活力下降58%。而用oATP預處理并不能改變巨噬細胞感染細菌的效率，但可降低NO和抑制殺菌能力達65%。
在BCG和LPS反應體系中，P2Z能夠調節(jié)一氧化氮合成酶Ⅱ（NOS Ⅱ）的表達。巨噬細胞產生大量的NO需要NOSⅡ進行催化。實驗證實，oATP能夠促使NOSⅡ的生成。Northern blot分析顯示，BCG-感染J774細胞后，NOS Ⅱ的mRNA表達上調，而oATP能夠抑制上調。這些資料證實，oATP是通過抑制NOSⅡmRNA和蛋白質的積聚來阻止NO的生成的。
體外應用γ干擾素或LPS活化小鼠巨噬細胞，能夠殺死結核分枝桿菌和卡介苗，這主要通過NO依賴性的機制實現。Sikora等用oATP抑制INF-γ或LPS活化的J774細胞后，再觀察對細胞內BCG的殺死效應，結果表明oATP作為P2受體抑制劑，用它一起培育細胞24h后，活化巨噬細胞生產NO和殺死細胞內BCG的活力下降58%。而用oATP預處理并不能改變巨噬細胞感染細菌的效率，但可降低NO和抑制殺菌能力達65%。
在BCG和LPS反應體系中，P2Z能夠調節(jié)一氧化氮合成酶Ⅱ（NOS Ⅱ）的表達。巨噬細胞產生大量的NO需要NOSⅡ進行催化。實驗證實，oATP能夠促使NOSⅡ的生成。Northern blot分析顯示，BCG-感染J774細胞后，NOS Ⅱ的mRNA表達上調，而oATP能夠抑制上調。這些資料證實，oATP是通過抑制NOSⅡmRNA和蛋白質的積聚來阻止NO的生成的。
NOSⅡ基因的啟動子中存在NF-κB、AP-1的結合位點，因而NF-κB、AP-1也參與NOSⅡ基因表達的調節(jié)，oATP能夠抑制TNF-α，LPS、BCG誘導的NF-κB的活性，其抑制效率分別為82%、77%、65%。但oATP卻不能抑制H2O2，誘導的NF-κB的活性，這表明oATP的抑制具有特異性，且是經受體介導的NF-κB激活的途徑進行的，所以P2受體是通過干擾NF-κB、AP-1的活化來阻止NOSⅡ合成。NO、ROI由活化的巨噬細胞生成，在宿主的防御反應中起著重要作用。
oATP能夠抑制反應性氧中間物（reactive oxygen in-termediates，RO1）的生成，另外，P2Z基因敲除骨髓源性巨噬細胞ROI的生成，在數量上類似于PMA刺激的野生型巨噬細胞，因此P2Z受體阻止ROI 的生成可能是通過非P2X7，依賴性機制進行的。細胞外的核苷酸存在于細菌感染的位置上，實驗表明結核桿菌感染能夠促使巨噬細胞釋放ATP，且呈現劑量依賴性，與亞硝酸鹽積聚程度相一致，這反映被結核桿菌溶解的細胞可以使胞內的核苷酸釋放。機體胞內核苷酸可從血小板、死亡細胞、損傷的細胞中釋放出來，導致炎癥和組織破壞部位出現細胞外高濃度的核苷酸。
由于ROI和NO本身可促使病理炎癥反應和毒性作用，通過細胞外核苷酸變化調節(jié)，促進其主要在炎癥部位進行的表達，使未遭受損傷的組織免遭損害，因此使得有害的巨噬細胞效應器只在適當的生理背景中發(fā)揮作用。
標簽：
內毒素
