熒光曲線：免疫熒光中樣本反應(yīng)時(shí)間對熒光曲線和結(jié)果的影響
免疫熒光中樣本反應(yīng)時(shí)間對熒光曲線和結(jié)果的影響
我們本次試驗(yàn)選取抗原類項(xiàng)目（貓瘟）、炎癥類項(xiàng)目（CRP）在不同展板時(shí)間時(shí)檢測的熒光曲線和結(jié)果，并對檢測的熒光曲線和結(jié)果進(jìn)行分析，進(jìn)而判斷反應(yīng)時(shí)間對熒光曲線和結(jié)果的影響。
取來自同一只貓（貓瘟陽性）的三個(gè)糞便樣本，糞便量依次從少到多，加入稀釋液中，進(jìn)行十次顛倒混勻后，靜置3min，靜置完成后，滴加4滴稀釋后的樣本液于加樣孔中，同時(shí)加入陰性對照組（加同等量的稀釋液），本次試驗(yàn)采用外部展板（快速檢測）模式，分別取1-10分鐘的熒光曲線和檢測結(jié)果，觀察展板時(shí)間對熒光曲線和結(jié)果的影響。
從試驗(yàn)結(jié)果可以看出，在展板未充分時(shí)，對于熒光曲線圖和結(jié)果會產(chǎn)生很大影響，可能會造成陰陽性的誤判，當(dāng)展板充分后，檢測結(jié)果的重復(fù)性非常好，所以我們推薦使用內(nèi)部展板模式進(jìn)行檢測。
若檢測標(biāo)本為糞便或肛拭子，若加入的樣本量過多，會導(dǎo)致滴加樣本時(shí)的雜質(zhì)過多，造成展板時(shí)間過長或展板不充分的問題，會報(bào)錯(cuò)“無效檢測卡”或出現(xiàn)異常曲線。因此我們?nèi)∵m量糞便或肛拭子樣本后，應(yīng)再混勻后進(jìn)行靜置，取上清液進(jìn)行檢測。
試驗(yàn)二：
取來自一只CRP檢測陽性犬的血液樣本，將血液樣本顛倒混勻后，用一次性定量管取10uL血液，毛細(xì)管伸入稀釋液面以下，輕捏吸氣氣囊，來回清洗毛細(xì)管2-3次，清洗完成后，顛倒混勻樣本，取100uL樣本液于加樣孔中，同時(shí)加入陰性對照組（加100uL的稀釋液），本次試驗(yàn)采用外部展板（快速檢測）模式，分別取1-3分鐘的熒光曲線和檢測結(jié)果，觀察展板時(shí)間對熒光曲線和結(jié)果的影響。
從試驗(yàn)結(jié)果可以看出，對于抗體或炎癥類的檢測項(xiàng)目，在展板不充分時(shí)，也會對結(jié)果造成很大影響，從而影響我們對疾病的診斷。
從本次試驗(yàn)我們不難看出，我們的熒光檢測結(jié)果，不僅與動物本身的疾病狀況有關(guān)，也與我們檢測時(shí)加樣量的多少（糞便量過多導(dǎo)致展板異常）、展板時(shí)間（展板時(shí)間不足影響檢測結(jié)果）有密切關(guān)系。推薦大家選擇內(nèi)部展板模式進(jìn)行免疫熒光檢測。
